إيجلز مينيمال إسينشال ميديم
الوسط الأساسي الأدنى (MEM) هو وسط زراعة خلايا اصطناعي طوره هاري إيجل ونُشر لأول مرة عام 1959 في مجلة ساينس ، ويُستخدم للحفاظ على الخلايا في زراعة الأنسجة . [ 1 ] وهو يعتمد على ستة أملاح وجلوكوز، وُصفت في أملاح إيرل عام 1943: كلوريد الكالسيوم ، وكلوريد البوتاسيوم ، وكبريتات المغنيسيوم ، وكلوريد الصوديوم ، وفوسفات الصوديوم ، وبيكربونات الصوديوم . ويُضاف إلى هذا الوسط ثلاثة عشر حمضًا أمينيًا أساسيًا، وثمانية فيتامينات: الثيامين (فيتامين ب 1 )، والريبوفلافين (فيتامين ب 2 )، والنيكوتيناميد (فيتامين ب 3 )، وحمض البانتوثينيك (فيتامين ب 5 )، والبيرودوكسين (فيتامين ب 6 )، وحمض الفوليك (فيتامين ب 9 )، والكولين، والميو-إينوزيتول (المعروف سابقًا بفيتامين ب 8 ). تم تطوير العديد من أنواع هذا الوسط، والتي أضافت في الغالب فيتامينات وأحماض أمينية و/أو مغذيات أخرى. [ 2 ]
طوّر إيجل وسطه الأساسي "Basal Medium Eagle" (BME) في الفترة ما بين عامي 1955 و1957 على خلايا L الفأرية [ 3 ] وخلايا HeLa البشرية [ 4 ] ، مع إضافة 13 حمضًا أمينيًا أساسيًا و9 فيتامينات. يحتوي BME على البيوتين (فيتامين B7 ) ، والذي وجد إيجل لاحقًا أنه غير ضروري. في عام 1959، ضاعف وسطه الأساسي الأدنى كمية العديد من الأحماض الأمينية ليُحاكي تركيب البروتين في الخلايا البشرية المستزرعة بشكل أدق. وهذا يسمح بحفظ المزارع لفترات أطول نوعًا ما دون الحاجة إلى إعادة التغذية. [ 1 ]
تم اقتراح وسط DMEM ( وسط إيجل المعدل من دولبيكو ) في الأصل كوسط إيجل مع "تركيز أربعة أضعاف من الأحماض الأمينية والفيتامينات" من قبل ريناتو دولبيكو وجي. فريمان، ونُشرت دراستهما عام 1959. [ 5 ] تحتوي النسخ التجارية من هذا الوسط على تعديلات إضافية، انظر مثالاً في الجدول أدناه. [ 6 ]
يُعدّ وسط α-MEM (الوسط الأساسي الأدنى - تعديل ألفا من إيجل) وسطًا مُشتقًا من وسط MEM، وقد نُشر عام 1971 بواسطة كليفورد ب. ستانرز وزملاؤه. [ 7 ] يحتوي هذا الوسط على كميات أكبر من الأحماض الأمينية غير الأساسية، وبيروفات الصوديوم، والفيتامينات (حمض الأسكوربيك (فيتامين ج)، والبيوتين، والسيانوكوبالامين) مقارنةً بوسط MEM. كما يُمكن أن يحتوي على حمض الليبويك والنيوكليوسيدات. [ 8 ] [ 9 ]
يُعد وسط غلاسكو الأساسي الأدنى (MEM ) تعديلًا آخر، أعده إيان ماكفرسون ومايكل ستوكر. [ 10 ]
تعبير
يحتوي لتر واحد من كل وسط على (بالملليغرامات):
| واسطة | BME [ 11 ] | MEM [ 12 ] | α-MEMa [ 13 ] | DMEM [ 6 ] |
|---|---|---|---|---|
| جليسين | 50 | 30 | ||
| ل-ألانين | 25 | |||
| هيدروكلوريد إل-أرجينين | 21 | 126 | 126 | 84 |
| إل-أسباراجين-H 2 O | 50 | |||
| حمض الأسبارتيك L | 30 | |||
| هيدروكلوريد إل-سيستين-H 2 O | 100 | |||
| إل-سيستين 2HCl | 16 | 31 | 31 | 63 |
| حمض الجلوتاميك | 75 | |||
| إل-جلوتامين | 292 | 292 | 292 | 584 |
| إل-هيستيدين | 8 | 31 | 42 | |
