مؤشر الملف التحليلي

قبل البدء بالاختبار، يجب التأكد من أن البكتيريا المزروعة تنتمي إلى عائلة الأمعائيات (Enterobacteriaceae)، ويتم ذلك عن طريق اختبار سريع للأكسيداز لسيتوكروم سي أوكسيداز . عادةً ما تكون الأمعائيات سالبة الأكسيداز، مما يعني أنها إما لا تستخدم الأكسجين كمستقبل للإلكترونات في سلسلة نقل الإلكترون ، أو أنها تستخدم إنزيم سيتوكروم مختلفًا لنقل الإلكترونات إلى الأكسجين. ^{[ 5 ]} إذا تبين أن المزرعة موجبة الأكسيداز، فيجب إجراء اختبارات بديلة لتحديد نوع البكتيريا بدقة. يُعد نظام API-20E متخصصًا في التمييز بين أفراد عائلة البكتيريا سالبة الغرام الأمعائية . ^{[ 6 ] [ 7 ]} أما نظام API-Staph، فهو متخصص في البكتيريا موجبة الغرام ، بما في ذلك أنواع المكورات العنقودية ، وأنواع المكورات الدقيقة ، والكائنات الحية ذات الصلة. ^{[ 7 ]}

يُعد نظام API 20E/NE نظام اختبار بيوكيميائي واسع الانتشار، مصمم للتعرف السريع على البكتيريا سالبة الغرام. ويستهدف تحديدًا مجموعتين: البكتيريا المعوية (API 20E) والبكتيريا غير المعوية (API 20NE). يُعد هذا النظام مفيدًا بشكل خاص في علم الأحياء الدقيقة السريري والدراسات البيئية لتحديد البكتيريا بناءً على أنشطتها البيوكيميائية.

• شرائط الاختبار: يتكون النظام من شريط بلاستيكي يحتوي على 20 أنبوب تفاعل صغير (أنابيب دقيقة)، يحتوي كل منها على ركائز مجففة مختلفة.
• إعادة الترطيب والتلقيح: لإجراء الاختبار، تُعاد ترطيب الأنابيب الدقيقة بمحلول معلق من البكتيريا. صُمم كل أنبوب دقيق للكشف عن أنشطة إنزيمية محددة أو تخمير الكربوهيدرات الذي يميز البكتيريا قيد الاختبار.
• الحضانة: بعد التلقيح، تُحضن الشريحة لفترة تتراوح عادةً بين 18 و24 ساعة، عند درجة حرارة محددة (غالباً 35-37 درجة مئوية). خلال فترة الحضانة، تتفاعل البكتيريا مع الركائز، مما يؤدي إلى تغيرات لونية مرئية في حال حدوث التفاعلات.
• قراءة النتائج: بعد فترة الحضانة، تُفسَّر النتائج بملاحظة تغيرات اللون في كل أنبوب، والتي تدل على تفاعلات إيجابية أو سلبية. تُقارن أنماط التفاعلات بقاعدة بيانات مرجعية لتحديد الكائن الحي.
• التعريف: يتم تسجيل كل تفاعل رقميًا، وتشكل النتيجة التراكمية رقمًا تعريفيًا، والذي يستخدم بعد ذلك لتحديد الكائن الحي من خلال قاعدة بيانات أو برنامج تعريف.