زراعة الأنسجة النباتية

📅 آخر تحديث: ٢٦ يوليو ٢٠٢٦
✍️ نُشر في: ٢٦ يوليو ٢٠٢٦
📷 يحتوي على 2 صور
الموسوعة الحرة

زراعة الأنسجة النباتية هي مجموعة من التقنيات المستخدمة للحفاظ على خلايا أو أنسجة أو أعضاء النبات أو تنميتها في ظروف معقمة على وسط غذائي معروف التركيب. وتُستخدم على نطاق واسع لإنتاج نسخ طبق الأصل من النبات في طريقة تُعرف باسم الإكثار الدقيق . وقد توفر التقنيات المختلفة في زراعة الأنسجة النباتية مزايا معينة مقارنةً بطرق الإكثار التقليدية، منها:

زراعة أنسجة البطاطا في المختبر
زراعة أنسجة النباتات في بنك بذور تابع لوزارة الزراعة الأمريكية ، وهو المركز الوطني لحفظ الموارد الوراثية.
  • إنتاج نسخ طبق الأصل من النباتات التي تنتج أزهارًا أو ثمارًا أو سمات مرغوبة أخرى جيدة بشكل خاص.
  • لإنتاج نباتات ناضجة بسرعة.
  • إنتاج عدد كبير من النباتات في مساحة صغيرة.
  • إنتاج أعداد كبيرة من النباتات في غياب البذور أو الملقحات اللازمة لإنتاج البذور.
  • تجديد النباتات الكاملة من خلايا نباتية معدلة وراثيًا.
  • إن إنتاج النباتات في حاويات معقمة يسمح بنقلها مع تقليل فرص نقل الأمراض والآفات ومسببات الأمراض بشكل كبير.
  • إنتاج النباتات من البذور التي لديها فرص ضئيلة جدًا للإنبات والنمو، على سبيل المثال، الأوركيد ونباتات الإبريق .
  • لتنظيف نباتات معينة من الفيروسات والعدوى الأخرى، ولتكثير هذه النباتات بسرعة كـ "مخزون نظيف" للبستنة والزراعة.
  • استنساخ النباتات المقاومة للظروف المناخية اللازمة لاستصلاح الأراضي
  • تخزين المواد الوراثية النباتية لحماية أنواع النباتات المحلية.

تعتمد زراعة الأنسجة النباتية على قدرة العديد من أجزاء النبات على التجدد لتكوين نبات كامل (تُسمى خلايا هذه الأجزاء النباتية المتجددة بالخلايا متعددة القدرات ، والتي يمكنها التمايز إلى أنواع مختلفة من الخلايا المتخصصة). ويمكن استخدام الخلايا المفردة، والخلايا النباتية الخالية من الجدران الخلوية ( البروتوبلاستات )، وقطع الأوراق أو السيقان أو الجذور، لإنتاج نبات جديد في بيئات زراعية، شريطة توفير العناصر الغذائية والهرمونات النباتية اللازمة .

التقنيات المستخدمة في زراعة الأنسجة النباتية في المختبر

يُجرى تحضير الأنسجة النباتية لزراعة الأنسجة في ظروف معقمة باستخدام هواء مُرشَّح بتقنية HEPA، مُوفَّر من خزانة تدفق صفائحي . بعد ذلك، تُزرع الأنسجة في أوعية معقمة، مثل أطباق بتري أو قوارير، في غرفة نمو ذات درجة حرارة وإضاءة مضبوطتين. تكون المواد النباتية الحية من البيئة مُلوَّثة بشكل طبيعي على أسطحها (وأحيانًا داخلها) بالكائنات الدقيقة ، لذا تُعقَّم أسطحها بمحاليل كيميائية (عادةً الكحول وهيبوكلوريت الصوديوم أو الكالسيوم ) [ 1 ] قبل أخذ عينات مناسبة (تُعرف باسم الأجزاء النباتية المُستأصلة ). تُوضع الأجزاء النباتية المُستأصلة المعقمة عادةً على سطح وسط زراعة صلب معقم، ولكن في بعض الأحيان تُوضع مباشرةً في وسط سائل معقم، خاصةً عند الرغبة في زراعة معلقات خلوية. تتكون الأوساط الصلبة والسائلة عمومًا من أملاح غير عضوية بالإضافة إلى بعض العناصر الغذائية العضوية والفيتامينات والهرمونات النباتية. تُحضَّر الأوساط الصلبة من الأوساط السائلة بإضافة عامل مُجلِّد، عادةً ما يكون أجارًا مُنقَّى .

