الحمض النووي التكميلي

الموسوعة الحرة

مخرجات من مصفوفة الحمض النووي التكميلي المستخدمة في الاختبار

في علم الوراثة ، يُعرف الحمض النووي التكميلي ( cDNA ) بأنه الحمض النووي الذي تم نسخه عكسيًا (بواسطة إنزيم النسخ العكسي ) من الحمض النووي الريبوزي (RNA) (مثل الحمض النووي الريبوزي الرسول أو الحمض النووي الريبوزي الميكروي ). يوجد الحمض النووي التكميلي في كل من الأشكال أحادية السلسلة وثنائية السلسلة، وفي كل من الأشكال الطبيعية والمُهندسة.

في أشكالها المُهندسة، غالبًا ما تكون نسخةً (مُكررة) من الحمض النووي الموجود طبيعيًا في جينوم أي كائن حي مُعين؛ حيث يتم نسخ الحمض النووي الريبوزي الرسول (mRNA) الخاص بالكائن الحي بشكل طبيعي من حمضه النووي، ويتم نسخ الحمض النووي التكميلي (cDNA) عكسيًا من الحمض النووي الريبوزي الرسول، مما ينتج عنه نسخة مُكررة من الحمض النووي الأصلي. يُستخدم الحمض النووي التكميلي المُهندس غالبًا للتعبير عن بروتين مُحدد في خلية لا تُعبر عادةً عن هذا البروتين (أي التعبير غير المتجانس )، أو لتسلسل أو تحديد كمية جزيئات الحمض النووي الريبوزي الرسول باستخدام طرق تعتمد على الحمض النووي (qPCR، RNA-seq). يمكن نقل الحمض النووي التكميلي الذي يُشفّر بروتينًا مُحددًا إلى خلية مُستقبلة للتعبير عنه كجزء من الحمض النووي المُعاد تركيبه ، وغالبًا ما تكون أنظمة التعبير بكتيرية أو خميرة. [ 1 ] كما يتم توليد الحمض النووي التكميلي لتحليل ملامح النسخ في الأنسجة، أو الخلايا المفردة، أو النوى المفردة في فحوصات مثل المصفوفات الدقيقة ، و qPCR ، و RNA-seq .

في الأشكال الطبيعية، يتم إنتاج الحمض النووي التكميلي بواسطة الفيروسات القهقرية (مثل فيروس نقص المناعة البشرية 1 ، وفيروس نقص المناعة البشرية 2 ، وفيروس نقص المناعة القردي ، وما إلى ذلك) ثم يتم دمجه في جينوم المضيف، حيث يقوم بإنشاء فيروس أولي . [ 2 ]

يُستخدم مصطلح cDNA أيضًا، عادةً في سياق المعلوماتية الحيوية ، للإشارة إلى تسلسل نسخة mRNA، معبرًا عنها كقواعد DNA (deoxy-GCAT) بدلاً من قواعد RNA (GCAU).

كانت قابلية الحصول على براءة اختراع للحمض النووي التكميلي موضوع قرار المحكمة العليا الأمريكية لعام 2013 في قضية جمعية علم الأمراض الجزيئية ضد شركة ميرياد جينيتكس. وكحل وسط، أعلنت المحكمة أن الحمض النووي التكميلي المكون من الإكسونات فقط مؤهل للحصول على براءة اختراع، في حين أن التسلسلات المعزولة من الحمض النووي الطبيعي الذي يتكون من الإنترونات ليست كذلك.

توليف

يُستخدم الحمض النووي الريبوزي (RNA) كقالب لتخليق الحمض النووي التكميلي (cDNA). [ 3 ] في الحياة الخلوية، يُنتَج الحمض النووي التكميلي (cDNA) بواسطة الفيروسات والعناصر المتنقلة الرجعية لدمج الحمض النووي الريبوزي (RNA) في الحمض النووي الجينومي المستهدف . في البيولوجيا الجزيئية، يُنقّى الحمض النووي الريبوزي (RNA) من المادة المصدرية بعد إزالة الحمض النووي الجينومي والبروتينات والمكونات الخلوية الأخرى. ثم يُصنَّع الحمض النووي التكميلي (cDNA) من خلال النسخ العكسي في المختبر . [ 4 ]

