بقعة رومانوفسكي

يُعدّ تلوين رومانوفسكي تقنية تلوين نموذجية ، وقد سبقت العديد من تقنيات التلوين المتميزة والمتشابهة المستخدمة على نطاق واسع في علم الدم (دراسة الدم) وعلم الخلايا المرضية (دراسة الخلايا المريضة). تُستخدم صبغات رومانوفسكي لتمييز الخلايا للفحص المجهري في العينات المرضية ، وخاصةً لطخات الدم ونخاع العظم ، ^{[ 1 ]} وللكشف عن الطفيليات مثل الملاريا في الدم. ^{[ 2 ] [ 3 ] [ 4 ] [ 5 ]}

سميت تقنية التلوين هذه نسبة إلى الطبيب الروسي ديمتري ليونيدوفيتش رومانوفسكي (1861-1921)، الذي كان من أوائل من أدركوا إمكانية استخدامها كصبغة للدم. ^{[ 6 ]}

تشمل الأصباغ المرتبطة بأصباغ رومانوفسكي أو المشتقة منها: جيمسا ، وجينر ، ورايت ، وفيلد ، وماي-غرونوالد ، وبابنهايم، وليشمان . وتختلف هذه الأصباغ في بروتوكولاتها وموادها المضافة، وغالبًا ما يُخلط بين أسمائها في الممارسة العملية.

تكمن أهمية صبغة رومانوفسكي في قدرتها على إنتاج طيف واسع من الألوان، مما يسمح بالتمييز بسهولة بين مكونات الخلايا. تُعرف هذه الظاهرة بتأثير رومانوفسكي ، أو بشكل أعم باسم تغير اللون . ^{[ 7 ]}

يُعد جزء الإيوسين من الصبغة مسؤولاً عن اللون الوردي البرتقالي لكريات الدم الحمراء والحبيبات الموجودة داخل سيتوبلازم كريات الدم البيضاء الحمضية .

تأثير رومانوفسكي

في عام ١٨٩١، طوّر رومانوفسكي ^{[ ٨ ] [ ٩ ] [ ١٠ ]} صبغةً باستخدام مزيج من الإيوسين (عادةً الإيوسين Y ) ومحاليل قديمة من أزرق الميثيلين ، مما أدى إلى ظهور ألوان لا تُعزى إلى مكونات الصبغة وحدها: درجات مميزة من اللون الأرجواني في كروماتين نواة الخلية وداخل الحبيبات في سيتوبلازم بعض الكريات البيضاء . عُرفت هذه الظاهرة باسم تأثير رومانوفسكي. ^{[ ١١ ] [ ١٢ ] [ ٦ ] [ ١٣ ] [ ٤ ]} لا يُنتج الإيوسين وأزرق الميثيلين النقي وحدهما (أو مجتمعين) تأثير رومانوفسكي، ^{[ ١٣ ] [ ٤ ]} وتُعتبر الصبغات النشطة التي تُنتج هذا التأثير الآن هي أزور B والإيوسين. ^{[ ١٤ ] [ ٣ ] [ ١٣ ]}

على الرغم من وجود جدل حول من يستحق الفضل في هذه الطريقة العامة للتلوين، إلا أن الاستخدام الشائع ينسبها إلى ديمتري ليونيدوفيتش رومانوفسكي . ^{[ 14 ] [ 17 ] [ 19 ]}

في سبعينيات القرن التاسع عشر، استخدم بول إرليخ مزيجًا من الأصباغ الحمضية والقاعدية، بما في ذلك الفوشين الحمضي (صبغة حمضية) والميثيلين الأزرق (صبغة قاعدية)، لفحص مسحات الدم. ^{[ 24 ] [ 25 ] [ 26 ] [ 27 ] [ 17 ]} وفي عام 1888، استخدم تشيسلاف إيفانوفيتش تشينزينسكي الميثيلين الأزرق، لكنه استبدل الفوشين الحمضي الذي استخدمه إرليخ بالإيوسين. ^{[ 14 ] [ 26 ] [ 27 ]} وقد تمكن مزيج صبغة تشينزينسكي من تلوين طفيل الملاريا (أحد أفراد جنس المتصورة ). ^{[ 27 ] [ 19 ]} ولم تُنتج صبغات إرليخ أو تشينزينسكي تأثير رومانوفسكي، لأن الميثيلين الأزرق الذي استخدموه لم يكن متعدد الألوان. ^{[ 17 ]}

نشر ديمتري رومانوفسكي في عام 1890 نتائج أولية لصبغة الدم التي ابتكرها (مزيج من الميثيلين الأزرق القديم والإيوسين)، بما في ذلك النتائج عند تطبيقها على دم مصاب بالملاريا. ^{[ 6 ]} وقد ميّز استخدام الميثيلين الأزرق متعدد الألوان صبغة رومانوفسكي (والتركيبات اللاحقة) عن صبغات إيرليخ وتشينزينسكي، التي افتقرت إلى اللون الأرجواني المرتبط بتأثير رومانوفسكي. ^{[ 17 ]} لم يتضمن منشور رومانوفسكي لعام 1890 وصفًا لكيفية تعديله لمحلول الميثيلين الأزرق، ^{[ 6 ] [ 17 ]} ولكنه وصف في أطروحته للدكتوراه عام 1891 استخدام الميثيلين الأزرق على أفضل وجه بعد بدء تكوّن العفن على السطح. ^{[ 6 ] [ 17 ]} وباستثناء استخدام محلول الميثيلين الأزرق القديم، استندت صبغة رومانوفسكي إلى تقنية صبغة تشينزينسكي. ^{[ 17 ]} يُعزى استخدام رومانوفسكي لطريقته في دراسة طفيل الملاريا إلى الاهتمام المستمر بطريقة التلوين التي ابتكرها. ^{[ 25 ]}