يؤثر تركيب الوسط الغذائي، وخاصة الهرمونات النباتية ومصدر النيتروجين (النترات مقابل أملاح الأمونيوم أو الأحماض الأمينية)، تأثيرًا بالغًا على شكل الأنسجة النامية من الجزء النباتي الأولي. فعلى سبيل المثال، غالبًا ما تؤدي زيادة الأوكسين إلى تكاثر الجذور، بينما قد تؤدي زيادة السيتوكينين إلى نمو البراعم . أما التوازن بين الأوكسين والسيتوكينين فيؤدي عادةً إلى نمو غير منتظم للخلايا، أو ما يُعرف بالكالس ، إلا أن شكل النمو الناتج يعتمد على نوع النبات وتركيب الوسط الغذائي. ومع نمو المزارع، تُقطع أجزاء منها وتُزرع في أوساط غذائية جديدة للسماح بنموها أو لتغيير شكلها. وتُعد مهارة وخبرة مُختص زراعة الأنسجة عاملًا هامًا في تحديد الأجزاء التي يجب زراعتها وتلك التي يجب التخلص منها.

عندما تظهر البراعم من المزرعة، يمكن قطعها وتجذيرها باستخدام الأوكسين لإنتاج شتلات، والتي يمكن نقلها عند نضجها إلى تربة الزراعة لمزيد من النمو في الدفيئة كنباتات عادية. [ 2 ]

مسارات التجديد

تُعزى الاختلافات المحددة في قدرة الأعضاء والأجزاء النباتية المختلفة على التجدد إلى عدة عوامل. تشمل هذه العوامل اختلافات في مرحلة دورة الخلية ، وتوافر منظمات النمو الداخلية أو قدرتها على نقلها، والقدرات الأيضية للخلايا. تُعد الأطراف المرستيمية للنباتات، مثل قمة الساق، وقمة البرعم الإبطي، وقمة الجذر، من أكثر الأجزاء النباتية استخدامًا. [ 3 ] تتميز هذه الأنسجة بمعدلات انقسام خلوي عالية، وتُركز أو تُنتج مواد تنظيم النمو اللازمة، بما في ذلك الأوكسينات والسيتوكينينات.

تُعدّ كفاءة تجديد النموات في زراعة الأنسجة سمة كمية تتفاوت عادةً بين أنواع النباتات، وحتى داخل النوع الواحد بين الأنواع الفرعية والأصناف والسلالات والأنماط البيئية . لذا، قد يصبح تجديد الأنسجة عملية معقدة، خاصةً عند الحاجة إلى تطوير العديد من إجراءات التجديد لأنماط وراثية مختلفة ضمن النوع نفسه.

تتمثل المسارات الثلاثة الشائعة لتجديد زراعة الأنسجة النباتية في التكاثر من الأنسجة المرستيمية الموجودة مسبقًا (زراعة البراعم أو زراعة العقد)، وتكوين الأعضاء ، وتكوين الأجنة غير الزيجوتي .

تُجرى عملية إكثار الأفرع أو العُقد عادةً على أربع مراحل لإنتاج كميات كبيرة من الشتلات من خلال التكاثر الخضري في المختبر، إلا أن تكوين الأعضاء يُعدّ طريقةً قياسيةً للإكثار الدقيق، حيث يتضمن تجديد أنسجة الأعضاء العرضية أو البراعم الإبطية بشكل مباشر أو غير مباشر من الأجزاء النباتية المُستأصلة. ويُعدّ التكوين الجنيني غير الزيجوتي مسارًا نمائيًا جديرًا بالملاحظة، يُشابه إلى حد كبير مسار الأجنة الزيجوتية ، وهو مسار مهم لإنتاج المتغيرات الجسدية، وتطوير البذور الاصطناعية، وتخليق المستقلبات. ونظرًا لأصل الأجنة غير الزيجوتية من خلية واحدة، فإنها تُفضّل في العديد من أنظمة التجديد للإكثار الدقيق، والتلاعب بالصيغة الصبغية، ونقل الجينات، وإنتاج البذور الاصطناعية. ومع ذلك، فقد أثبت تجديد الأنسجة عبر تكوين الأعضاء فائدته أيضًا في دراسة الآليات التنظيمية لنمو النبات.