تنقية الحمض النووي الريبي

يُستنسخ الحمض النووي الريبوزي (RNA) من الحمض النووي الجينومي (DNA) في الخلايا المضيفة، ويُستخلص أولًا بتحليل الخلايا ثم تنقية الحمض النووي الريبوزي باستخدام طرق شائعة الاستخدام، مثل طريقة الفينول-الكلوروفورم، وعمود السيليكا، وطرق استخلاص الحمض النووي الريبوزي القائمة على الخرز. [ 5 ] تختلف طرق الاستخلاص باختلاف المادة المصدرية. على سبيل المثال، يتطلب استخلاص الحمض النووي الريبوزي من الأنسجة النباتية استخدام كواشف إضافية، مثل بولي فينيل بيروليدون (PVP)، لإزالة المركبات الفينولية والكربوهيدرات وغيرها من المركبات التي قد تجعل الحمض النووي الريبوزي غير قابل للاستخدام. [ 6 ] ولإزالة الحمض النووي والبروتينات، تُستخدم إنزيمات مثل ديوكسي ريبونيوكلياز (DNase) وبروتينيز K لتحليلها. [ 7 ] ومن المهم الحفاظ على سلامة الحمض النووي الريبوزي عن طريق تعطيل إنزيمات الريبونيوكلياز (RNases) باستخدام عوامل فوضوية مثل إيزوثيوسيانات الغوانيدينيوم، وكبريتات دوديسيل الصوديوم (SDS)، والفينول، أو الكلوروفورم. بعد ذلك، يُفصل الحمض النووي الريبوزي الكلي عن المكونات الخلوية الأخرى ويُرسب بالكحول. تتوفر العديد من مجموعات الاستخلاص التجارية البسيطة والسريعة للحمض النووي الريبوزي (RNA) لتطبيقات محددة. [ 8 ] ويمكن استخدام طرق إضافية تعتمد على الخرز لعزل أنواع فرعية محددة من الحمض النووي الريبوزي (مثل mRNA و microRNA ) بناءً على الحجم أو مناطق الحمض النووي الريبوزي الفريدة. [ 9 ] [ 10 ]

النسخ العكسي

تخليق السلسلة الأولى

باستخدام إنزيم النسخ العكسي وقوالب الحمض النووي الريبوزي (RNA) النقية، يتم إنتاج سلسلة واحدة من الحمض النووي التكميلي (cDNA) (تخليق cDNA من السلسلة الأولى). يُستخدم إنزيم النسخ العكسي M-MLV من فيروس ابيضاض الدم الفأري مولوني بشكل شائع نظرًا لانخفاض نشاطه كإنزيم RNase H، مما يجعله مناسبًا لنسخ جزيئات RNA الأطول. [ 11 ] كما يمكن استخدام إنزيم النسخ العكسي AMV من فيروس ابيضاض الدم النخاعي الطيري مع قوالب RNA ذات البنى الثانوية القوية (أي درجة انصهار عالية). [ 12 ] يُنتج cDNA عادةً من mRNA لتحليلات التعبير الجيني مثل RT-qPCR و RNA-seq . [ 13 ] يُنسخ mRNA عكسيًا بشكل انتقائي باستخدام بادئات oligo-dT التي تُعد المكمل العكسي للذيل متعدد الأدينيلات الموجود على الطرف 3' لجميع جزيئات mRNA. ترتبط بادئة oligo-dT بالذيل متعدد الأدينيلات لجزيء mRNA لتكون بمثابة موقع ارتباط لإنزيم النسخ العكسي لبدء عملية النسخ العكسي. يزيد مزيج مُحسَّن من بادئات أوليغو-dT وبادئات الهيكسامر العشوائية من احتمالية الحصول على الحمض النووي التكميلي كامل الطول مع تقليل التحيز في اتجاه 5' أو 3'. [ 14 ] كما يمكن استنفاد الحمض النووي الريبوزي الريبوسومي لإثراء كل من الحمض النووي الريبوزي الرسول والنسخ غير متعددة الأدينين، مثل بعض أنواع الحمض النووي الريبوزي غير المشفر . [ 15 ]

