اختبار الأجسام المضادة غير المتجانسة

اختبار البقعة أحادية النواة ، أو اختبار مونوسبوت ، وهو أحد أنواع اختبارات الأجسام المضادة غير المتجانسة ، [ 1 ] هو اختبار سريع لداء كثرة الوحيدات العدوائية الناتج عن فيروس إبشتاين-بار (EBV) . يُعد هذا الاختبار تطويرًا لاختبار بول-بونيل. [ 2 ] يتميز هذا الاختبار بتخصصه في الكشف عن الأجسام المضادة غير المتجانسة التي ينتجها الجهاز المناعي البشري استجابةً لعدوى فيروس إبشتاين-بار. تتراوح حساسية مجموعات الاختبار المتوفرة تجاريًا بين 70-92%، وتخصصها بين 96-100% ، مع انخفاض الحساسية خلال الأسبوعين الأولين بعد ظهور الأعراض السريرية. [ 3 ] [ 4 ]

يعتبر مركز مكافحة الأمراض والوقاية منها في الولايات المتحدة أن اختبار مونوسبوت ليس مفيدًا للغاية. [ 5 ]

الاستخدامات الطبية

يُشار إليه كاختبار تأكيدي عندما يشتبه الطبيب في الإصابة بفيروس إبشتاين-بار، وعادةً ما يكون ذلك في وجود أعراض سريرية مثل الحمى، والتوعك، والتهاب البلعوم، وتضخم الغدد الليمفاوية المؤلم (خاصةً في الجزء الخلفي من الرقبة؛ والذي يُطلق عليه غالبًا "الغدد المؤلمة")، وتضخم الطحال . [ 6 ]

في حالة تأخر أو غياب التحول المصلي ، يمكن استخدام اختبار التألق المناعي إذا كان التشخيص غير مؤكد. يتميز هذا الاختبار بالخصائص التالية: مستضدات الغلاف الفيروسي من فئة IgM، والأجسام المضادة للمستضد المبكر لفيروس إبشتاين-بار (anti-EA)، وغياب الأجسام المضادة للمستضد النووي لفيروس إبشتاين-بار (anti-EBNA).

فائدة

يذكر أحد المصادر أن دقة الاختبار عالية، تكاد تصل إلى 100%، [ 7 ] ويذكر مصدر آخر أن عدداً من الحالات الأخرى قد تُسبب نتائج إيجابية خاطئة . [ 5 ] مع ذلك، في حالات نادرة، قد ينتج اختبار الأجسام المضادة غير المتجانسة عن الذئبة الحمامية الجهازية ، أو داء المقوسات ، أو الحصبة الألمانية ، أو اللمفوما ، أو اللوكيميا . [ 7 ]

مع ذلك، فإن حساسية الاختبار متوسطة فقط، لذا فإن النتيجة السلبية لا تنفي الإصابة بفيروس إبشتاين-بار. ويبرز هذا النقص في الحساسية بشكل خاص لدى الأطفال الصغار، حيث لا ينتج الكثير منهم كميات قابلة للكشف من الأجسام المضادة غير المتجانسة، وبالتالي تكون نتيجة الاختبار سلبية خاطئة. [ 8 ]

توقيت

لن تكون النتيجة إيجابية عادةً خلال فترة الحضانة التي تتراوح بين 4 و6 أسابيع قبل ظهور الأعراض. ​​ويبلغ مستوى الأجسام المضادة غير المتجانسة ذروته بعد أسبوعين إلى خمسة أسابيع من ظهور الأعراض. ​​[ 9 ] وفي حال كانت النتيجة إيجابية، فستبقى كذلك لمدة ستة أسابيع على الأقل. [ 10 ] وقد يستمر ارتفاع مستوى الأجسام المضادة غير المتجانسة لمدة تصل إلى عام. [ 9 ]

عملية

يُجرى هذا الاختبار عادةً باستخدام مجموعات اختبار متوفرة تجاريًا، تكشف عن تفاعل الأجسام المضادة غير المتجانسة في عينة دم الشخص مع مستضدات خلايا الدم الحمراء للخيول أو الأبقار. تعمل هذه المجموعات وفقًا لمبادئ التراص اللاتكسي أو الكروماتوغرافيا المناعية . باستخدام هذه الطريقة، يمكن للأفراد إجراء الاختبار دون تدريب متخصص، وقد تظهر النتائج في غضون خمس دقائق فقط. [ 8 ] [ 11 ]

