نظام مين

إزاحة حلقة Z والنطاق الكلي Ter في خلية بكتيريا الإشريكية القولونية المتحولة المزدوجة الطويلة ΔslmA Δmin. تتم متابعة تألق حلقة Z باستخدام بنية ZipA-GFP (باللون الأخضر)، بينما يتم وسم الطرف الكروموسومي بـ MatP-mCherry (باللون الأحمر). تم وضع صورة تباين الطور (باللون الرمادي) فوق الصورة لتوضيح محيط الخلية. مقياس الرسم 2  ميكرومتر.

نظام Min هو آلية تتكون من ثلاثة بروتينات ، MinC و MinD و MinE، تستخدمها بكتيريا الإشريكية القولونية لتحديد موقع الحاجز الخلوي بدقة قبل انقسام الخلية . يساهم كل مكون في توليد تذبذب ديناميكي لتثبيط بروتين FtsZ بين قطبي الخلية لتحديد المنطقة الوسطى بدقة، مما يسمح للخلية بالانقسام بدقة إلى خليتين. من المعروف أن هذا النظام يعمل بالتزامن مع نظام تنظيمي سلبي ثانٍ، هو نظام إعاقة النواة (NO)، لضمان التنظيم المكاني والزماني السليم لانفصال الكروموسومات وانقسامها.

تاريخ

يُعزى الاكتشاف الأولي لهذه العائلة من البروتينات إلى أدلر وآخرون (1967). وقد تم التعرف عليها لأول مرة في طفرات بكتيريا الإشريكية القولونية التي لم تتمكن من إنتاج حاجز موضعي صحيح، مما أدى إلى تكوين خلايا مصغرة [ 1 ] [ 2 ] نتيجةً لانقسام خلوي غير متموضع يحدث بالقرب من قطبي الخلية البكتيرية. تسبب هذا في انفصال حويصلات مصغرة، خالية من المكونات الجزيئية الأساسية، مما سمح لها بالبقاء كخلية بكتيرية قابلة للحياة. الخلايا المصغرة هي خلايا عديمة الكروموسومات ناتجة عن انقسام خلوي شاذ، وتحتوي على الحمض النووي الريبوزي ( RNA) والبروتين، ولكنها تحتوي على القليل من الحمض النووي الصبغي ( DNA) أو لا تحتوي عليه إطلاقًا. أدى هذا الاكتشاف إلى تحديد ثلاثة بروتينات متفاعلة تشارك في نظام ديناميكي لتحديد موضع المنطقة الوسطى من الخلية من أجل انقسام خلوي مُتحكم فيه بشكل صحيح.

وظيفة

تمنع بروتينات Min حلقة FtsZ من أن توضع في أي مكان إلا بالقرب من منتصف الخلية، ويُفترض أنها تشارك في آلية تنظيمية مكانية تربط بين زيادة الحجم قبل انقسام الخلية وبلمرة FtsZ في منتصف الخلية.

نظام MinCDE. يرتبط جزيء MinD-ATP بأحد قطبي الخلية، ويرتبط أيضًا بجزيء MinC، مما يمنع تكوين بوليمرات FtsZ. تتسبب حلقة MinE في تحلل جزيء ATP المرتبط بـ MinD، محولةً إياه إلى ADP ومحررةً المركب من الغشاء. يتذبذب النظام مع تراكم تركيز المثبط في كل قطب، والذي يتفكك دوريًا.

