الطرد المركزي بكثافة الطفو
تستخدم عملية الطرد المركزي للكثافة الطافية (وتسمى أيضًا الطرد المركزي متساوي الكثافة أو الطرد المركزي لتدرج الكثافة المتوازن ) مفهوم الطفو لفصل الجزيئات في المحلول عن طريق اختلافات الكثافة.
تطبيق
تاريخيًا، كان يُستخدم محلول كلوريد السيزيوم (CsCl) بكثرة، ولكن من بين محاليل التدرج الكثافي الأكثر شيوعًا السكروز أو البيركول . يتطلب هذا التطبيق محلولًا عالي الكثافة ولزوجة منخفضة نسبيًا، ويُناسب كلوريد السيزيوم هذا الغرض نظرًا لذوبانه العالي في الماء، وكثافته العالية الناتجة عن الكتلة الكبيرة للسيزيوم، فضلًا عن لزوجته المنخفضة واستقراره العالي. [ 1 ]
تُوضع العينة فوق المحلول، ثم يُدار الأنبوب بسرعة فائقة لفترة طويلة، قد تمتد لأيام. تتراص جزيئات كلوريد السيزيوم بكثافة نحو الأسفل، مُشكلةً تدرجًا مستمرًا من طبقات ذات كثافات (وتركيزات مختلفة من كلوريد السيزيوم). ولأن كثافة المحلول الأصلي كانت متقاربة، فإنها تصل إلى مستوى تتساوى فيه كثافتها مع كثافة كلوريد السيزيوم، مُشكلةً عنده نطاقًا حادًا ومميزًا.
الفصل النظائري
تفصل هذه الطريقة الجزيئات بدقة فائقة، وهي دقيقة لدرجة أنها تستطيع حتى فصل النظائر الجزيئية المختلفة عن بعضها البعض. [ 2 ] وقد استُخدمت في تجربة ميسلسون-ستال .
فصل الحمض النووي
تبلغ الكثافة الطافية لمعظم جزيئات الحمض النووي 1.7 غ/سم³، وهي تساوي كثافة محلول كلوريد السيزيوم بتركيز 6 مولار. تتغير الكثافة الطافية للحمض النووي بتغير محتواه من قواعد GC . يشير مصطلح " الحمض النووي الساتلي " إلى نطاقات صغيرة من تسلسلات الحمض النووي المتكررة ذات تركيب قاعدي مميز، تطفو فوق (غنية بالأدينين والثايمين) أو تحت (غنية بالجوانين والسيتوزين) الحمض النووي المكون الرئيسي.
انظر أيضاً
مراجع
- ↑ بيرت، ريتشارد أو. (4 ديسمبر 2000). "السيزيوم ومركبات السيزيوم" . موسوعة كيرك-أوتمير للتكنولوجيا الكيميائية . doi : 10.1002/0471238961.0305190902211820.a01 . ISBN 978-0-471-48494-3.
- ↑ دومونت، مارك ج.؛ موريل، ج. كولين (يونيو 2005). "التحليل بالنظائر المستقرة - ربط هوية الميكروبات بوظيفتها" . مجلة نيتشر ريفيوز مايكروبيولوجي . 3 (6): 499-504 . doi : 10.1038/nrmicro1162 . ISSN 1740-1534 . PMID 15886694. S2CID 24051877 .
- ^ أريجي ، فرانسيس إي. ماندل، مانلي. بيرجيندال، جانيت؛ هسو، TC (يونيو 1970). “كثافات مزدهرة من الحمض النووي للثدييات”. الوراثة البيوكيميائية . 4 (3): 367-376 . دوى : 10.1007 / BF00485753 . بميد 4991030 .
للمزيد من القراءة
- شيلدكراوت، كارل ل.؛ مارمور، يوليوس؛ دوتي، بول (1962). "تحديد التركيب القاعدي للحمض النووي الريبوزي منقوص الأكسجين من كثافته الطافية في كلوريد السيزيوم". مجلة البيولوجيا الجزيئية . 4 (6): 430-443 . doi : 10.1016/S0022-2836(62)80100-4 . ISSN 0022-2836 . PMID 14498379 .
- جيمس غرين (25 يونيو 1998). مبادئ ومنهجيات الحمض النووي المؤتلف . مطبعة سي آر سي. الصفحات 278 وما بعدها. رقم ISBN 978-0-8247-9989-2.
- عمليات الفصل
- تقنيات المختبر