علامة البروتين

📅 آخر تحديث: ٤ أغسطس ٢٠٢٦
✍️ نُشر في: ٤ أغسطس ٢٠٢٦
الموسوعة الحرة

تُعدّ علامات البروتين عبارة عن تسلسلات ببتيدية تُضاف وراثيًا إلى بروتين مُعاد التركيب . تُضاف هذه العلامات إلى البروتينات لأغراض متنوعة. يمكن إضافتها إلى أي من طرفي البروتين المستهدف، لذا فهي إما خاصة بالطرف الكربوكسيلي (C-terminus) أو الطرف الأميني (N-terminus)، أو خاصة بكليهما. كما تُضاف بعض العلامات إلى مواقع داخل البروتين نفسه، وتُعرف هذه العلامات بالعلامات الداخلية. [ 1 ]

تُضاف علامات التقارب إلى البروتينات لتسهيل تنقيتها من مصدرها البيولوجي الخام باستخدام تقنية التقارب. تشمل علامات التقارب بروتين ربط الكيتين (CBP)، وبروتين ربط المالتوز (MBP)، وعلامة Strep-tag [ 2 ] ، وإنزيم ناقل الغلوتاثيون-S (GST). تُعد علامة poly(His) علامة بروتينية شائعة الاستخدام، حيث ترتبط بمصفوفات تحمل أيونات معدنية مثبتة.

تُستخدم علامات الذوبان، خاصةً للبروتينات المُعاد تركيبها والمُعبَّر عنها في أنواع مثل الإشريكية القولونية ، للمساعدة في طي البروتينات بشكل صحيح ومنعها من التكتل في أجسام التضمين . تشمل هذه العلامات الثيوريدوكسين (TRX) وبولي (NANP). بعض علامات التقارب لها دور مزدوج كعامل ذوبان، مثل MBP وGST.

تُستخدم علامات الكروماتوغرافيا لتغيير الخصائص الكروماتوغرافية للبروتين، مما يُتيح دقة فصل مختلفة عبر تقنية فصل مُحددة. غالبًا ما تتكون هذه العلامات من أحماض أمينية متعددة الأنيونات، مثل علامة FLAG أو علامة متعدد الغلوتامات. [ 3 ]

علامات الإبيتوب هي تسلسلات ببتيدية قصيرة تُختار لأن الأجسام المضادة عالية الألفة يمكن إنتاجها بشكل موثوق في العديد من الأنواع المختلفة. تُشتق هذه العلامات عادةً من جينات فيروسية، مما يفسر تفاعلها المناعي العالي. تشمل علامات الإبيتوب ALFA-tag و V5-tag و Myc-tag و HA-tag و Spot-tag و T7-tag و NE-tag . تُعد هذه العلامات مفيدة بشكل خاص في تجارب التلطيخ الغربي ، والتألق المناعي، والترسيب المناعي ، على الرغم من استخدامها أيضًا في تنقية الأجسام المضادة. وُصفت علامات الإبيتوب لأول مرة عام 1984 من قِبل مونرو وبيلهام للكشف عن البروتينات وتتبعها في خلايا COS [ 4 ] [ 5 ] [ 6 ] ، وسرعان ما تم تكييفها لتتبع البروتينات في بويضات الضفدع الأفريقي [ 7 ] ؛ وللكشف عن البروتينات وتنقيتها مناعيًا من الخميرة والإشريكية القولونية [ 8 ] . وللكشف عن شركاء التفاعل للروابط في خلايا الثدييات، واستخلاصهم، واستنساخهم [ 9 ] [ 10 ] . في البداية، كانت هذه العلامات تُعرف باسم "علامة الببتيد" [ 11 ] ، و"إدخال الإبيتوب" [ 12 ] ، و"تسلسل العلامة" [ 13 ] ، و"إضافة الإبيتوب"، إلى أن تم صياغة مصطلح "علامة الإبيتوب" [ 14 ] وشاع استخدامه.

تُستخدم علامات التألق الضوئي لإعطاء قراءة مرئية للبروتين. يُعد البروتين الفلوري الأخضر (GFP) ومتغيراته من أكثر علامات التألق الضوئي شيوعًا. [ 15 ] تشمل التطبيقات الأكثر تقدمًا للبروتين الفلوري الأخضر استخدامه كمؤشر لطي البروتين (يتألق إذا كان مطويًا، ويكون عديم اللون إذا لم يكن كذلك).