توسيط حلقة Z

يسمح أحد نماذج تكوين حلقة Z بتكوينها فقط بعد إشارة مكانية معينة تُخبر الخلية بأنها كبيرة بما يكفي للانقسام. [ 3 ] يمنع نظام MinCDE بلمرة FtsZ بالقرب من أجزاء معينة من الغشاء البلازمي. يتمركز MinD على الغشاء فقط عند قطبي الخلية، ويحتوي على إنزيم ATPase ونطاق ربط ATP. لا يستطيع MinD الارتباط بالغشاء إلا عندما يكون في هيئته المرتبطة بـ ATP. بمجرد تثبيته، يتبلمر البروتين، مما يؤدي إلى تكوين تجمعات من MinD. ترتبط هذه التجمعات ببروتين آخر يُسمى MinC ، ثم تُفعّله، والذي لا يكون نشطًا إلا عند ارتباطه بـ MinD. [ 4 ] يعمل MinC كمثبط لـ FtsZ، مما يمنع بلمرته. يمنع التركيز العالي لمثبط بلمرة FtsZ عند القطبين، FtsZ من بدء الانقسام في أي مكان آخر غير منتصف الخلية. [ 5 ]

يُساهم بروتين MinE في منع تكوّن مُركّبات MinCD في منتصف الخلية. يُشكّل MinE حلقةً قرب كل قطب من أقطاب الخلية، وهذه الحلقة تختلف عن حلقة Z. بدلاً من ذلك، يُحفّز MinE إطلاق MinD من الغشاء عن طريق تنشيط إنزيم ATPase الخاص به. يؤدي هذا إلى تحلّل جزيء ATP المرتبط بـ MinD، مما يمنعه من الارتباط بالغشاء.

يمنع بروتين MinE تكوّن معقد MinD/C في المركز، ولكنه يسمح له بالبقاء عند القطبين. بمجرد تحرر معقد MinD/C، يُصبح MinC غير نشط، مما يمنعه من تعطيل FtsZ. ونتيجةً لذلك، يُضفي هذا النشاط خصوصيةً إقليميةً على تموضع بروتين Min. [ 6 ] وبالتالي، لا يمكن أن يتكوّن FtsZ إلا في المركز، حيث يكون تركيز المُثبِّط MinC في حده الأدنى. تؤدي الطفرات التي تمنع تكوّن حلقات MinE إلى امتداد منطقة MinCD إلى ما وراء المناطق القطبية، مما يمنع FtsZ من التبلمر والانقسام الخلوي. [ 7 ] يتطلب MinD خطوة تبادل نيوكليوتيدات لإعادة الارتباط بـ ATP حتى يتمكن من إعادة الارتباط بالغشاء بعد تحرر MinE. ينتج عن الفاصل الزمني دورية في ارتباط Min، مما قد يُقدّم أدلةً على وجود إشارة زمنية مرتبطة بإشارة مكانية. تُظهر الملاحظات في الجسم الحي أن تذبذب بروتينات Min بين قطبي الخلية يحدث كل 50  ثانية تقريبًا. [ ٨ ] مع ذلك، فإن تذبذب بروتينات Min ليس ضروريًا لجميع أنظمة انقسام الخلايا البكتيرية. فقد ثبت أن بكتيريا Bacillus subtilis تمتلك تراكيز ثابتة من MinC وMinD عند قطبي الخلية. [ ٩ ] لا يزال هذا النظام يربط حجم الخلية بقدرتها على تكوين حاجز عبر FtsZ والانقسام.

إعادة التكوين في المختبر

يطارد MinD (الأزرق السماوي) MinE (الأرجواني) لتشكيل موجات حلزونية على غشاء اصطناعي

تمت محاكاة السلوك الديناميكي لبروتينات Min في المختبر باستخدام طبقات ثنائية اصطناعية من الدهون، [ 10 ] مع تركيب دهني متفاوت [ 11 ] وهندسة حصر مختلفة [ 12 ] كمحاكاة لغشاء الخلية. كان النمط الأول الذي تمت محاكاته عبارة عن موجات حلزونية من MinD تتبعها MinE، [ 13 ] تلاها محاكاة موجات من البروتينات الثلاثة جميعها، MinD وMinE وMinC. [ 14 ] ومن المهم أن MinD وMinE يمكنهما التنظيم الذاتي في مجموعة واسعة من الأنماط اعتمادًا على ظروف التفاعل. [ 15 ] [ 16 ]

يلزم إجراء دراسات إضافية لتوضيح مدى الإشارات الزمنية والمكانية التي تسمح بها هذه الوظيفة البيولوجية. وقد أتاحت هذه الأنظمة المختبرية إمكانية الوصول غير المسبوقة إلى خصائص مثل أوقات الإقامة والحركة الجزيئية.

