التضخيم بوساطة النسخ
التضخيم بوساطة النسخ ( TMA ) هو نظام تضخيم الحمض النووي متساوي الحرارة (يتم إجراؤه عند درجة حرارة ثابتة) أحادي الأنبوب يستخدم إنزيمين ، بوليميراز الحمض النووي الريبي والناسخ العكسي .
تعني "التضخيم" إنشاء نسخ أكثر بكثير من شريط الحمض النووي مقارنةً بالعدد الأصلي، وذلك لتسهيل الكشف عنه أو اختباره. يُمكّن التضخيم السريع للحمض النووي الريبوزي (RNA) أو الحمض النووي الريبوزي منقوص الأكسجين (DNA) المستهدف المختبر من الكشف عن العديد من الكائنات الممرضة في أنبوب واحد. تتيح تقنية التضخيم المصفوفي للحمض النووي (TMA) للمختبرات السريرية إجراء فحوصات الحمض النووي (NAT) لفحص الدم بخطوات أقل، ووقت معالجة أقصر، ونتائج أسرع. تُستخدم هذه التقنية في البيولوجيا الجزيئية ، وعلم الأدلة الجنائية ، والطب لتحديد وتشخيص الكائنات الممرضة بسرعة. على عكس التقنيات المشابهة مثل تفاعل البوليميراز المتسلسل وتفاعل الليغاز المتسلسل ، تتضمن هذه الطريقة نسخ الحمض النووي الريبوزي (RNA) (عن طريق بوليميراز الحمض النووي الريبوزي) وتخليق الحمض النووي الريبوزي منقوص الأكسجين (DNA) (عن طريق إنزيم النسخ العكسي ) لإنتاج مُضخّم الحمض النووي الريبوزي (RNA ) (مصدر أو ناتج التضخيم) من الحمض النووي المستهدف. يمكن استخدام هذه التقنية لاستهداف كل من الحمض النووي الريبوزي (RNA) والحمض النووي الريبوزي منقوص الأكسجين (DNA).
يتميز التضخيم بوساطة النسخ بالعديد من المزايا مقارنة بطرق التضخيم الأخرى، بما في ذلك:
- تُعدّ عملية التحليل الحراري الميكانيكي (TMA) عملية متساوية الحرارة ، أي أنها تُجرى عند درجة حرارة ثابتة. ولذلك، يمكن استخدام حمام مائي أو كتلة تسخين بدلاً من جهاز التدوير الحراري.
- تُنتج تقنية تضخيم الحمض النووي الريبوزي (TMA) مُضخّمات الحمض النووي الريبوزي (RNA) بدلاً من مُضخّمات الحمض النووي (DNA). ولأن الحمض النووي الريبوزي أكثر حساسية في بيئة المختبر، فإن هذا يقلل من احتمالية التلوث العرضي.
- تُنتج تقنية TMA ما بين 100 و1000 نسخة لكل دورة (بينما تتضاعف نسخ الحمض النووي DNA وRNA بشكل أُسّي في كل دورة باستخدام تقنيتي PCR وLCR). وينتج عن ذلك زيادة في عدد نسخ الحمض النووي DNA (أو RNA) بمقدار 10 مليارات ضعف خلال حوالي 15 إلى 30 دقيقة.
مراجع
- دانيال ل. كاسيان، تيموثي ج. فالتز: طرق تضخيم تسلسل الأحماض النووية. في: التقدم في التكنولوجيا الحيوية 1995، 13.3، ص 569-569
- البيولوجيا الجزيئية
- ملخصات الكيمياء الحيوية