تخليق السلسلة الثانية

يمكن معالجة ناتج تخليق السلسلة الأولى، وهو هجين الحمض النووي الريبي-الحمض النووي، عبر طرق متعددة لتخليق السلسلة الثانية، أو معالجته مباشرةً في فحوصات لاحقة. [ 16 ] [ 17 ] اعتمدت إحدى الطرق المبكرة، المعروفة باسم التخليق المُحفَّز بالحلقة الدبوسية، على تكوين حلقة دبوسية عند الطرف 3' من الحمض النووي التكميلي للسلسلة الأولى لتحفيز تخليق السلسلة الثانية. مع ذلك، فإن التحفيز عشوائي، ويؤدي تحلل الحلقة الدبوسية إلى فقدان المعلومات. تستخدم طريقة غوبلر وهوفمان إنزيم RNase H من الإشريكية القولونية لعمل شقوق في الحمض النووي الريبي الرسول، ثم يُستبدل هذا الشقوق بإنزيم بوليميراز الحمض النووي الأول من الإشريكية القولونية، ويُغلق باستخدام إنزيم ربط الحمض النووي من الإشريكية القولونية . يعتمد تحسين هذه الطريقة على انخفاض نشاط إنزيم RNase H في إنزيم M-MLV لعمل شقوق في الحمض النووي الريبي الرسول، ثم يُزال الحمض النووي الريبي المتبقي لاحقًا بإضافة إنزيم RNase H بعد ترجمة الحمض النووي التكميلي للسلسلة الثانية بواسطة إنزيم بوليميراز الحمض النووي. يمنع هذا فقدان معلومات التسلسل عند الطرف 5' من الحمض النووي الريبي الرسول.

التطبيقات

يُستخدم الحمض النووي التكميلي (cDNA) غالبًا في استنساخ الجينات أو كمجسات جينية أو في إنشاء مكتبة cDNA . عندما ينقل العلماء جينًا من خلية إلى أخرى بهدف التعبير عن المادة الوراثية الجديدة كبروتين في الخلية المستقبلة، يُضاف الحمض النووي التكميلي (cDNA) إلى الخلية المستقبلة (بدلًا من الجين بأكمله)، لأن الحمض النووي للجين الكامل قد يحتوي على أجزاء لا تُشفّر البروتين أو تُقاطع تسلسل ترميز البروتين (مثل الإنترونات ). غالبًا ما تُحصل على تسلسلات جزئية من الحمض النووي التكميلي (cDNA) كعلامات تسلسل معبرة .

مع شيوع تضخيم تسلسلات الحمض النووي باستخدام تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR)، تُجرى عادةً عملية النسخ العكسي كخطوة أولية، تليها عملية PCR للحصول على تسلسل دقيق من الحمض النووي المكمل (cDNA) للتعبير داخل الخلايا. ويتحقق ذلك بتصميم بادئات DNA محددة التسلسل ترتبط بنهايتي 5' و3' لمنطقة cDNA التي تشفر بروتينًا. بعد التضخيم، يُقطع التسلسل من كلا الطرفين باستخدام النيوكليازات ويُدخل في أحد تسلسلات DNA الدائرية الصغيرة المعروفة باسم نواقل التعبير. تسمح هذه النواقل بالتضاعف الذاتي داخل الخلايا، وربما الاندماج في الحمض النووي للخلية المضيفة. كما تحتوي عادةً على مُحفز قوي لتوجيه نسخ cDNA المستهدف إلى mRNA، والذي يُترجم بدوره إلى بروتين.

يُستخدم الحمض النووي التكميلي (cDNA) أيضًا لدراسة التعبير الجيني عبر تقنيات مثل تسلسل الحمض النووي الريبوزي (RNA-seq) أو تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي في الوقت الحقيقي (RT-qPCR) . [ 18 ] [ 19 ] [ 20 ] ولأغراض التسلسل، يجب تجزئة الحمض النووي الريبوزي (RNA) نظرًا لمحدودية حجم منصات التسلسل. بالإضافة إلى ذلك، يجب ربط الحمض النووي التكميلي المُصنّع من السلسلة الثانية بمحولات تسمح بتضخيم أجزاء الحمض النووي التكميلي باستخدام تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وربطها بخلايا تدفق التسلسل. وتستخدم طرق التحليل الخاصة بالجينات عادةً المصفوفات الدقيقة وتفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي في الوقت الحقيقي (RT-qPCR) لتحديد كمية الحمض النووي التكميلي باستخدام قياس التألق الضوئي وطرق أخرى.