قد تسمح علامات البروتين بإجراء تعديلات إنزيمية محددة (مثل إضافة البيوتين بواسطة إنزيم البيوتين ليغاز) أو تعديلات كيميائية (مثل ربطها ببروتينات أخرى عبر SpyCatcher أو تفاعلها مع FlAsH-EDT2 للتصوير الفلوري). غالبًا ما تُدمج العلامات لربط البروتينات بمكونات أخرى متعددة. مع ذلك، يُصاحب إضافة كل علامة خطر تأثر الوظيفة الأصلية للبروتين بتفاعلاتها معها. لذا، بعد التنقية، تُزال العلامات أحيانًا بواسطة تحلل بروتيني محدد (مثلًا بواسطة بروتياز TEV ، أو ثرومبين ، أو العامل Xa ، أو إنتيروبيبتيداز ) أو عن طريق وصل الإنتين .

قائمة علامات البروتين

(انظر الأحماض الأمينية البروتينية#الخصائص الكيميائية لرموز الأحماض الأمينية AZ)

علامات الببتيد

تُعرف العلامات القصيرة على البروتينات باسم "علامات الإبيتوب". وتندرج العلامات المذكورة في هذه القائمة ضمن هذه الفئة. "وسم الإبيتوب" هو عملية إضافة ببتيد قصير إلى البروتين بحيث يمكن الكشف عنه باستخدام جسم مضاد متخصص بهذا الببتيد (الإبيتوب).

