شريحة المجهر

شريحة المجهر عبارة عن قطعة زجاجية مسطحة رقيقة ، يبلغ حجمها عادة 75 × 26 مم (3 × 1 بوصة) وسمكها حوالي 1 مم، وتستخدم لحمل الأشياء للفحص تحت المجهر . وعادة ما يتم تثبيت الجسم (تأمينه) على الشريحة، ثم يتم إدخالهما معًا في المجهر للعرض. يسمح هذا الترتيب بإدخال العديد من الأشياء المثبتة على الشريحة وإخراجها بسرعة من المجهر، ووضع العلامات عليها، ونقلها، وتخزينها في علب أو مجلدات شرائح مناسبة وما إلى ذلك.

غالبًا ما تُستخدم شرائح المجهر مع غطاء زجاجي أو غطاء زجاجي، وهي عبارة عن صفيحة زجاجية أصغر وأرق توضع فوق العينة. يتم تثبيت الشرائح في مكانها على منصة المجهر بواسطة مشابك الشرائح أو المشابك أو طاولة متقاطعة تُستخدم لتحقيق حركة دقيقة عن بُعد للشريحة على منصة المجهر (كما هو الحال في النظام الآلي/المُدار بواسطة الكمبيوتر، أو حيث يكون لمس الشريحة بالأصابع غير مناسب إما بسبب خطر التلوث أو عدم الدقة).

كان أصل المفهوم عبارة عن قطع من العاج أو العظام ، تحتوي على عينات مثبتة بين أقراص من الميكا الشفافة ، والتي تنزلق في الفجوة بين المنصة والهدف. ^[1] كانت هذه "الشرائح" شائعة في إنجلترا الفيكتورية حتى قدمت الجمعية الملكية المجهرية شريحة المجهر الزجاجية القياسية. ^[2]

يبلغ مقاس شريحة المجهر القياسية حوالي 75 مم × 25 مم (3 بوصات × 1 بوصة) ويبلغ سمكها حوالي 1 مم. تتوفر مجموعة من الأحجام الأخرى لأغراض خاصة مختلفة، مثل 75 × 50 مم للاستخدام الجيولوجي ، و46 × 27 مم للدراسات الصخرية ، و48 × 28 مم للمقاطع الرقيقة . عادة ما تكون الشرائح مصنوعة من الزجاج العادي وغالبًا ما تكون حوافها مصقولة أو مصقولة جيدًا .

عادة ما تكون شرائح المجهر مصنوعة من زجاج عالي الجودة ، مثل زجاج الصودا والجير أو زجاج البورسليكات ، ولكن يتم استخدام البلاستيك المتخصص أيضًا. غالبًا ما تُستخدم شرائح الكوارتز المندمجة عندما تكون الشفافية فوق البنفسجية مهمة، على سبيل المثال في المجهر الفلوري . ^{[3] [4]}

في حين أن الشرائح العادية هي الأكثر شيوعًا، إلا أن هناك العديد من الأنواع المتخصصة. تحتوي الشريحة المقعرة أو الشريحة المجوفة على انخفاض ضحل واحد أو أكثر ("آبار")، مصممة لحمل أشياء أكثر سمكًا قليلاً، وعينات معينة مثل السوائل ومزارع الأنسجة . ^[5] قد تحتوي الشرائح على زوايا مستديرة لزيادة الأمان أو المتانة، أو زاوية مقطوعة للاستخدام مع مشبك الشريحة أو الطاولة المتقاطعة، حيث يتم تأمين الشريحة بواسطة ذراع منحني محمل بنابض يلامس أحد الزوايا، مما يجبر الزاوية المقابلة للشريحة على ذراع بزاوية قائمة لا تتحرك. إذا تم استخدام هذا النظام مع شريحة لا تتضمن هذه الزوايا المقطوعة، فإن الزوايا سوف تتشقق وقد تتحطم الشريحة. ^[5]

يتم تمييز شريحة الشبكة بشبكة من الخطوط (على سبيل المثال، شبكة مقاس 1 مم) تسمح بتقدير حجم الأشياء المرئية تحت التكبير بسهولة وتوفر مناطق مرجعية لحساب الأشياء الدقيقة. في بعض الأحيان، يتم تقسيم مربع واحد من الشبكة إلى شبكة أدق. قد تحتوي الشرائح المخصصة للتطبيقات المتخصصة، مثل أجهزة قياس عدد الخلايا، على خزانات وقنوات وحواجز مختلفة محفورة أو مطحونة على سطحها العلوي. ^{[6] قد تتم} طباعة علامات أو أقنعة دائمة مختلفة ، أو تفجيرها بالرمل ، أو ترسبها على السطح بواسطة الشركة المصنعة، عادةً باستخدام مواد خاملة مثل PTFE . ^[7]

• 
  شريحة نويباور لحساب الخلايا.
• 
  صورة مجهرية لشبكة شريحة نيوباور المستخدمة في حساب الخلايا .
• 
  شريحة نيوباور مثبتة في مكانها على حامل المجهر بواسطة مشبك شريحة على طاولة متقاطعة.
• 
  شريحة مجهر قياسية (75 × 25 مم أو 3 × 1 بوصة) وكبيرة (75 × 51 مم أو 3 × 2 بوصة).

