صبغة فولجن

صبغة فولجن هي تقنية تلوين اكتشفها روبرت فولجن ، وتُستخدم في علم الأنسجة لتحديد المادة الكروموسومية أو الحمض النووي في عينات الخلايا. تُعطي هذه الصبغة لونًا داكنًا. وتعتمد على التحلل المائي الحمضي للحمض النووي، لذا يجب تجنب استخدام عوامل التثبيت التي تحتوي على أحماض قوية . ^{[ 1 ]}

تُعرَّض العينة لحمض الهيدروكلوريك الدافئ (60 درجة مئوية) ، ثم لكاشف شيف . ^{[ 1 ]} في السابق، كان يُتبع ذلك شطف بالكبريتيت ، ولكن يُعتبر هذا الآن غير ضروري. اختياريًا، يمكن تلوين العينة بصبغة SF الخضراء الفاتحة المصفرة . أخيرًا، تُجفف العينة بالإيثانول ، وتُنقى بالزيلين ، وتُثبَّت في وسط راتنجي .

يُفترض أن يُصبغ الحمض النووي (DNA) باللون الأحمر. ^{[ 1 ]} أما الخلفية، في حال صبغها بصبغة مضادة، فتكون خضراء. هذا التفاعل خاص بالحمض النووي (DNA) تحديدًا، لأن الحمض النووي الريبوزي (RNA) يتميز بوجود سكر الريبوز بدلًا من سكر الديوكسي ريبوز، مما يمنع التحلل المائي الحمضي. وهذا بدوره يعيق انفصال البيورينات، وبالتالي لا يسمح بالتلوين. ^{[ 1 ]}

يُعد تفاعل فولجن تقنية شبه كمية. أما إذا كانت الألدهيدات المتبقية في الخلية هي تلك الناتجة عن تحلل الحمض النووي (DNA)، فإن هذه التقنية تُصبح كمية بالنسبة للحمض النووي. يُمكن استخدام جهاز يُعرف باسم مقياس الكثافة الضوئية الدقيق أو مطياف ضوئي دقيق لقياس شدة تفاعل فولجن الوردي لعضية معينة . باستخدام هذه الطريقة، تبيّن مبكرًا أن خلايا الطور البيني تتكون من مجموعتين: خلايا ثنائية الصيغة الصبغية (DNA) وخلايا رباعية الصيغة الصبغية (DNA) (مجموعتان كاملتان من الجينوم). تبدو النوى متطابقة، لكن إحداها تحتوي على ضعف كمية الحمض النووي. وقد أدى ذلك إلى تقسيم فترة الطور البيني من دورة الخلية إلى أطوار G1 وS وG2 بناءً على تخليق ذلك الحمض النووي الإضافي. ^{[ 2 ]}