اختيار الزرع

يُطلق على النسيج الذي يتم الحصول عليه من النبات لزراعته اسم "القطعة النباتية المستأصلة".

يمكن أخذ أجزاء نباتية من أجزاء مختلفة من النبات، بما في ذلك أجزاء من البراعم والأوراق والسيقان والأزهار والجذور، وخلايا مفردة غير متمايزة ، ومن أنواع عديدة من الخلايا الناضجة شريطة أن تحتوي على سيتوبلازم ونوى حية، وأن تكون قادرة على إعادة التمايز واستئناف الانقسام الخلوي. وقد أدى ذلك إلى ظهور مفهوم القدرة الكلية للخلايا النباتية. [ 4 ] [ 5 ] ومع ذلك، لا ينطبق هذا على جميع الخلايا أو جميع النباتات. [ 6 ] ففي العديد من الأنواع، تختلف الأجزاء النباتية المأخوذة من أعضاء مختلفة في معدلات نموها وتجددها، بينما لا ينمو بعضها على الإطلاق. كما يحدد اختيار المادة النباتية ما إذا كانت الشتلات الناتجة عن زراعة الأنسجة أحادية الصيغة الصبغية أم ثنائية الصيغة الصبغية . بالإضافة إلى ذلك، يزداد خطر التلوث الميكروبي مع استخدام أجزاء نباتية غير مناسبة.

تُعدّ الطريقة الأولى، التي تعتمد على الخلايا المرستيمية وتحفيز نموّ براعم متعددة، الطريقة المُفضّلة في صناعة الإكثار الدقيق، نظرًا لانخفاض مخاطر التباين الجيني الناتج عن زراعة الأنسجة (التغيرات الوراثية المُستحثة في زراعة الأنسجة) مقارنةً بالطريقتين الأخريين. وتُعتبر عملية التكوين الجنيني الجسدي طريقةً ذات قدرة عالية على تحقيق معدلات تكاثر أعلى بعدة مرات، كما أنها قابلة للتطبيق في أنظمة الزراعة السائلة كالمفاعلات الحيوية.

بعض الأجزاء النباتية، كطرف الجذر ، يصعب عزلها، وتكون ملوثة بالكائنات الدقيقة الموجودة في التربة، مما يُسبب مشاكل أثناء عملية زراعة الأنسجة. تستطيع بعض هذه الكائنات الدقيقة تكوين ارتباطات وثيقة مع الجذور، أو حتى النمو داخلها . يصعب إزالة جزيئات التربة المرتبطة بالجذور دون إلحاق الضرر بها، مما يُتيح المجال لهجوم الكائنات الدقيقة. عادةً ما تتكاثر هذه الكائنات الدقيقة المرتبطة بالجذور بشكل مفرط في وسط زراعة الأنسجة قبل حدوث نمو ملحوظ في أنسجة النبات.

تتميز بعض الأنسجة المستنبتة ببطء نموها. ولحل هذه المشكلة، يتوفر خياران: (أ) تحسين بيئة الاستنبات؛ (ب) استنبات أنسجة أو أصناف ذات استجابة عالية. [ 7 ] قد يؤدي النخر إلى تلف الأنسجة المستنبتة. وبشكل عام، تختلف أصناف النباتات في مدى قابليتها للإصابة بنخر الأنسجة المستنبتة. لذا، يمكن التحكم في هذه المشكلة من خلال استنبات أصناف (أو أنسجة) ذات استجابة عالية. [ 7 ]

تُعدّ الأجزاء النباتية الهوائية (فوق سطح التربة) غنيةً أيضاً بالكائنات الدقيقة غير المرغوب فيها. ومع ذلك، يسهل إزالتها من الجزء النباتي عن طريق الشطف اللطيف، ويمكن عادةً القضاء على ما تبقى منها بتعقيم السطح. لا تُشكّل معظم الكائنات الدقيقة السطحية ارتباطات وثيقة مع أنسجة النبات . ويمكن عادةً اكتشاف هذه الارتباطات بالفحص البصري على شكل فسيفساء، أو بهتان في اللون، أو نخر موضعي على سطح الجزء النباتي.