  • علامة ALFA-tag، وهي علامة ببتيدية حلزونية مصممة حديثًا (SRLEEELRRRLTE) للتطبيقات البيوكيميائية والمجهرية. يتم التعرف على هذه العلامة بواسطة مجموعة من الأجسام المضادة أحادية النطاق [ 16 ].
  • AviTag، وهو ببتيد يسمح بالبيوتين بواسطة إنزيم BirA وبالتالي يمكن عزل البروتين بواسطة ستربتأفيدين (GLNDIFEAQKIEWHE)
  • EPEA-tag، المعروف تجارياً باسم CaptureSelect C-tag، هو ببتيد مكون من 4 أحماض أمينية يتم التعرف عليه بواسطة جسم مضاد من نوع VHH أو جسم مضاد أحادي المجال من الإبل تم اكتشافه من خلال عرض العاثيات (EPEA) [ 17 ] [ 18 ]
  • Calmodulin-tag ، وهو ببتيد يرتبط ببروتين الكالمودولين (KRRWKKNFIAVSAANRFKKISSSGAL)
  • iCapTag ™ ( علامة التقاط الإنتين ) ، هي علامة ببتيدية ذاتية الإزالة (MIKIATRKYLGKQNVYGIGVERDHNFALKNGFIAHN). يتم التحكم في iCapTag ™ عن طريق تغيير الرقم الهيدروجيني. عادةً ما يحدث تغيير الرقم الهيدروجيني من 8.5 إلى 6.2، مما يؤدي إلى إطلاق البروتين المستهدف غير الموسوم إلى المذيب. عند الحاجة، يمكن تحسين تغيير الرقم الهيدروجيني والمحاليل المنظمة لطريقة تنقية خاصة بالبروتين (على سبيل المثال، بالنسبة للبروتينات الغشائية، يمكن إضافة منظف إلى المحاليل المنظمة لزيادة ذوبان البروتين). [ 19 ] على عكس طرق تنقية البروتين الأخرى، لا تعتمد هذه الطريقة على البروتيازات لفصل العلامة عن معقد البروتين-العلامة. بدلاً من ذلك، أثناء مرحلة الإذابة، ومع تغيير الرقم الهيدروجيني للمحلول المنظم من 8.5 إلى 6.2، يحدث تفاعل فصل ينتج عنه إطلاق البروتين المستهدف غير الموسوم، بينما تبقى العلامة المصممة هندسيًا ملتصقة بالعمود. تتراوح نقاوة البروتينات أو الببتيدات المستهدفة غير الموسومة بين 95 و99%. يحتوي iCapTag ™ على مكون حاصل على براءة اختراع مشتق من إنتين نوستوك بونكتيفورم (Npu) . يُستخدم هذا الوسم لتنقية البروتينات، بما في ذلك الببتيدات، وشظايا الأجسام المضادة وحيدة النسيلة ، والبروتينات المؤتلفة وشظاياها. يمكن استخدامه في المختبرات البحثية، وهو مُصمم أيضًا للتنقية على نطاق واسع خلال عمليات التصنيع اللاحقة. يمكن التعبير عن مُركب iCapTag ™-البروتين المستهدف في مجموعة واسعة من الخلايا المُضيفة ( مثل خلايا CHO وخلايا الإشريكية القولونية ) [ 20 ] [ 21 ] [ 22 ].
  • علامة البوليغلوتامات، وهي ببتيد يرتبط بكفاءة براتنج التبادل الأنيوني مثل Mono-Q (EEEEEE) [ 3 ]
  • علامة بولي أرجينين، وهي ببتيد يرتبط بكفاءة براتنج التبادل الكاتيوني (من 5 إلى 9 R متتالية)
  • علامة E، وهي ببتيد يتعرف عليه الجسم المضاد (GAPVPYPDPLEPR)
  • FLAG-tag ، وهو ببتيد يتعرف عليه الجسم المضاد (DYKDDDDK) [ 23 ]
  • HA-tag ، وهو ببتيد من الهيماغلوتينين يتم التعرف عليه بواسطة جسم مضاد (YPYDVPDYA) [ 24 ]
  • His-tag ، 5-10 هيستيدين مرتبطة بمخلب النيكل أو الكوبالت (HHHHHH)
    • علامات Gly-His هي متغيرات His-Tag الطرفية N (مثل GHHHH أو GHHHHHH أو GSSHHHHHH) التي لا تزال ترتبط بالكاتيونات المعدنية المثبتة ولكن يمكن أيضًا تنشيطها عن طريق أزيدوغلوكونويل لتمكين تطبيقات الكيمياء النقرية [ 25 ].
  • Myc-tag ، وهو ببتيد مشتق من c- myc يتم التعرف عليه بواسطة جسم مضاد (EQKLISEEDL)
  • NE-tag ، وهو ببتيد اصطناعي مكون من 18 حمض أميني (TKENPRSNQEESYDDNES) يتم التعرف عليه بواسطة جسم مضاد أحادي النسيلة IgG1، وهو مفيد في مجموعة واسعة من التطبيقات بما في ذلك Western blotting و ELISA و flow cytometry و immunocytochemistry و immunoprecipitation و affinity purification of recombination proteins [ 26 ].
  • يشير مصطلح Rho1D4-tag إلى الأحماض الأمينية التسعة الأخيرة من الطرف الكربوكسيلي الداخلي لبروتين الرودوبسين البقري (TETSQVAPA). وهو علامة نوعية للغاية يمكن استخدامها لتنقية البروتينات الغشائية .
  • S-tag ، وهو ببتيد مشتق من الريبونوكلياز A (KETAAAKFERQHMDS)
  • SBP-tag ، وهو ببتيد يرتبط بالستربتافيدين (MDEKTTGWRGGHVVEGLAGELEQLRARLEHHPQGQREP) [ 27 ]
  • Softag 1 ، للتعبير في الثدييات (SLAELLNAGLGGS)
  • Softag 3 ، للتعبير في بدائيات النوى (TQDPSRVG)
  • Spot-tag ، وهو ببتيد يتعرف عليه جسم نانوي (PDRVRAVSHWSS) للترسيب المناعي، والتنقية بالتقارب، والتألق المناعي، والمجهر فائق الدقة
  • Strep-tag ، وهو ببتيد يرتبط بالستربتافيدين أو الستربتافيدين المعدل المسمى ستربتاكتين (Strep-tag II: WSHPQFEK) [ 2 ]
  • علامة T7 ، وهي علامة مستضدية مشتقة من البروتين الرئيسي لغلاف فيروس T7 (MASMTGGQQMG). تُستخدم في مختلف المقايسات المناعية بالإضافة إلى تنقية الألفة . [ 28 ]
  • علامة TC ، وهي علامة رباعية السيستين التي تتعرف عليها مركبات الزرنيخ الثنائية FlAsH و ReAsH (CCPGCC).
  • Ty tag (EVHTNQDPLD)
  • V5 tag ، وهو ببتيد يتم التعرف عليه بواسطة جسم مضاد (GKPIPNPLLGLDST) [ 29 ]
  • VSV-tag، وهو ببتيد يتعرف عليه الجسم المضاد (YTDIEMNRLGK)
  • علامة إكسبريس (DLYDDDDK)، وهو ببتيد يتعرف عليه الجسم المضاد