يُنسب إلى إرنست مالاتشوسكي الفضل في ملاحظة نفس تركيبة الصبغة التي لاحظها ديمتري رومانوفسكي عام 1891، ^{[ 6 ] [ 13 ]} مع أنه يُنسب إليه أيضاً الفضل في كونه أول من فعل ذلك. ^{[ 17 ] [ 19 ]} كان مالاتشوسكي أول من استخدم محلول أزرق الميثيلين متعدد الألوان عمداً، ^{[ 15 ]} وقد حقق ذلك بإضافة البوراكس إلى خليط الصبغة. ^{[ 17 ]} يُذكر أن مالاتشوسكي قد عرض الصبغة في 15 يونيو 1890، وفي العام نفسه نشر ورقة بحثية "تصف عرضه التوضيحي العام". ^{[ 19 ]} تمكنت كلتا طريقتي رومانوفسكي ومالاتشوسكي من تلوين نواة وسيتوبلازم طفيل الملاريا ^، بينما كانت الصبغات المستخدمة حتى ذلك الحين تلون السيتوبلازم فقط. ^{[ 19} ]

في عام ١٨٩٩، طوّر لويس ليوبولد جينر نسخةً أكثر استقرارًا من صبغة الميثيلين الأزرق والإيوسين، وذلك بجمع الراسب المتكوّن في المحاليل المائية وإعادة إذابته في الميثانول . ^{[ ٢٧ ] [ ١٥ ] [ ٤ ]} تُعرف الصبغات من نوع رومانوفسكي المُحضّرة من الرواسب المُجمّعة أحيانًا باسم الإيوسينات . ^{[ ٤ ]} بالإضافة إلى زيادة استقرار الصبغة، كان لاستخدام الميثانول في صبغة جينر تأثير تثبيت عينات الدم، ^{[ ٤ ]} على الرغم من أن نسخة جينر من الصبغة لا تُنتج تأثير رومانوفسكي. ^{[ ٢٧ ] [ ١٩ ] [ ١٥ ]}

نشر ريتشارد ماي ولودفيج غرونوالد في عام 1892 نسخة من الصبغة (المعروفة الآن باسم صبغة ماي-غرونوالد ) وهي مشابهة للنسخة التي اقترحها جينر في عام 1899، ولا تُنتج بدورها تأثير رومانوفسكي. ^{[ 27 ] [ 19 ] [ 15 ]}

في عام ١٩٠١، طوّر كلٌّ من كارل رويتر وويليام ليشمَن ^{[ ٢١ ]} أصباغًا جمعت بين استخدام لويس جينر للكحول كمذيب واستخدام مالاتشوسكي للأزرق الميثيليني متعدد الألوان. ^{[ ١٩ ] [ ١٥ ] [ ٤ ]} واختلف صبغ رويتر عن صبغ جينر في استخدام الإيثانول بدلًا من الميثانول، بينما اختلف صبغ ليشمَن عن صبغ جينر في استخدام الإيوسين ب بدلًا من الإيوسين ي . ^{[ ١٩ ] [ ٤ ]}

نشر جيمس هومر رايت في عام 1902 ^{[ 18 ]} طريقة تستخدم الحرارة لتلوين الميثيلين الأزرق بألوان متعددة، والتي قام بدمجها مع الإيوسين Y. تُعرف هذه التقنية باسم صبغة رايت . ^{[ 19 ] [ 20 ]}

ارتبط اسم غوستاف جيمسا أيضًا بالصبغة، إذ يُنسب إليه نشر تركيبة وبروتوكول مفيدين عام 1902. ^{[ 13 ] [ 6 ] [ 25 ]} حاول جيمسا استخدام مزيج من الأصباغ النقية بدلًا من محاليل الميثيلين الأزرق متعددة الألوان، والتي تتفاوت تركيباتها بشكل كبير. ^{[ 20 ] [ 19 ] [ 15 ]} باع جيمسا حقوق إنتاج صبغته، لكنه لم ينشر تفاصيل كاملة عن كيفية إنتاجها، ^{[ 19 ]} مع أنه يُعتقد أنه استخدم مزيجًا من أزور ب والميثيلين الأزرق. ^{[ 15 ]} نشر جيمسا عددًا من التعديلات على صبغاته بين عامي 1902 و1934. في عام 1904 ^{[ 28 ]} اقترح إضافة الجلسرين إلى صبغته، إلى جانب الميثانول، لزيادة ثباتها. ^{[ 22 ] [ 19 ]}

استُخدمت مساحيق صبغة جيمسا المنتجة في ألمانيا على نطاق واسع في الولايات المتحدة حتى انقطاع الإمدادات خلال الحرب العالمية الأولى ، مما أدى إلى زيادة استخدام طريقة جيمس هومر رايت لتلوين الميثيلين الأزرق بألوان متعددة. ^{[ 19 ] [ 1 ]}

• بقعة ليو
• اختبارات الكشف عن مستضد الملاريا
• بقعة بابانيكولاو
• التلوين (علم الأحياء)