يُعدّ أخذ أجزاء نباتية من شتلات مُنمّاة في ظروف معقمة من بذور مُعقّمة السطح بديلاً للحصول على أجزاء نباتية غير ملوثة. فسطح البذرة الصلب أقل نفاذية لاختراق مواد التعقيم السطحي القاسية، مثل هيبوكلوريت الصوديوم ، لذا فإن شروط التعقيم المقبولة للبذور قد تكون أكثر صرامة بكثير من تلك المُستخدمة للأنسجة النباتية.

النباتات المستزرعة نسيجياً هي نسخ طبق الأصل . إذا كانت النبتة الأم الأصلية المستخدمة لإنتاج الأجزاء النباتية الأولى عرضة لمسبب مرض أو ظرف بيئي معين، فسيكون المحصول بأكمله عرضة للمشكلة نفسها. في المقابل، ستبقى أي صفات إيجابية ضمن السلالة.

تطبيقات زراعة الأنسجة النباتية

تُستخدم زراعة الأنسجة النباتية على نطاق واسع في علوم النبات والغابات والبستنة. وتشمل تطبيقاتها ما يلي:

  • الإنتاج التجاري للنباتات المستخدمة في الزراعة في الأصص، وتنسيق الحدائق، وتنسيق الزهور، والذي يستخدم زراعة الأنسجة المرستيمية والبراعم لإنتاج أعداد كبيرة من الأفراد المتطابقة. [ 8 ]
  • للحفاظ على أنواع النباتات النادرة أو المهددة بالانقراض. [ 9 ] [ 10 ]
  • قد يستخدم مربي النباتات زراعة الأنسجة لفحص الخلايا بدلاً من النباتات بحثاً عن الصفات المفيدة، مثل مقاومة/تحمل مبيدات الأعشاب ، والكشف عن الكائنات الهجينة في مرحلة نمو مبكرة. [ 11 ]
  • النمو واسع النطاق للخلايا النباتية في مزارع سائلة في مفاعلات حيوية لإنتاج مركبات قيّمة، مثل المستقلبات الثانوية المشتقة من النباتات والبروتينات المؤتلفة المستخدمة كمستحضرات صيدلانية حيوية . [ 12 ]
  • تهجين الأنواع المتباعدة عن طريق دمج البروتوبلاست وتجديد الهجين الجديد .
  • لدراسة الأساس الجزيئي للآليات الفيزيولوجية والكيميائية الحيوية والتناسلية في النباتات بسرعة، على سبيل المثال الانتقاء المختبري للنباتات المقاومة للإجهاد. [ 13 ]
  • لتلقيح الأنواع المتباعدة ثم زراعة الأنسجة للجنين الناتج الذي كان سيموت في الأحوال العادية (إنقاذ الجنين).
  • لتحقيق مضاعفة الكروموسومات وتحفيز تعدد الصيغ الصبغية ، [ 14 ] على سبيل المثال، أحاديات الصيغة الصبغية المضاعفة، ورباعيات الصيغة الصبغية ، وأشكال أخرى من تعدد الصيغ الصبغية . ويتم ذلك عادةً باستخدام عوامل مضادة للانقسام الخلوي مثل الكولشيسين أو الأوريزالين .
  • كنسيج للتحويل، يتبعه إما اختبار قصير المدى للتركيبات الجينية أو تجديد النباتات المعدلة وراثيًا .
  • يمكن استخدام تقنيات معينة مثل زراعة قمة المرستيم لإنتاج مواد نباتية نظيفة من مخزون مصاب بالفيروسات، مثل قصب السكر، [ 15 ] البطاطس والعديد من أنواع الفاكهة اللينة.
  • يمكن الحصول على إنتاج أنواع هجينة عقيمة متطابقة.
  • إنتاج واسع النطاق للبذور الاصطناعية من خلال التكوين الجنيني الجسدي [ 16 ] [ 17 ]

أمثلة

تطوير التباين الجسدي

نباتمتغير سوموكلونالسمات
قصب السكرأونومقاومة مرض فيجي.
سيترونيلا جافا"بيو-13" (من إنتاج CIMAP، لكناو)37% زيت أكثر

القدرة على التكيف مع تغير المناخ

- كما هو الحال في كافيري فامان (من قبل المركز الوطني لبحوث الموز، تاميل نادو)، وهو نوع من الموز المتحور بتقنية زراعة الأنسجة لتحمل الأمطار الغزيرة. [ 18 ]

إنتاج المستقلبات الثانوية

- مثل الكافيين من نبات البن العربي ، والنيكوتين من نبات التبغ الريفي، أو الأحماض الفينولية من نبات الإشنسا الأرجوانية . [ 19 ]