علامات الببتيد التساهمية

  • Isopeptag ، وهو ببتيد يرتبط تساهميًا ببروتين pilin-C (TDKDMTITFTNKKDAE) [ 30 ]
  • SpyTag ، وهو ببتيد يرتبط تساهميًا ببروتين SpyCatcher (AHIVMVDAYKPTK) [ 31 ]
  • SnoopTag ، وهو ببتيد يرتبط تساهميًا ببروتين SnoopCatcher (KLGDIEFIKVNK). [ 32 ] كما تم تطوير جيل ثانٍ، SnoopTagJr، للارتباط إما بـ SnoopCatcher أو DogTag (بوساطة SnoopLigase) (KLGSIEFIKVNK) [ 33 ].
  • DogTag هو ببتيد يرتبط تساهميًا بـ DogCatcher (DIPATYEFTDGKHYITNEPIPPK) ويمكنه التفاعل كعلامة داخلية في حلقات البروتينات. [ 34 ] كما يمكن لـ DogTag الارتباط تساهميًا بـ SnoopTagJr، بوساطة SnoopLigase. [ 33 ]
  • SdyTag، وهو ببتيد يرتبط تساهميًا ببروتين SdyCatcher (DPIVMIDNDKPIT). [ 35 ] يُظهر SdyTag/SdyCatcher تفاعلًا متقاطعًا يعتمد على الحركية مع SpyTag/SpyCatcher.

علامات البروتين

آحرون

طُوِّرَت علامة HiBiT بواسطة علماء في شركة بروميج . وهي عبارة عن علامة ببتيدية مكونة من 11 حمضًا أمينيًا، ويمكن دمجها مع الطرف الأميني أو الكربوكسيلي أو مواقع داخلية في البروتينات. [ 41 ] ويؤدي صغر حجمها إلى إدخالها بسرعة في بروتينات أخرى باستخدام تقنية CRISPR/Cas9. [ 41 ]