تعتمد النسخ اليدوية من الاختبار على تراص كريات الدم الحمراء للحصان بواسطة الأجسام المضادة غير المتجانسة في مصل المريض. تعني كلمة "غير متجانسة" أنها تتفاعل مع البروتينات عبر الأنواع المختلفة. [ 12 ] كما قد تعني أيضًا أنها أجسام مضادة تتفاعل مع مستضدات أخرى غير المستضد الذي حفزها (أجسام مضادة متقاطعة التفاعل). يُستخدم معلق بنسبة 20% من كريات الدم الحمراء للحصان في محلول سترات الصوديوم متساوي التوتر بنسبة 3-8%. تُخلط قطرة واحدة من مصل المريض المراد فحصه على شريحة زجاجية معتمة مع قطرة واحدة من معلق جزيئي من نسيج كلية خنزير غينيا، ومعلق من نسيج كريات الدم الحمراء للثور؛ يُخلط المصل والمعلقات باستخدام أداة خشبية عشر مرات. ثم يُضاف عشرة ميكرولترات من معلق كريات الدم الحمراء للحصان ويُخلط مع كل قطرة من المصل الممتص. يُترك المزيج دون تحريك لمدة دقيقة واحدة (دون هز أو رج). ثم يُفحص وجود أو غياب تراص كريات الدم الحمراء . إذا كان التراص أقوى مع المصل الممتص بواسطة كلية خنزير غينيا، تكون النتيجة إيجابية. إذا كان التراص أقوى مع المصل الممتص بواسطة سدى كريات الدم الحمراء للثور، تكون النتيجة سلبية. إذا لم يحدث تراص في كلا الخليطين، تكون النتيجة سلبية. يُختبر مصل تحكم معروف "إيجابي" وآخر "سلبي" مع كل دفعة من أمصال الاختبار.

مراجع

  1. باسون ، ف.، وشارب، أ.أ. (مايو 1969). "اختبار مونوسبوت: اختبار شريحة تفريقي لداء كثرة الوحيدات العدوائية" . مجلة علم الأمراض السريرية . 22 (3): 324-325 . doi : 10.1136/jcp.22.3.324 . PMC 474075. PMID 5814738 .  
  2. سيتانيديس، ب (1969). "مقارنة اختبار مونوسبوت باختبار بول-بونيل في داء كثرة الوحيدات العدوائية وأمراض أخرى". مجلة علم الأمراض السريرية . 22 ( 3 ): 321-323 . doi : 10.1136/jcp.22.3.321 . PMC 474073. PMID 5814737 .  
  3. إلغ، ف؛ ليندرهولم، م (1996). "تقييم ست مجموعات أدوات متوفرة تجاريًا باستخدام مستضد غير متجانس نقي للتشخيص السريع لداء كثرة الوحيدات العدوائية مقارنةً بالفحوصات المصلية الخاصة بفيروس إبشتاين-بار". علم الفيروسات السريري والتشخيصي . 7 (1): 17-21 . doi : 10.1016/S0928-0197(96)00245-0 . PMID 9077426 . 
  4. إيبيل، إم إتش (1 أكتوبر 2004). "داء كثرة الوحيدات العدوائية الناتج عن فيروس إبشتاين-بار". طبيب الأسرة الأمريكي . 70 (7): 1279-87 . PMID 15508538 . 
  5. 1 2 "الاختبارات المعملية لفيروس إبشتاين-بار وداء كثرة الوحيدات العدوائية" . مركز السيطرة على الأمراض والوقاية منها . 7 يناير 2014. تم الاطلاع عليه في 10 أغسطس 2016 .
  6. مبادئ وممارسات ديفيدسون في الطب، الطبعة العشرون
  7. ١ ٢ فحوصات تشخيص داء كثرة الوحيدات العدوائية من موقع Medscape . المؤلف: الدكتور بيرك أ. كونها؛ رئيس التحرير: الدكتور مايكل ستيوارت برونز. تاريخ التحديث: ٢١ سبتمبر ٢٠١١
  8. 1 2 ريتشارد ل. هودينكا؛ ستيفن أ. يونغ؛ بنجامين أ. بينسكي (10 يوليو 2020). دليل علم الفيروسات السريري . وايلي. ص 233. ISBN  978-1-55581-915-6.
  9. 1 2 جاتين م. فياس. "اختبار الكشف عن داء كثرة الوحيدات العدوائية" . ميدلاين بلس . تم الاسترجاع في 2017-06-08 .تاريخ المراجعة: 13/3/2016
  10. "داء كثرة الوحيدات العدوائية" (ملف PDF) . خدمات الصحة الجامعية، جامعة ولاية بنسلفانيا . تم الاطلاع عليه بتاريخ 2017-08-06 .تمت المراجعة بتاريخ 15/06/2016
  11. "الفصل 11.9.1: فيروس إبشتاين-بار: مقدمة" . دليل إجراءات علم الأحياء الدقيقة السريري . وايلي. 6 أغسطس 2020. ISBN 978-1-55581-881-4.
  12. "تعريف كلمة heterophil | Dictionary.com" . www.dictionary.com .