تحفيز الإزهار

- في الأشجار التي تتأخر في الإزهار أو الخيزران - حيث تزهر بعض الأنواع مرة واحدة في حياتها ولكنها قد تعيش لأكثر من 50 عامًا. [ 20 ]

انظر أيضاً

مراجع

ملحوظات

  1. ↑ ساتيانارايانا، بي إن (2007). زراعة الأنسجة النباتية: الممارسات والبروتوكولات التجريبية الجديدة . آي كي إنترناشونال. ص  106–. ISBN 978-81-89866-11-2.
  2. ↑ بهوجواني، إس إس؛ رازدا، إم كيه (1996). زراعة الأنسجة النباتية: النظرية والتطبيق ( طبعة منقحة). إلسيفير. ISBN  978-0-444-81623-8.
  3. ^ ساركار، سنهاسيش؛ روي، سوري؛ غوش، سوديب ك.؛ باسو، أسيتافا (1 أبريل 2019). "تطبيق التفرع الجانبي للتغلب على عناد التجديد في المختبر للبازلاء الهندية المصابة بالبكتيريا الزراعية (Cajanus cajan L.)" . زراعة الخلايا النباتية والأنسجة والأعضاء . 137 (1): 23-32 . دوى : 10.1007 / s11240-018-01547-6 . ردمك 1573-5044 . 
  4. ↑ فاسيل، إي كيه؛ فاسيل، في. (1972). "القدرة على التمايز إلى أي نوع من الخلايا وتكوين الأجنة في مزارع الخلايا والأنسجة النباتية". في المختبر . 8 (3): 117-125 . doi : 10.1007/BF02619487 . PMID 4568172. S2CID 20181898 .  
  5. ↑ برايان جيمس أتويل؛ كولين جي إن تورنبول؛ بول إي كريدمان (1999). النباتات في العمل: التكيف في الطبيعة، والأداء في الزراعة ( الطبعة الأولى). مؤرشف من الأصل في 27 مارس 2018. تم الاطلاع عليه في 7 مايو 2020 . 
  6. ↑ إندرا ك. فاسيل؛ تريفور أ. ثورب (1994). زراعة الخلايا والأنسجة النباتية . سبرينغر. ص 4–. ISBN  978-0-7923-2493-5.
  7. 1 2 بازوكي، أرمان وسوهاني، مهدي (2013). "التقييم الظاهري للكالس المشتق من السويقة في أصناف أرز 'إنديكا'" (ملف PDF) . مجلة أكتا أغريكولتورا سلوفينيكا . 101 (2): 239-247 . doi : 10.2478/acas-2013-0020 .
  8. ↑ ليما-رومينسكا ج.، كولوس د.، 2014. الإكثار الدقيق للصبار - مراجعة. هاسيلتونيا 19: 46-63
  9. ↑ موكوند ر. شوكلا؛ أ. ماكسويل ب. جونز؛ ج. آلان سوليفان؛ تشونتشاو ليو؛ سوزان جوسلينج؛ برافين ك. ساكسينا (أبريل 2012). "الحفظ المختبري للدردار الأمريكي ( Ulmus americana ): الدور المحتمل لعملية استقلاب الأوكسين في تكاثر النبات المستدام". المجلة الكندية لأبحاث الغابات . 42 (4): 686-697 . doi : 10.1139/x2012-022 .
  10. ↑ كولوس د.، أبراتوفسكا أ.، 2017. الحفظ بالتبريد لـ Ajania pacifica (ناكاي) بريمر وهمفريز باستخدام تقنية التغليف والتجفيف. CryoLetters 38(5): 387-398(12)
  11. ↑ ميلر ن.، كولوس د.، سليوينسكا إ.، 2020. محتوى الحمض النووي النووي كمؤشر على ثبات لون النورة في طفرات الأقحوان الصلبة والكيميرا المُستزرعة في المختبر. زراعة خلايا وأنسجة وأعضاء النبات 143: 421-430. https://doi.org/10.1007/s11240-020-01929-9
  12. ↑ جورجيف، ميلين آي؛ ويبر، جوست؛ ماك إيوك، ألكسندر (2009). "المعالجة الحيوية لمزارع الخلايا النباتية للإنتاج المكثف للمركبات المستهدفة". علم الأحياء الدقيقة التطبيقي والتكنولوجيا الحيوية . 83 (5): 809-23 . doi : 10.1007/s00253-009-2049-x . PMID 19488748. S2CID 30677496 .  