التطبيقات

مراجع

  1. ↑ محمودي جوماري، محمد؛ سرايجورد أفشاري، ندى؛ فارسيمادان، مرضية؛ رستمي، ندى؛ أغاميري، شاهين؛ فرج اللهي، محمد م. (ديسمبر 2020). "فرص وتحديات تقنيات تنقية البروتين بمساعدة الوسم: تطبيقات في صناعة الأدوية" . Biotechnology Advances . 45 107653. doi : 10.1016/j.biotechadv.2020.107653 . ISSN 0734-9750 . PMID 33157154. S2CID 226276355 .   
  2. 1 2 شميدت، توماس جي إم؛ كوبكه، يورغن؛ فرانك، رونالد؛ سكيرا، آرني (1996). "التفاعل الجزيئي بين ببتيد التقارب ستريب-تاغ وهدفه المتوافق، ستربتأفيدين". مجلة البيولوجيا الجزيئية . 255 (5): 753-766 . doi : 10.1006/jmbi.1996.0061 . PMID 8636976 . 
  3. 1 2 فيرهيد إم، كرنديجا دي، لوي إي دي، هاوارث إم (يناير 2014). "الاقتران الفوري عبر ستربتأفيدين ثنائي التكافؤ محدد" . مجلة البيولوجيا الجزيئية . 426 (1): 199-214 . doi : 10.1016/j.jmb.2013.09.016 . PMC 4047826. PMID 24056174 .  
  4. ↑ مونرو إس، بيلهام إتش آر (1984). " استخدام وسم الببتيد للكشف عن البروتينات المُعبر عنها من الجينات المستنسخة: تحديد نطاقات الحذف الوظيفية لبروتين الصدمة الحرارية 70 في ذبابة الفاكهة". مجلة EMBO . 3 (13): 3087-3093 . doi : 10.1002/j.1460-2075.1984.tb02263.x
  5. ↑ مونرو إس، بيلهام إتش آر (1987). "إشارة طرفية كربونية تمنع إفراز بروتينات الشبكة الإندوبلازمية اللمعية". الخلية . 48 (5): 899-907 . doi : 10.1016/0092-8674(87)90086-9 .
  6. ↑ مونرو إس، بيلهام إتش آر (1986). "بروتين شبيه بـ hsp70 في الشبكة الإندوبلازمية: تطابقه مع البروتين المنظم للجلوكوز بوزن 78 كيلو دالتون وبروتين ربط السلسلة الثقيلة للغلوبولين المناعي". الخلية . 46 (2): 291-300 . doi : 10.1016/0092-8674(86)90746-4 .
  7. ↑ ماكماهون إيه بي، مون آر تي (1989). "التعبير غير الطبيعي عن الجين الأولي المسرطن int-1 في أجنة الضفدع الأفريقي يؤدي إلى تضاعف المحور الجنيني". الخلية . 58 (6): 1075-1084 . doi : 10.1016/0092-8674(89)90506-0 .
  8. ↑ هوب تي بي، بريكيت كيه إس، برايس في إل (1988). "تسلسل ببتيدي قصير مفيد لتحديد وتنقية البروتينات المؤتلفة". التكنولوجيا الحيوية . 6 (10): 1204-1210 . doi : 10.1038/nbt1088-1204 .
  9. ↑ سكوينتو إس بي، ألدريتش تي إتش، ليندسي آر إم، وآخرون (1990). "تحديد المستقبلات الوظيفية لعامل التغذية العصبية الهدبي على خطوط الخلايا العصبية والخلايا العصبية الأولية". نيرون . 5 (6): 757-766 . doi : 10.1016/0896-6273(90)90334-c . PMID 2176509 .  
  10. ↑ ديفيس إس، ألدريتش تي إتش، فالينزويلا دي إم، وآخرون (1991). "مستقبل عامل التغذية العصبية الهدبي". مجلة ساينس . 253 (5015): 59-63 . doi : 10.1126/science.1648265 . PMID 1648265 .  
  11. ↑ مونرو إس، بيلهام إتش آر (1984). " استخدام وسم الببتيد للكشف عن البروتينات المُعبر عنها من الجينات المستنسخة: تحديد نطاقات الحذف الوظيفية لبروتين الصدمة الحرارية 70 في ذبابة الفاكهة". مجلة EMBO . 3 (13): 3087-3093 . doi : 10.1002/j.1460-2075.1984.tb02263.x
  12. ↑ ماكماهون إيه بي، مون آر تي (1989). "التعبير غير الطبيعي عن الجين الأولي المسرطن int-1 في أجنة الضفدع الأفريقي يؤدي إلى تضاعف المحور الجنيني". الخلية . 58 (6): 1075-1084 . doi : 10.1016/0092-8674(89)90506-0 .
