7-أمينوأكتينوميسين د

📅 آخر تحديث: ٣ أغسطس ٢٠٢٦
✍️ نُشر في: ٣ أغسطس ٢٠٢٦
📷 يحتوي على 2 صور
الموسوعة الحرة

يُعدّ 7-أمينوأكتينوميسين د ( 7-AAD ) مركباً كيميائياً فلورياً ذا ألفة عالية للحمض النووي DNA . ويُستخدم كعلامة فلورية للحمض النووي في المجهر الفلوري وقياس التدفق الخلوي . ويتداخل هذا المركب مع الحمض النووي المزدوج، وله ألفة عالية للمناطق الغنية بالـ GC ، [ 2 ] مما يجعله مفيداً في دراسات التلوين الكروموسومي . [ 3 ]

التطبيقات

يتميز جزيء 7-AAD بامتصاص أقصى عند 546  نانومتر، ويمكن إثارته بكفاءة عالية باستخدام ليزر هيليوم-نيون  بطول موجي 543 نانومتر ؛ كما يمكن إثارته بكفاءة أقل باستخدام خطوط ليزر أرجون بطول موجي 488 نانومتر أو 514 نانومتر. يتميز انبعاثه بانزياح ستوكس كبير جدًا ، حيث يبلغ ذروته في منطقة الأحمر الداكن عند 647 نانومتر. لذا، يتوافق جزيء 7-AAD مع معظم الفلوروفورات الزرقاء والخضراء ، وحتى مع العديد من الفلوروفورات الحمراء ، في التطبيقات متعددة الألوان.   

لا يخترق صبغ 7-AAD أغشية الخلايا السليمة بسهولة ؛ فإذا ما استُخدم كصبغة لتصوير تألق الحمض النووي، يجب جعل غشاء الخلية نفاذاً أو إتلافه. ويمكن استخدام هذه الطريقة مع تثبيت العينات بالفورمالديهايد.

يُستخدم 7-AAD أيضًا كصبغة لتحديد حيوية الخلايا . فالخلايا ذات الأغشية المتضررة تتلون بـ 7-AAD، بينما تبقى الخلايا الحية ذات الأغشية السليمة داكنة اللون. يجب أن تكون حيوية الخلايا في قياس التدفق الخلوي حوالي 95%، ولكن لا تقل عن 90%. [ 4 ]

باستخدام تقنية قياس التدفق الخلوي مع صبغة 7-AAD، تشير الإشارة المنخفضة إلى وجود خلايا حية. لذا، تُظهر هذه الحالة حيوية جيدة.

أكتينوميسين د

المركب ذو الصلة، أكتينوميسين د، غير متألق، ولكنه يرتبط بالحمض النووي بنفس طريقة ارتباط 7-AAD. يتغير امتصاصه عند ارتباطه بالحمض النووي، ويمكن استخدامه كصبغة في المجهر الإلكتروني النافذ التقليدي.

مراجع

  1. ↑ 7-أمينوأكتينوميسين د في إنترشيم
  2. ↑ ليو إكس؛ تشين إتش؛ باتيل دي (1991). "بنية محلول معقدات الأكتينوميسين-DNA: تداخل الدواء في مواقع GC المعزولة". مجلة الرنين النووي المغناطيسي للجزيئات الحيوية . 1 (4): 323-47 . doi : 10.1007/BF02192858 . PMID 1841703. S2CID 40569430 .  
  3. ↑ لات إس (1977). "مجسات فلورية لبنية الكروموسوم وتضاعفه". المجلة الكندية لعلم الوراثة وعلم الخلايا . 19 (4): 603-23 . doi : 10.1139/g77-065 . PMID 76502 . 
  4. ↑ "بروتوكول تلوين الخلايا باستخدام قياس التدفق الخلوي (FACS) (تلوين سطح الخلية)" . كلية الطب بجامعة ييل - قسم قياس التدفق الخلوي بجامعة ييل . تم الاطلاع عليه بتاريخ 17 أكتوبر 2023 .