تحتوي بعض الشرائح على منطقة مصقولة أو مطلية بالمينا في أحد طرفيها، لوضع العلامات عليها بقلم رصاص أو قلم. ^[5] قد تحتوي الشرائح على طلاءات خاصة يتم تطبيقها من قبل الشركة المصنعة، على سبيل المثال للخمول الكيميائي أو تعزيز التصاق الخلايا . قد يكون للطلاء شحنة كهربائية دائمة لحمل العينات الرقيقة أو المسحوقة. تشمل الطلاءات الشائعة بولي-L-lysine ، والسيلانات ، والراتنجات الإيبوكسي ، ^{[5] [7]} أو حتى الذهب . ^[8]

غالبًا ما يكون تثبيت العينات على شرائح المجهر أمرًا بالغ الأهمية للعرض الناجح. وقد حظيت هذه المشكلة باهتمام كبير في القرنين الماضيين وهي مجال متطور للغاية مع العديد من التقنيات المتخصصة والمتطورة للغاية في بعض الأحيان. غالبًا ما يتم تثبيت العينات في مكانها باستخدام شرائح زجاجية أصغر حجمًا .

الوظيفة الرئيسية لغطاء الشريحة هي إبقاء العينات الصلبة مضغوطة بشكل مسطح، والعينات السائلة على شكل طبقة مسطحة ذات سمك متساوٍ. وهذا ضروري لأن المجاهر عالية الدقة لها منطقة ضيقة للغاية تركز فيها.

غالبًا ما يكون للغطاء الزجاجي عدة وظائف أخرى. فهو يحمل العينة في مكانها (إما عن طريق وزن غطاء الشريحة أو، في حالة التركيب الرطب، عن طريق التوتر السطحي ) ويحمي العينة من الغبار والاتصال العرضي. كما أنه يحمي عدسة المجهر الموضوعية من ملامسة العينة والعكس صحيح؛ في المجهر الغاطس بالزيت أو المجهر الغاطس بالماء، يمنع غطاء الشريحة الاتصال بين سائل الغمر والعينة. يمكن لصق غطاء الشريحة بالشريحة لإغلاق العينة، مما يمنع جفاف العينة وأكسدتها ويمنع التلوث أيضًا. هناك عدد من المواد المانعة للتسرب قيد الاستخدام، بما في ذلك المواد المانعة للتسرب التجارية، أو المستحضرات المعملية، أو حتى طلاء الأظافر الشفاف العادي، اعتمادًا على العينة. مادة مانعة للتسرب خالية من المذيبات يمكن استخدامها لعينات الخلايا الحية هي "فالاب"، وهي مزيج من الفازلين واللانولين والبارافين بأجزاء متساوية. ^{[9] يمكن زراعة} الثقافات الميكروبية والخلوية مباشرة على غطاء الشريحة قبل وضعها على الشريحة، ويمكن تركيب العينات بشكل دائم على الغطاء بدلاً من الشريحة. ^[9]

تتوفر شرائح التغطية بمجموعة من الأحجام والسمك. ^[10] قد يؤدي استخدام السمك الخطأ إلى حدوث انحراف كروي وانخفاض في الدقة وكثافة الصورة. يمكن استخدام الأهداف المتخصصة لتصوير العينات بدون شرائح تغطية، أو قد تحتوي على أطواق تصحيح تسمح للمستخدم بالتكيف مع سمك شريحة التغطية البديل. ^{[11] [12]}

في التركيب الجاف ، وهو أبسط أنواع التركيب، يتم وضع الجسم على الشريحة فقط. ويمكن وضع غطاء منزلق في الأعلى لحماية العينة والعدسة الموضوعية للمجهر وللحفاظ على العينة ثابتة ومضغوطة بشكل مسطح. يمكن استخدام هذا التركيب بنجاح لعرض عينات مثل حبوب اللقاح والريش والشعر وما إلى ذلك. كما يستخدم لفحص الجسيمات المحاصرة في مرشحات الغشاء الشفافة (على سبيل المثال، في تحليل الغبار المحمول جوًا ).