في 13 يونيو 2013، قضت المحكمة العليا للولايات المتحدة في قضية جمعية علم الأمراض الجزيئية ضد شركة مايراد جينيتكس بأنه في حين لا يمكن تسجيل براءات اختراع للجينات التي تحدث بشكل طبيعي ، فإن الحمض النووي التكميلي (cDNA) مؤهل للحصول على براءة اختراع لأنه لا يحدث بشكل طبيعي. [ 21 ]

الفيروسات والعناصر المتنقلة الرجعية

تستخدم بعض الفيروسات أيضًا الحمض النووي التكميلي (cDNA) لتحويل الحمض النووي الريبوزي الفيروسي (RNA) إلى الحمض النووي الريبوزي الرسول (mRNA) (RNA الفيروسي ← cDNA ← mRNA). يُستخدم الحمض النووي الريبوزي الرسول (mRNA) في إنتاج البروتينات الفيروسية اللازمة لغزو الخلية المضيفة.

يمكن ملاحظة مثال على هذه الخطوة الأولى من الحمض النووي الريبي الفيروسي إلى الحمض النووي المكمل (cDNA) في دورة عدوى فيروس نقص المناعة البشرية. هنا، يرتبط غشاء الخلية المضيفة بالغلاف الدهني للفيروس، مما يسمح للغلاف الفيروسي، الذي يحمل نسختين من الحمض النووي الريبي الفيروسي، بالدخول إلى الخلية المضيفة. ثم تُصنع نسخة الحمض النووي المكمل (cDNA) من خلال النسخ العكسي للحمض النووي الريبي الفيروسي، وهي عملية يُسهّلها البروتين المرافق CypA وإنزيم النسخ العكسي المرتبط بالغلاف الفيروسي. [ 22 ]

يُنتَج الحمض النووي التكميلي (cDNA) أيضًا بواسطة العناصر الجينية المتنقلة (retrotransposons) في الجينومات حقيقية النواة. هذه العناصر هي عناصر وراثية متنقلة تنتقل داخل الجينومات، وأحيانًا بينها، عبر وسائط الحمض النووي الريبي (RNA). تشترك الفيروسات في هذه الآلية، باستثناء إنتاج الجسيمات المعدية. [ 23 ] [ 24 ]

انظر أيضاً

مراجع

مارك د. آدامز وآخرون. "تسلسل الحمض النووي التكميلي: علامات التسلسل المعبر عنها ومشروع الجينوم البشري". مجلة ساينس (الجمعية الأمريكية لتقدم العلوم) 252.5013 (1991): 1651-1656. على الإنترنت.

فيليب م. مورفي، وهـ. لي تيفاني. "استنساخ الحمض النووي التكميلي الذي يشفر مستقبل إنترلوكين-8 البشري الوظيفي." مجلة ساينس (الجمعية الأمريكية لتقدم العلوم) 253.5025 (1991): 1280-1283. موقع إلكتروني.