  13. ↑ مانوج ك. راي؛ راجوانت ك. كاليا؛ روهتاس سينغ؛ مانو ب. غانغولا؛ أ. ك. داوان (أبريل 2011). "تطوير نباتات مقاومة للإجهاد من خلال الانتقاء في المختبر - نظرة عامة على التقدم الأخير". علم النبات البيئي والتجريبي . 71 (1): 89-98 . doi : 10.1016/j.envexpbot.2010.10.021 .
  14. ↑ آينا، أو؛ كويسنبيري، ك؛ غالو، م (2012). "الحث المختبري للرباعيات الصبغية في نبات الفول السوداني (Arachis paraguariensis )". زراعة الخلايا والأنسجة والأعضاء النباتية . 111 (2): 231-238 . doi : 10.1007/s11240-012-0191-0 . S2CID 9211804 . 
  15. ↑ باوار، كيه آر، واغمار، إس جي، تابي، آر، باتيل، إيه، وأمبافان، إيه آر 2017. التجديد المختبري لقصب السكر (Saccharum officinarum var. Co 92005) باستخدام جزء من قمة الساق . المجلة الدولية للعلوم والطبيعة 8(1): 154-157.
  16. ↑ واغمار، إس جي، باوار، كيه آر، وتابي، آر. 2017. التكوين الجنيني الجسدي في الفراولة (Fragaria ananassa) var. Camarosa . المجلة العالمية لعلوم الأحياء والتكنولوجيا الحيوية 6(2): 309 - 313.
  17. ↑ كولوس د.، 2019. تطبيق البذور الاصطناعية في إكثار وتخزين وحفظ أنواع نباتات الفصيلة النجمية بالتبريد، [في:] البذور الاصطناعية: تجديد البلازما الجرثومية وحفظها وآفاقها، تحرير فيصل أ.، العطار أ.، سبرينغر ساينس آند بيزنس ميديا، هولندا، ص 155-179. ISBN 978-3-030-24630-3، ISBN 978-3-030-24631-0 (كتاب إلكتروني)، https://doi.org/10.1007/978-3-030-24631-0_6
  18. ↑ مكتب، صحيفة ذا هندو (21 أغسطس 2023). "تيروتشي" . صحيفة ذا هندو . الرقم الدولي الموحد للدوريات 0971-751X . تاريخ الاسترجاع 31 أغسطس 2023 . {{cite news}}له |last=اسم عام ( مساعدة )
  19. ↑ ليما-رومينسكا ج.، كولوس د.، تيموسزوك أ.، فاريجاو ج.م.ت.ب.، باهتشيفاندزييف ك.، 2019. لمحة عن المستقلبات الثانوية وتحليل الاستقرار الوراثي في ​​سلالات جديدة من نبات إشنسا بوربوريا (ل.) مونش المُكاثرة دقيقًا عبر التكوين الجنيني الجسدي. المحاصيل الصناعية والمنتجات 142: 111851. https://doi.org/10.1016/j.indcrop.2019.111851
  20. ↑ سريفاستافا، س.؛ نارولا، أ. (16 يناير 2006). التكنولوجيا الحيوية النباتية والمؤشرات الجزيئية . سبرينغر ساينس آند بيزنس ميديا. ISBN 978-1-4020-3213-4.

مصادر

  • جورج، إدوين ف.؛ هول، مايكل أ.؛ دي كليرك، جيرت-يان، محرران. (2008). إكثار النباتات عن طريق زراعة الأنسجة . المجلد  1. الخلفية (  الطبعة الثالثة). سبرينغر. ISBN 978-1-4020-5004-6.
  • ياداف، ر.؛ أرورا، ب.؛ كومار، د.؛ كاتيال، د.؛ ديلباغي، ن.؛ تشودري، أ. (2009). "التجديد المباشر عالي التردد للنباتات من أجزاء الأوراق والعقد والجذور لشجرة الحور الشرقي ( Populus deltoides )". تقارير التكنولوجيا الحيوية النباتية . 3 (3): 175-182 . doi : 10.1007/s11816-009-0088-5 . S2CID 42796629 . 
  • سينغ، إس كيه؛ سريفاستافا، إس. (2006). زراعة الأنسجة النباتية . كامبس بوك إنترناشونال. ISBN 978-81-8030-123-0.