في التركيب الرطب ، توضع العينة في قطرة من اليود أو سائل آخر يتم تثبيته بين الشريحة والغطاء بواسطة التوتر السطحي. تُستخدم هذه الطريقة عادةً، على سبيل المثال، لعرض الكائنات الحية الدقيقة التي تنمو في مياه البرك أو غيرها من الوسائط السائلة، وخاصة البحيرات.

بالنسبة للأبحاث المرضية والبيولوجية ، تخضع العينة عادة لتحضير نسيجي معقد يتضمن تثبيتها لمنع التسوس، وإزالة أي ماء موجود فيها، واستبدال الماء بالبارافين ، وتقطيعها إلى أقسام رقيقة جدًا باستخدام ميكروتوم ، ووضع الأقسام على شريحة المجهر، وتلوين الأنسجة باستخدام بقع مختلفة للكشف عن مكونات الأنسجة المحددة، وتنظيف الأنسجة لجعلها شفافة وتغطيتها بغطاء زجاجي ووسط تثبيت.

يصف التركيب المتناثر إنتاج شرائح المجهر البالينولوجية عن طريق تعليق عينة مركزة في الماء المقطر ، ووضع العينات على شريحة، والسماح للماء بالتبخر . ^[13]

وسط التثبيت هو المحلول الذي تُدفن فيه العينة، عادةً تحت غطاء زجاجي. يمكن اعتبار السوائل البسيطة مثل الماء أو الجلسرين وسط تثبيت، على الرغم من أن المصطلح يشير عمومًا إلى المركبات التي تتصلب في حامل دائم. تشمل وسائط التثبيت الشائعة بيرماونت ، ^[14] ووسط تثبيت هوير وهلام الجلسرين البديل ^[15]. تشمل خصائص وسط التثبيت الجيد وجود مؤشر انكسار قريب من مؤشر الزجاج (1.518)، وعدم التفاعل مع العينة، والاستقرار بمرور الوقت دون تبلور أو تعتيم أو تغيير مؤشر الانكسار، والذوبان في الوسط الذي تم تحضير العينة فيه (إما مائي أو غير قطبي ، مثل الزيلين أو التولوين )، وعدم التسبب في تلاشي أو تسرب بقعة العينة. ^[16]

تُستخدم بشكل شائع في الكيمياء الخلوية المناعية الفلورية حيث لا يمكن أرشفة الفلورسنت. يجب إجراء التخزين المؤقت في حجرة مظلمة ورطبة. الأمثلة الشائعة هي:

1. الجلسرين-PBS (9:1) مع أنتيكنش، على سبيل المثال أي من الآتي ^[17]
   1. ب-فينيلينديامين
   2. بروبيل جالات
   3. 1,4-ديازابيسايكلو (2,2,2)-أوكتان (دابكو) (شائع جدًا)
   4. حمض الأسكوربيك
   5. موفيول أو جيلفاتول
2. الجيلاتين
3. جبل
4. فيكتاشيلد
5. إطالة الذهب
6. CyGEL / CyGEL Sustain (لتثبيت الخلايا والكائنات الحية غير الثابتة)

يتم استخدامه عندما يكون هناك حاجة إلى تثبيت دائم

1. بيرمونت (تولوين وبوليمر ألفا بينين، وبيتا بينين، وديبينتين، وبيتا فيلاندرين)
2. بلسم كندا
3. DPX ( Distrene 80 – بوليسترين تجاري ، مادة بلاستيكية مثل فثالات ثنائي البوتيل والزيلين )
4. DPX جديد (مع زيلين ولكن خالٍ من مادة ثنائي بوتيل فثالات المسرطنة )
5. انتلان (مع التولوين)
6. انتلان جديد
7. وسط هويرز هاليد هيمبستيد (تركيبة خاصة من وسط هويرز التقليدي تحتوي على 60% كلورال ، ولكنها خالية من المواد المسرطنة المعروفة)
8. Neo-Mount (متوافق مع النيو كلير الأليفاتي ولكن غير متوافق مع المذيبات العطرية مثل الزيلين)

على النقيض من التركيب اللازم لأغطية الزجاج، يمكن إجراء تركيب مماثل إلى حد ما لحفظ العينات الضخمة في حاويات زجاجية في المتاحف. ومع ذلك، يتم إجراء نوع مختلف تمامًا من التركيب لإعداد العينات ، والذي يمكن أن يكون للمواد البيولوجية أو غير البيولوجية وينقسم إلى عمليات تركيب من النوع "الساخن" (الضاغط) و"البارد" (القابل للصب). ^{[18] [19]} على الرغم من تسميته "التركيب"، إلا أنه أقرب إلى التضمين في علم الأنسجة ولا ينبغي الخلط بينه وبين التركيب الموصوف أعلاه. مصطلح التركيب في مجالات أخرى له معاني أخرى عديدة.

• طبق بتري