  1. ↑ هاستينغز، بي جيه (1 يناير 2001)، "الحمض النووي التكميلي (cDNA)" ، في برينر، سيدني؛ ميلر، جيفري إتش (محرران)، موسوعة علم الوراثة ، نيويورك: أكاديميك برس، ص  433، ISBN 978-0-12-227080-2تم الاطلاع عليه بتاريخ 29 نوفمبر 2022
  2. ↑ كروي، رون. "علم الوراثة الجزيئية ٢ - دورة الهندسة الوراثية (ملاحظات تكميلية)" . جامعة دورهام durham.ac.uk؛ ٢٠ أبريل ١٩٩٨. مؤرشف من الأصل في ٢٤ أغسطس ٢٠٠٢. تم الاطلاع عليه في ٤ فبراير ٢٠١٥ .
  3. ↑ يينغ، شاو-ياو (1 يوليو 2004). "مكتبات الحمض النووي التكميلي". التكنولوجيا الحيوية الجزيئية . 27 (3): 245-252 . doi : 10.1385/MB:27:3: 245 . ISSN 1559-0305 . PMID 15247497. S2CID 25600775 .   
  4. ↑ "5 خطوات لتخليق الحمض النووي التكميلي الأمثل - الولايات المتحدة" . www.thermofisher.com . تم الاطلاع عليه بتاريخ 12 مايو 2020 .
  5. ^ تافاريس، لوسيليا؛ ألفيس، باولا م . فيريرا، ريكاردو ب. سانتوس ، كلوديا ن. (6 يناير 2011). "مقارنة بين الطرق المختلفة لعزل الحمض النووي الريبي (RNA) الخالي من الحمض النووي من ورم الخلايا البدائية العصبية SK-N-MC" . ملاحظات أبحاث BMC . 4 (1): 3. دوى : 10.1186/1756-0500-4-3 . ردمك 1756-0500 . بمك 3050700 . بميد 21211020 .   
  6. ↑ ر، كانسال؛ ك، كوهار؛ إ، فيرما؛ ر ن، غوبتا؛ ف ك، غوبتا؛ ك ر، كوندال (ديسمبر 2008). "طريقة محسّنة ومريحة لعزل الحمض النووي الريبوزي من أنسجة نباتية غنية بالبوليفينولات والسكريات المتعددة". المجلة الهندية لعلم الأحياء التجريبي . 46 (12): 842-845 . PMID 19245182 . 
  7. ↑ إي، فوميلوفا؛ زد، فانيكوفا؛ إيه، سيدو (2009). "طرق تنقية الحمض النووي الريبوزي. كل الطرق (ينبغي) أن تؤدي إلى روما" . فوليا بيولوجيكا . 55 (6): 243-251 . doi : 10.14712/fb2009055060243 . PMID 20163774 . 
  8. ↑ سيلين جيفريز، مارلو ك.؛ كيس، أندور ج.؛ سميث، أوستن و.؛ أوريس، جيمس ت. (14 نوفمبر 2014). "مقارنة بين مجموعات الاستخلاص الآلية واليدوية المتوفرة تجاريًا لعزل الحمض النووي الريبوزي الكلي من عينات الأنسجة الصغيرة" . مجلة BMC للتكنولوجيا الحيوية . 14 (1): 94. doi : 10.1186/s12896-014-0094-8 . ISSN 1472-6750 . PMC 4239376. PMID 25394494 .   
  9. ↑ "عزل الحمض النووي الريبوزي الرسول باستخدام خرزات داينابيدز في 15 دقيقة - الولايات المتحدة" . www.thermofisher.com . تم الاطلاع عليه بتاريخ 20 مايو 2020 .
  10. ↑ غارز، أندريا؛ ديبي-باشر، سفينيا؛ كلاسين، سابين؛ إيغل، دانييلا؛ غاثوف، بيرجيت؛ تشين، جينغ؛ فان، جيان-بينغ؛ فوس، ثورستن؛ شولتز، يواكيم ل.؛ ستاراتشيك-جوكس، أندريا (مايو 2010). "تحليل التعبير الجيني للـ microRNA في الدم المحيطي باستخدام مصفوفة الخرز وتأثير طرق عزل الحمض النووي الريبوزي المختلفة" . مجلة التشخيص الجزيئي . 12 (3 ) : 335-344 . doi : 10.2353/jmoldx.2010.090116 . ISSN 1525-1578 . PMC 2860470. PMID 20228267 .   
  11. ↑ حداد، فادية؛ بالدوين، كينيث م. (2010)، "النسخ العكسي للحمض النووي الريبي: الخطوة الأولى في فحص RT-PCR"، في كينغ، نيكولا (محرر)، بروتوكولات RT-PCR: الطبعة الثانية ، طرق في البيولوجيا الجزيئية، المجلد 630، دار هومانا للنشر، الصفحات 261-270 ، doi : 10.1007/978-1-60761-629-0_17 ، ISBN   978-1-60761-629-0PMID 20301003​ 
  12. ↑ مارتن، كارين. "نظرة عامة على النسخ العكسي والحمض النووي التكميلي وتطبيقاته" . شركة غولد للتكنولوجيا الحيوية . تم الاطلاع عليه بتاريخ 20 مايو 2020 .