مراجع

  1. دي بوير، ب. أ.، كروسلي، ر. إ.، روثفيلد، ل. إ. (1989). "مثبط انقسام وعامل خصوصية طوبولوجي مشفر بواسطة موضع الخلية المصغرة يحددان الموضع الصحيح لحاجز الانقسام في الإشريكية القولونية". الخلية . 56 ( 4): 641-649 . doi : 10.1016/0092-8674(89)90586-2 . PMID 2645057. S2CID 7650379 .  
  2. أدلر إتش آي، فيشر دبليو دي، كوهين إيه، هارديغري إيه إيه؛ فيشر؛ كوهين؛ هارديغري (1967). " خلايا الإشريكية القولونية المصغرة ناقصة الحمض النووي" . وقائع الأكاديمية الوطنية للعلوم . 57 (2): 321-326 . رمز Bibcode : 1967PNAS...57..321A . doi : 10.1073/pnas.57.2.321 . PMC 335508. PMID 16591472 .  {{cite journal}}: صيانة CS1: أسماء متعددة: قائمة المؤلفين ( رابط )
  3. ويرت آر بي، ليفين بي إيه (2003). " تنظيم تكوين حلقة FtsZ الوسطى المعتمد على معدل النمو" . مجلة علم البكتيريا . 185 (9): 2826-2834 . doi : 10.1128/JB.185.9.2826-2834.2003 . PMC 154409. PMID 12700262 .  
  4. هو ز، غوغول إي بي، لوتكنهاوس ج (2002). "التجميع الديناميكي لبروتين MinD على حويصلات الفوسفوليبيد المنظم بواسطة ATP وMinE" . وقائع الأكاديمية الوطنية للعلوم في الولايات المتحدة الأمريكية . 99 (10): 6761-6766 . Bibcode : 2002PNAS...99.6761H . doi : 10.1073/pnas.102059099 . PMC 124476. PMID 11983867 .  
  5. هوانغ كيه سي، مير واي، وينغرين إن إس (2003). "البنى الديناميكية في الإشريكية القولونية: التكوين التلقائي لحلقات MinE والمناطق القطبية MinD" . وقائع الأكاديمية الوطنية للعلوم في الولايات المتحدة الأمريكية . 100 (22): 12724-12728 . Bibcode : 2003PNAS..10012724H . doi : 10.1073/pnas.2135445100 . PMC 240685. PMID 14569005 .  
  6. هو ز، سايز س، لوتكنهاوس ج (2003). "استقطاب MinC، وهو مثبط لتكوين حلقة Z، إلى الغشاء في الإشريكية القولونية: دور MinD وMinE" . مجلة علم البكتيريا . 185 (1): 196-203 . doi : 10.1128/JB.185.1.196-203.2003 . PMC 141945. PMID 12486056 .  
  7. هو ز، لوتكنهاوس ج (2001). "التنظيم الطوبولوجي لانقسام الخلايا في الإشريكية القولونية: يتطلب التذبذب المكاني الزمني لـ MinD تحفيز إنزيم ATPase الخاص به بواسطة MinE والفوسفوليبيد" . الخلية الجزيئية . 7 (6): 1337-1343 . doi : 10.1016/S1097-2765(01)00273-8 . PMID 11430835 . 
  8. دايكوفيتش أ، لوتكينهاوس ج (2006). "حلقة Z كمنفذ لانقسام الخلايا البكتيرية". مجلة علم الأحياء الدقيقة الجزيئية . 11 ( 3-5 ): 140-151 . doi : 10.1159/000094050 . PMID 16983191. S2CID 10043376 .  