  13. ↑ هوب تي بي، بريكيت كيه إس، برايس في إل (1988). "تسلسل ببتيدي قصير مفيد لتحديد وتنقية البروتينات المؤتلفة". التكنولوجيا الحيوية . 6 (10): 1204-1210 . doi : 10.1038/nbt1088-1204 .
  14. ↑ سكوينتو إس بي، ألدريتش تي إتش، ليندسي آر إم (1990). "تحديد المستقبلات الوظيفية لعامل التغذية العصبية الهدبي على خطوط الخلايا العصبية والخلايا العصبية الأولية". نيرون . 5 (6): 757-766 . doi : 10.1016/0896-6273(90)90334-c .
  15. 1 2 تشانغ، جين؛ كامبل، روبرت؛ تينغ، أليس؛ تسين، روجر (2002). "ابتكار مجسات فلورية جديدة لعلم الأحياء الخلوي". نات ريف مول سيل بيول . 3 (12): 906-918 . doi : 10.1038/nrm976 . PMID 12461557. S2CID 11588100 .  
  16. ^ جوتزكي، هانسيورج. كيليش، ماركوس؛ مارتينيز كارانزا، ماركيل؛ سغرات الإدريسي، شامة؛ راجافيل، أبيرامي؛ شليشثارل، توماس. إنجلز، نيكلاس؛ جونجمان، رالف. ستينمارك، بال؛ أوبازو، فيليبي؛ فراي ، ستيفن (2019). "إن علامة ALFA هي أداة متعددة الاستخدامات لتطبيقات العلوم الحيوية القائمة على الأجسام النانوية" . اتصالات الطبيعة . 10 (1): 4403. بيب كود : 2019NatCo..10.4403G . دوى : 10.1038/s41467-019-12301-7 . بمك 6764986 . بميد 31562305 .  
  17. ^ دي جينست، إروين ج. جويليامز، تيم؛ ويلينز، نكتة؛ أوداي، إليزابيث م. وادبي، كريستوفر أ؛ ميهان، سارة؛ دومولين، ميراي؛ هسو، شانغ تي داني؛ كريماديس، نونيلو؛ فيرشويرين ، كوين هـ. عفوا إلس. وينز، لود؛ ستيارت، يناير؛ كريستودولو، جون. دوبسون ، كريستوفر م. (سبتمبر 2010). "بنية وخصائص مجمع α-Synuclein والجسم المضاد الجملي أحادي المجال" (PDF) . مجلة البيولوجيا الجزيئية . 402 (2): 326-343 . دوى : 10.1016/j.jmb.2010.07.001 . اتش دي ال : 2268/75044 . PMID 20620148 . 
  18. ↑ "مصفوفة تقارب علامة C-tag من CaptureSelect - Thermo Fisher Scientific" . www.thermofisher.com .
  19. ↑ غونزاليس-سيرانو، ميلتون س.؛ تشين، شوهان؛ فريدمان، أليسيا ك.؛ كاينز، ويل؛ بيرس، ماسون؛ ماغليري، توماس ج.؛ وود، ديفيد و. (2025). "طريقة تنقية جديدة ذاتية الانقسام بالتقارب لإنزيم باراوكسوناز-1 المؤتلف المرتبط بالغشاء الخلوي (rePON1)". مجلة البروتين . 44 : 341-350 . doi : 10.1007/s10930-025-10271-y .
  20. ↑ كوبر، ميريديث أ.؛ تاريس، جوزيف إي.؛ شي، تشانغوا؛ وود، ديفيد و. (2018). " طريقة ملائمة لتنقية البروتينات المستهدفة غير الموسومة باستخدام علامة الإنتين المنقسمة" . البروتوكولات الحالية في علم البروتين . 91 (1): 5.29.1–5.29.23. doi : 10.1002/cpps.46 . ISSN 1934-3655 . PMID 29516483. S2CID 3749506 .   
  21. ↑ برابالا، ساي فيفيك؛ جيراش، إيزابيلا؛ وود، ديفيد دبليو. (2022). "تطور طرق التقارب القائمة على الإنتين كما ينعكس في 30 عامًا من تاريخ براءات الاختراع" . مجلة فرونتيرز في العلوم البيولوجية الجزيئية . 9 857566. doi : 10.3389/fmolb.2022.857566 . ISSN 2296-889X . PMC 9033041. PMID 35463948 .   
  22. ↑ " تقنية iCapTag ™ - علم التقاط البروتين " . www.proteincapturescience.com
  23. ↑ أينهاور، أ.؛ يونغباور، أ. (2001). "ببتيد FLAG™، علامة اندماج متعددة الاستخدامات لتنقية البروتينات المؤتلفة". مجلة الأساليب البيوكيميائية والبيوفيزيائية . 49 ( 1-3 ): 455-465 . doi : 10.1016/S0165-022X(01)00213-5 . PMID 11694294 . 
