صبغة ليشمين

يُظهر صبغ ليشمَن عمومًا اللون البنفسجي الزاهي للنواة وحبيبات العدلات، مما يُسهّل عملية العد التفريقي ويُحسّن جودة التلوين مقارنةً بالصبغات البسيطة القائمة على الميثيلين الأزرق والإيوسين، والتي لا تُنتج تباينًا كافيًا بين السيتوبلازم والنواة. ولأن صبغ ليشمَن، كغيره من صبغات رومانوفسكي، يُلوّن تفاصيل السيتوبلازم وحبيباته بشكل أفضل، يُفضّله أخصائيو أمراض الدم عمومًا (مع ذلك، انظر أدناه بخصوص أخصائيي علم الخلايا). وبالمقارنة مع الكواشف الاصطناعية النقية باهظة الثمن والسامة القائمة على أزور ب وإيوسين واي، والتي تُستخدم في طرق ICSH المرجعية، والتي لا تخلو أيضًا من عيب التأكسد وإعطاء لون رمادي بدلًا من اللون الأزرق الأمثل للسيتوبلازم، يُعدّ صبغ ليشمَن تقنية رخيصة ومتوفرة وسهلة التطبيق، وتُعطي تباينًا مقبولًا إلى حدٍ ما.

لقد تم توثيق أن صبغة ليشمين أكثر حساسية من صبغة فيلد، وتضاهي الصبغات الفلورية في الكشف عن طفيل الملاريا. ^{[ 5 ]}

لا يُضاهي مزيج الميثيلين الأزرق متعدد الألوان مع الإيوسين جودةَ النسب المُوزونة والمخلوطة مباشرةً في صبغات جيمسا. في عام 1890، اكتشف ألبرت بلين ^{[ 6 ]} ضرورة زيادة النسبة المولية للأصباغ القاعدية إلى الحمضية من 2:1 إلى 3:1، إلا أنه منذ عهد جينر (1899)، أدى استخدام بلورات أزور إيوسينات إلى إعادة النسبة إلى 2:1 غير المرضية، ما قلل من عمق اللون. ولم يستعد عمق التلوين إلا عمل غوستاف جيمسا ومن على شاكلته، الذين تحكموا يدويًا بنسبة هذين المكونين. مع ذلك، فقد بالغ جيمسا وغيره ممن تحكموا بالنسبة اصطناعيًا في بعض الأحيان (زيادة مولية كبيرة من الأزور تصل إلى نسبة 16.1)، وهو ما كان غير ضروري على الأرجح. ووفقًا للهيئة الدولية لتلوين الصور (ICSH)، تتراوح النسبة المثلى بين 6.5 و7.3 ^{[ 7 ] .}

تصبح صبغة ليشمَن غير مستقرة للغاية عند إعادة تكوينها بالمحلول المنظم (على عكس صبغة جيمسا الأكثر استقرارًا نسبيًا لاحتوائها على الجلسرين، أو صبغات ICSH المرجعية التي تستخدم الميثانول وثنائي ميثيل سلفوكسيد بنسبة 6:4 حجم/حجم)، وتبدأ بالترسب، مما يستدعي ترشيحًا متكررًا. وإذا لم تتم مراقبة التركيب بدقة، فإن امتصاص الماء وتبخر الميثانول من العبوة المفتوحة، بالإضافة إلى الترشيح المتكرر، يُغير التركيب، مما يستدعي تغيير الصبغة باستمرار، ويجعل هذه الطريقة مُهدرة. وإذا لم يتم ترشيحها، فقد يُشتبه في الرواسب الموجودة على المسحة على أنها صفائح دموية. من المهم عدم رجّ زجاجة الصبغة قبل الاستخدام، وإلا ستُعاد تعليق الرواسب المترسبة وتترسب على الأفلام أثناء التلوين، مما يُسبب العديد من التشوهات ويجعل الفحص المجهري صعبًا للغاية.

كغيرها من طرق مالاخوفسكي-رومانوفسكي-جيمسا، تتلاشى هذه الطريقة مع مرور الوقت ولا يمكن حفظها بشكل ثابت لفترة طويلة. كما أنها، مقارنةً بالطرق الأخرى المذكورة أعلاه، تُلوّن النوى باللون الأرجواني الداكن، ولا تكون تفاصيلها واضحةً كصبغة الهيماتوكسيلين والإيوسين ، ولذلك يُفضّلها بعض أخصائيي علم أمراض الخلايا. ولكن من هذه الناحية، تُعدّ طريقةً مُكمّلة (إذ تُلوّن تفاصيل السيتوبلازم، كالحبيبات وغيرها، بشكل أفضل من صبغة الهيماتوكسيلين والإيوسين ).