  9. مارستون إيه إل، ثومايدس إتش بي، إدواردز دي إتش، شارب إم إي، إرينغتون جيه (1998). "التموضع القطبي لبروتين MinD في بكتيريا Bacillus subtilis ودوره في اختيار موقع انقسام الخلية الأوسط" . جينز ديف . 12 (21): 3419-3430 . doi : 10.1101/gad.12.21.3419 . PMC 317235. PMID 9808628 .  
  10. لوس، مارتن؛ فيشر-فريدريش، إليزابيث؛ ريس، جوناس؛ كروز، كارستن؛ شفيل، بيترا (9 مايو 2008). "منظمات مكانية لانقسام الخلايا البكتيرية تتنظم ذاتيًا في موجات سطحية في المختبر". مجلة ساينس . 320 (5877): 789-792 . Bibcode : 2008Sci...320..789L . doi : 10.1126/science.1154413 . ISSN 1095-9203 . PMID 18467587. S2CID 27134918 .   
  11. فيكاريلي، أنتوني ج.؛ لي، مين؛ ميزوتشي، ميتشيو؛ ميزوتشي، كيوشي (2014-08-01). "تأثير اختلاف انجذاب بروتيني MinD وMinE للفوسفوليبيدات الأنيونية على ديناميكيات تشكيل Min في المختبر" . علم الأحياء الدقيقة الجزيئي . 93 (3): 453-463 . doi : 10.1111/mmi.12669 . ISSN 1365-2958 . PMC 4116444. PMID 24930948 .   
  12. زيسكي، كاتيا؛ شفيل، بيترا (2014-01-01). " إعادة تكوين تدرجات البروتين ذاتية التنظيم كإشارات مكانية في الأنظمة الخالية من الخلايا" . eLife . 3. doi : 10.7554 /eLife.03949 . ISSN 2050-084X . PMC 4215534. PMID 25271375 .   
  13. لوس، مارتن؛ فيشر-فريدريش، إليزابيث؛ ريس، جوناس؛ كروز، كارستن؛ شفيل، بيترا (9 مايو 2008). "منظمات مكانية لانقسام الخلايا البكتيرية تتنظم ذاتيًا في موجات سطحية في المختبر". مجلة ساينس . 320 (5877): 789-792 . Bibcode : 2008Sci...320..789L . doi : 10.1126/science.1154413 . ISSN 1095-9203 . PMID 18467587. S2CID 27134918 .   
  14. لوس، مارتن؛ فيشر-فريدريش، إليزابيث؛ هيرولد، كريستوف؛ كروز، كارستن؛ شفيل، بيترا (9 مايو 2011). "أنماط بروتين Min تنشأ من إعادة الارتباط السريع وتفاعل MinE مع الغشاء". نات ستراكت مول بيول . 18 (5): 577-83 . doi : 10.1038/nsmb.2037 . PMID 21516096. S2CID 30014235 .  
  15. إيفانوف، ف.؛ ميزوتشي، ك. (2010-03-08). "أنماط متعددة لتحويل تكوين الأنماط الديناميكية بواسطة بروتينات انقسام الخلايا البكتيرية" . وقائع الأكاديمية الوطنية للعلوم . 107 (18): 8071-8078 . doi : 10.1073/pnas.0911036107 . ISSN 0027-8424 . PMC 2889524. PMID 20212106 .   
  16. فيكاريلي، أنتوني ج.؛ لي، مين؛ ميزوتشي، ميتشيو؛ هوانغ، لينغ تشين؛ سيول، يوني؛ نيومان، كير سي.؛ ميزوتشي، كيوشي (15 مارس 2016). "يعمل مُركّب MinDE المرتبط بالغشاء كمفتاح تبديل يُحفّز تذبذب Min المرتبط بنقص MinD في السيتوبلازم" . وقائع الأكاديمية الوطنية للعلوم في الولايات المتحدة الأمريكية . 113 (11): E1479–1488. Bibcode : 2016PNAS..113E1479V . doi : 10.1073/pnas.1600644113 . ISSN 1091-6490 . PMC 4801307. PMID 26884160 .