  24. ↑ براكريا، مورالي؛ فيسكي، ستيفان؛ غواك، يوسانغ؛ سريكانث، سونال؛ راو، أنجانا؛ هوغان، باتريك ج. (2006). "Orai1 وحدة فرعية أساسية لمسام قناة CRAC". Nature . 443 ( 7108): 230–3 . Bibcode : 2006Natur.443..230P . doi : 10.1038/nature05122 . PMID 16921383. S2CID 4310221 .  
  25. ^ برون ، كارل د. ليكنيتا، إيلفا؛ سوتوف، غريغوريج؛ موريس، الكسندر ر. يوفيتشيفيتش، ديجانا؛ كالنيش، جينتس؛ كازاكس، أندريس؛ كلوجا، ريهاردز؛ كاستاليجانا، سابين؛ زاجاكينا، آنا؛ يانسونز، جوريس. سكراستيا، دايس؛ سبوند، كارينا؛ كوهين، الكسندر أ. بيوركمان، باميلا J.؛ موريس، هوارد ر. سونا، إدغارز؛ تارس ، كاسبارس (2021-11-16). "تعديل N-Terminal للبروتينات Gly-His الموسومة مع Azidogluconolactone" . كيمبيوكيم . 22 (22): 3199–3207 . دوى : 10.1002/cbic.202100381 . ISSN 1439-7633 . PMID 34520613. S2CID 237515136 .​   
  26. ↑ هو، فيليب دبليو إل؛ تسيه، زيرو إتش إم؛ ليو، إتش إف؛ لو، إس؛ هو، جيسيكا دبليو إم؛ كونغ، ميشيل إتش دبليو؛ رامسدن، ديفيد بي؛ هو، إس إل. (2013). "تقييم النشاط الإستروجيني الخلوي بناءً على تقليل التعبير عن إنزيم ناقل ميثيل الكاتيكول-أو (COMT) القابل للذوبان بواسطة مستقبلات الإستروجين في نظام قائم على مقايسة الامتصاص المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA)" . PLOS ONE . 8 (9) e74065. Bibcode : 2013PLoSO...874065H . doi : 10.1371/journal.pone.0074065 . PMC 3765251. PMID 24040167 .  
  27. ↑ كيف، أنتوني د.؛ ويلسون، ديفيد س.؛ سيليغ، بوركهارد؛ زوستاك، جاك و. (2001). "تنقية البروتينات المؤتلفة بخطوة واحدة باستخدام ببتيد رابط للستربتافيدين ذي ألفة نانومولية، وهو علامة SBP". التعبير عن البروتين وتنقيته . 23 (3): 440-446 . doi : 10.1006/prep.2001.1515 . PMID 11722181 . 
  28. ↑ " علامات الإبيتوب والبروتينات الاندماجية - الأجسام المضادة على الإنترنت" . www.antibodies-online.com
  29. ↑ ماكنوت، ماركي سي؛ لاغاس، توماس أ؛ هورتون، جاي دي (2007). "النشاط التحفيزي غير ضروري لكي يُقلل PCSK9 المُفرز من مستقبلات البروتين الدهني منخفض الكثافة في خلايا HepG2" . مجلة الكيمياء البيولوجية . 282 (29): 20799-803 . doi : 10.1074/jbc.C700095200 . PMID 17537735 . 
  30. ↑ زاكري، بيجان؛ هاوارث، مارك (2010). "تكوين رابطة أميد جزيئية تلقائية بين السلاسل الجانبية لاستهداف الببتيدات بشكل غير قابل للانعكاس". مجلة الجمعية الكيميائية الأمريكية . 132 (13): 4526-4527 . Bibcode : 2010JAChS.132.4526Z . doi : 10.1021/ja910795a . PMID: 20235501 . 
  31. ↑ زاكري، بيجان؛ فيرير، جاكوب أو.؛ ​​سيليك، إمراه؛ تشيتوك، إميلي سي.؛ شوارتز-لينك، أولريش؛ موي، فنسنت تي.؛ هاوارث، مارك (2012). "علامة ببتيدية تُشكّل رابطة تساهمية سريعة مع بروتين، من خلال هندسة لاصق بكتيري" . وقائع الأكاديمية الوطنية للعلوم . 109 (12): E690–7. Bibcode : 2012PNAS..109E.690Z . doi : 10.1073/pnas.1115485109 . PMC 3311370. PMID 22366317 .  
  32. ↑ فيجياني، جيانلوكا؛ ناكامورا، توموهيكو؛ برينر، مايكل؛ جاييه، رافائيل؛ يان، جون؛ روبنسون، كارول؛ هاوارث، مارك (2016). "مجموعات بروتينية متعددة قابلة للبرمجة مبنية باستخدام مواد لاصقة فائقة من الببتيدات المزدوجة" . وقائع الأكاديمية الوطنية للعلوم . 113 (5): 1202-1207 . Bibcode : 2016PNAS..113.1202V . doi : 10.1073/pnas.1519214113 . PMC 4747704. PMID 26787909 .  