  13. ↑ "التفاعل التسلسلي الكمي للبوليميراز، أو المصفوفات الدقيقة، أو تسلسل الحمض النووي الريبوزي - ما هو الخيار الأمثل؟" . مجلة BioSistemika . 10 أغسطس 2017. تاريخ الاطلاع: 20 مايو 2020 .
  14. ↑ "تخليق الحمض النووي التكميلي | بيو-راد" . www.bio-rad.com . تم الاطلاع عليه بتاريخ 28 مايو 2020 .
  15. ↑ هربرت، زاكاري ت.؛ كيرشنر، جيمي ب.؛ بوتي، فنسنت ل.؛ ثيمابورام، جيوتي؛ تشوداري، سولبا؛ أليكسييف، يوري أ.؛ فان، جون؛ بودنار، جيسيكا و.؛ ويلكوكس، إدوارد؛ جيبسون، جيني؛ جيلاسبي، أليسون (15 مارس 2018). " مقارنة بين مواقع مختلفة لمجموعات استنزاف الريبوسومات لبناء مكتبة Illumina RNAseq" . BMC Genomics . 19 (1): 199. doi : 10.1186/s12864-018-4585-1 . ISSN 1471-2164 . PMC 6389247. PMID 29703133 .   
  16. ↑ إنفيتوجين. "نظام تخليق الحمض النووي التكميلي" (ملف PDF) . ثيرموفيشير . مؤرشف (ملف PDF) من الأصل بتاريخ 22 ديسمبر 2018. تم الاطلاع عليه بتاريخ 27 مايو 2020 .
  17. ↑ أغاروال، سوراب؛ ماكفارلان، تود س.؛ سارتور، مورين أ.؛ إيواسي، شيجيكي (21 يناير 2015). "تسلسل مكتبة الحمض النووي التكميلي أحادي السلسلة يكشف عن نسخ كاملة الطول" . نيتشر كوميونيكيشنز . 6 (1): 6002. Bibcode : 2015NatCo...6.6002A . doi : 10.1038/ncomms7002 . ISSN 2041-1723 . PMC 5054741. PMID 25607527 .   
  18. ↑ ديريسي، ج.؛ بينلاند، ل.؛ براون، ب.و.؛ بيتنر، م.ل.؛ ميلتزر، ب.س.؛ راي، م.؛ تشين، ي.؛ سو، ي.أ.؛ ترينت، ج.م. (ديسمبر 1996). "استخدام مصفوفة الحمض النووي التكميلي لتحليل أنماط التعبير الجيني في سرطان الإنسان" . علم الوراثة الطبيعية . 14 (4): 457-460 . Bibcode : 1996NaGen..14..457. doi : 10.1038 /ng1296-457 . ISSN 1546-1718 . PMID 8944026. S2CID 23091561 .   
  19. ↑ وايت، آدم ك.؛ فان إنسبرغ، مايكل؛ بيتريف، أوليه إ.؛ حميدي، ماني؛ سيكورسكي، داريك؛ مارا، ماركو أ.؛ بيريه، جيمس؛ أباريسيو، صموئيل؛ هانسن، كارل ل. (23 أغسطس 2011). " تقنية RT-qPCR عالية الإنتاجية للخلايا المفردة باستخدام الموائع الدقيقة" . وقائع الأكاديمية الوطنية للعلوم . 108 (34): 13999-14004 . Bibcode : 2011PNAS..10813999W . doi : 10.1073/pnas.1019446108 . ISSN 0027-8424 . PMC 3161570. PMID 21808033 .   
  20. ↑ هردليكوفا، رادميلا؛ تولوي، مسعود؛ تيان، بن (يناير 2017). "طرق تسلسل الحمض النووي الريبوزي لتحليل النسخ الجيني" . مراجعات وايلي متعددة التخصصات. الحمض النووي الريبوزي . 8 (1) e1364. doi : 10.1002/wrna.1364 . ISSN 1757-7004 . PMC 5717752. PMID 27198714 .   
  21. ↑ ليبتاك، آدم (13 يونيو 2013). "المحكمة العليا تقضي بعدم جواز تسجيل براءات اختراع للجينات البشرية" . صحيفة نيويورك تايمز . مؤرشف من الأصل في 1 يناير 2022. تم الاطلاع عليه في 14 يونيو 2013 .
  22. ↑ ألتفيلد، ماركوس؛ غيل، مايكل الابن (1 يونيو 2015). "المناعة الفطرية ضد عدوى فيروس نقص المناعة البشرية من النوع الأول" . مجلة نيتشر إيمونولوجي . 16 (6): 554-562 . doi : 10.1038/ni.3157 . ISSN 1529-2908 . PMID 25988887. S2CID 1577651 .   
  23. ↑ هافيكر، إريكا ر.؛ غاو، شيانغ؛ فويتاس، دانيال ف. (18 مايو 2004). "تنوع عناصر النسخ العكسي ذات التكرارات الطرفية الطويلة" . علم الأحياء الجينومي . 5 (6): 225. doi : 10.1186/gb-2004-5-6-225 . ISSN 1474-760X . PMC 463057. PMID 15186483 .   
  24. ↑ كوردو، ريتشارد؛ باتزر، مارك أ. (أكتوبر 2009). "تأثير العناصر المتنقلة الرجعية على تطور الجينوم البشري" . مجلة Nature Reviews Genetics . 10 (10): 691-703 . doi : 10.1038/nrg2640 . ISSN 1471-0064 . PMC 2884099. PMID 19763152 .