ABTS

في الكيمياء الحيوية ، يُستخدم مركب ABTS ( حمض 2,2'-أزينو-بيس(3-إيثيل بنزوثيازولين-6-سلفونيك) ) لمراقبة حركية تفاعلات إنزيمات محددة . ومن استخداماته الشائعة اختبار المقايسة المناعية المرتبطة بالإنزيم (ELISA) للكشف عن ارتباط الجزيئات ببعضها.

يُستخدم هذا المركب عادةً كركيزة مع بيروكسيد الهيدروجين لإنزيم البيروكسيداز (مثل بيروكسيداز الفجل ) أو بمفرده مع إنزيمات أكسيداز النحاس المتعددة الزرقاء (مثل اللاكاز أو أكسيداز البيليروبين ). يسمح استخدامه بتتبع حركية تفاعل البيروكسيدازات نفسها. وبهذه الطريقة، يمكن استخدامه أيضًا لتتبع حركية تفاعل أي إنزيم مُنتِج لبيروكسيد الهيدروجين بشكل غير مباشر ، أو ببساطة لتحديد كمية بيروكسيد الهيدروجين في العينة.

تتمتع مركبات ABTS بجهود اختزال رسمية عالية بما يكفي لتعمل كمانح للإلكترونات في اختزال أنواع الأكسجين مثل الأكسجين الجزيئي وبيروكسيد الهيدروجين، لا سيما عند قيم الأس الهيدروجيني الأقل تطرفًا التي تُصادف في التحفيز البيولوجي. في ظل هذه الظروف، تكون مجموعات السلفونات منزوعة البروتونات بالكامل، ويتواجد الوسيط على شكل أنيون ثنائي.

ABTS ^{– ·} + e ^– → ABTS ^{2 –} E° ′ = 0.67 V vs SHE

ABTS + e ^– → ABTS ^{– ·} E° ′ = 1.08 V vs SHE ^{[ 1 ]}

يُختار هذا المركب لأن الإنزيم يُسهّل تفاعله مع بيروكسيد الهيدروجين، مُحوّلاً إياه إلى مُنتج نهائي أخضر اللون ^{وقابل للذوبان} . يُمكن تتبّع امتصاصه الضوئي الأقصى الجديد عند 420 نانومتر (ε = 3.6 × 10⁴ M⁻¹ cm⁻¹) [2] بسهولة باستخدام مطياف ضوئي ،  وهو جهاز شائع ^في المختبرات ^. يُستخدم ^{أحيانًا} كجزء ^{من كاشف تقدير} الجلوكوز عند تحديد تركيز الجلوكوز في محاليل مثل مصل الدم .

يُستخدم ABTS بشكل متكرر في صناعة الأغذية والباحثين الزراعيين لقياس القدرات المضادة للأكسدة للأطعمة. ^{[ 3 ]} في هذا الاختبار، يُحوّل ABTS إلى كاتيون جذري بإضافة بيرسلفات الصوديوم . يتميز هذا الكاتيون الجذري بلونه الأزرق، ويمتص الضوء عند أطوال موجية 415 و645 و734 و815  نانومتر. ^{[ 4 ]} يتفاعل كاتيون ABTS الجذري مع معظم مضادات الأكسدة، بما في ذلك المركبات الفينولية والثيولات وفيتامين C. [ 5 ^{] خلال هذا} التفاعل، يعود كاتيون ABTS الجذري الأزرق إلى شكله المتعادل عديم اللون. يمكن مراقبة التفاعل باستخدام مطياف ضوئي. يُشار إلى هذا الاختبار غالبًا باسم اختبار قدرة مضادات الأكسدة المكافئة للترولوكس (TEAC). تُقارن فعالية مضادات الأكسدة المختلفة المختبرة بفعالية الترولوكس ، وهو نظير قابل للذوبان في الماء لفيتامين E. ^{[ 6 ]}

استنادًا إلى الخصائص الكيميائية المميزة للجذور الحرة المتكونة، يُستخدم اختبار ABTS لتحديد القدرة المضادة للأكسدة للمنتجات الغذائية. فعلى سبيل المثال، تستطيع مركبات البوليفينول، الموجودة بكثرة في الفاكهة، تثبيط الجذور الحرة داخل جسم الإنسان، وبالتالي منع الضرر التأكسدي الناجم عنها. وقد تم قياس فعالية مضادات الأكسدة في مستخلصات النباتات أو المنتجات الغذائية باستخدام اختبار ABTS. ومن الأمثلة على ذلك تحليل النشاط المضاد للأكسدة لمنتجات الكركديه، مع شرح مفصل للطريقة المستخدمة. ^{[ 7 ]}