  33. 1 2 بولدون، كان م.؛ جان، جيسو إكس.؛ بيدفورد، مايكل ر.؛ هاوارث، مارك (14 فبراير 2018). "إنزيم سنوب ليغاز يحفز تثبيت الببتيد-الببتيد ويتيح عزل المركبات المترافقة في الطور الصلب" . مجلة الجمعية الكيميائية الأمريكية . 140 (8): 3008-3018 . Bibcode : 2018JAChS.140.3008B . doi : 10.1021/jacs.7b13237 . PMID 29402082. S2CID 207189163 .  
  34. ↑ كيبل، أنتوني هـ.؛ ياداف، فيكاش ك.؛ فيرلا، ماتيو ب.؛ باور، كلوديا س.؛ تشونثاربورسات-بون، يولاشيني؛ هوانغ، جين؛ بون، روبن س.؛ هاوارث، مارك (يوليو 2021). "يُتيح DogCatcher ربط البروتينات بسهولة في الحلقات" . بيولوجيا الخلية الكيميائية . 29 (2): 339-350.e10. doi : 10.1016/j.chembiol.2021.07.005 . ISSN 2451-9456 . PMC 8878318. PMID 34324879 .   
  35. ↑ تان، لي لينغ؛ هون، شون س.؛ وونغ، فونغ ت.؛ أحمد، س. أشرف (26 أكتوبر 2016). " تفاعلات العلامة-المستقبل المُتحكَّم بها حركيًا لتجميع البروتين التساهمي الموجه" . PLOS ONE . 11 (10) e0165074. Bibcode : 2016PLoSO..1165074T . doi : 10.1371/journal.pone.0165074 . PMC 5082641. PMID 27783674 .  
  36. ↑ سيولي، بوند؛ أليسي، كريجون (أكتوبر 2021). "تطوير بروموتاج: نظام "النتوء والثقب" - بروتاك لتحفيز التحلل القوي والسريع والانتقائي للبروتينات المستهدفة الموسومة" . مجلة الكيمياء الطبية . 64 (20): 15477-15502 . doi : 10.1021/acs.jmedchem.1c01532 . PMC 8558867. PMID 34652918 .  
  37. ↑ تشاو، لويز ت.؛ فاسيليف، ديمتري ج. (2022). "تطبيق نظام تقارب CL7/Im7 جديد في تنقية البروتينات المعقدة والصيدلانية" . كروماتوغرافيا التقارب . طرق في البيولوجيا الجزيئية. المجلد 2466. الصفحات 61-82 . doi : 10.1007/978-1-0716-2176-9_5 . ISBN   978-1-0716-2175-2PMID 35585311​​ 
  38. ↑ بيدويل، هيوز؛ دوبلاي، باسكال (فبراير 1988). "إنتاج بروتينات هجينة ثنائية الوظيفة ترتبط بالمالتوز في بكتيريا الإشريكية القولونية وتنقيتها بخطوة واحدة. تصدير بوليميراز كلينو إلى الفراغ المحيط بالبلازما" . المجلة الأوروبية للكيمياء الحيوية . 171 (3): 541-549 . doi : 10.1111/j.1432-1033.1988.tb13823.x . PMID 3278900 . 
  39. ↑ ميندي، ديفيد ب؛ هالف، إلس ف؛ تانس، ساندر (2013). "تصميم الفوضى: حكايات الذيول غير المتوقعة" . البروتينات المضطربة جوهريًا . 1 (1): 5-15 . doi : 10.4161/idp.26790 . PMC 5424805. PMID 28516025 .  
  40. ^ كريزنيك، الكسندر. يليهي أوكوما، ميليسا؛ ليك، جان كريستوف؛ جروشنري، غيوم؛ لو كوردييه، هيلين؛ شارون، كريستوف؛ كوينترنيت، مارك؛ مازون، هورتنس؛ تالفورنييه، فرانسوا؛ بوشي مولر، ساندرين؛ جوزو، جان إيف؛ ريبول ، باسكال (أكتوبر 2018). "CRDSAT تم إنشاؤه بواسطة pCARGHO: طريقة علامة تقارب جديدة فعالة تعتمد على الليكتين لتنقية البروتين بشكل آمن وبسيط ومنخفض التكلفة" . التكنولوجيا الحيوية J. 14 (4) 1800214. دوى : 10.1002/biot.201800214 . بميد 30298550 . S2CID 52942568 .  
  41. 1 2 شوين، ماري ك.؛ ماشليدت، توماس؛ زيمرمان، كريس؛ إيغرز، كريستوفر ت.؛ ديكسون، أندرو س.؛ هيرست، روبن؛ هول، ماري ب.؛ إنسيل، لانس ب.؛ بينكوفسكي، بروك ف.؛ وود، كيث ف. (16 فبراير 2018). "وسم البروتينات الداخلية بببتيد مضيء باستخدام تقنية كريسبر" . مجلة ACS للكيمياء الحيوية . 13 (2): 467-474 . doi : 10.1021/acschembio.7b00549 . ISSN 1554-8929 . PMID 28892606 .