| هيدروكلوريد إل-هيستيدين-H 2 O | 42 | 42 | ||
| إل-أيزولوسين | 26 | 52 | 52 | 105 |
| ل-ليوسين | 26 | 52 | 52 | 105 |
| هيدروكلوريد إل-ليسين | 36.47 | 73 | 73 | 146 |
| إل-ميثيونين | 7.5 | 15 | 15 | 30 |
| ل-فينيل ألانين | 16.5 | 32 | 32 | 66 |
| إل-برولين | 40 | |||
| إل-سيرين | 25 | 42 | ||
| إل-ثريونين | 24 | 48 | 48 | 95 |
| إل-تريبتوفان | 4 | 10 | 10 | 16 |
| ملح ثنائي الصوديوم لـ L-تيروسين ثنائي الهيدرات | 26 | 52 | 52 | 104 |
| إل-فالين | 23.5 | 46 | 46 | 94 |
| حمض الأسكوربيك | 50 | |||
| البيوتين | 1 | 0.1 | ||
| كلوريد الكولين | 1 | 1 | 1 | 4 |
| بانتوثينات الكالسيوم د | 1 | 1 | 1 | 4 |
| حمض الفوليك | 1 | 1 | 1 | 4 |
| النياسيناميد | 1 | 1 | 1 | 4 |
| هيدروكلوريد البيريدوكسال | 1 | 1 | 1 | 4 |
| الريبوفلافين | 0.1 | 0.1 | 0.1 | 0.4 |
| هيدروكلوريد الثيامين | 1 | 1 | 1 | 4 |
| فيتامين ب12 | 1.36 | |||
| إي-إينوزيتول | 2 | 2 | 2 | 7.2 |
| كلوريد الكالسيوم (CaCl 2 ، أنهيد.) | 200 | 200 | 200 | 200 |
| نترات الحديديك (Fe(NO 3 ) 3 ·9H 2 O) | 0.1 | |||
| كبريتات المغنيسيوم (MgSO4 ، لا مائي). | 97.67 | 97.67 | 97.67 | 97.67 |
| كلوريد البوتاسيوم (KCl) | 400 | 400 | 400 | 400 |
| بيكربونات الصوديوم (NaHCO 3 ) | 2200 | 2200 | 2200 | 3700 |
| كلوريد الصوديوم (NaCl) | 6800 | 6800 | 6800 | 6400 |
| فوسفات الصوديوم أحادي القاعدة (NaH 2 PO 4 -H 2 O) | 140 | 140 | 140 | 125 |
| د-جلوكوز (دكستروز) | 1000 | 1000 | 1000 | 1000 |
| حمض الليبويك | 0.2 | |||
| فينول أحمر | 10 | 10 | 10 | 15 |
| بيروفات الصوديوم | 110 | 110 |
انظر أيضاً
- وسط RPMI 1640 (وسط معهد روزويل بارك التذكاري)، للخلايا الليمفاوية
مراجع
- 1 2 إيجل، هـ. (1959). "استقلاب الأحماض الأمينية في مزارع الخلايا الثديية". مجلة ساينس . 130 (3373): 432-437 . Bibcode : 1959Sci...130..432E . doi : 10.1126/science.130.3373.432 . PMID 13675766 .
- ↑ ياو، ت؛ أساياما، ي (أبريل 2017). "أوساط زراعة الخلايا الحيوانية: التاريخ والخصائص والقضايا الراهنة" . طب التكاثر وعلم الأحياء . 16 (2): 99-117 . doi : 10.1002/rmb2.12024 . PMC 5661806. PMID 29259457 .
- ↑ إيجل، هـ. (1955). "المتطلبات المحددة للأحماض الأمينية لخلية ثديية (السلالة L) في زراعة الأنسجة" . مجلة الكيمياء البيولوجية . 214 (2): 839-852 . doi : 10.1016/S0021-9258(18)70932-0 . PMID 14381421 .
- ↑ إيجل، هـ. (1955). " المتطلبات المحددة للأحماض الأمينية لخلايا سرطان الإنسان (صبغة هيلا) في زراعة الأنسجة" . مجلة الطب التجريبي . 102 (1): 37-48 . doi : 10.1084/jem.102.1.37 . PMC 2136494. PMID 14392239 .
- ↑ دولبيكو ر، فريمان ج (1959). "إنتاج اللويحات بواسطة فيروس البوليوما". علم الفيروسات . 8 (3): 396-397 . doi : 10.1016/0042-6822(59)90043-1 . PMID 13669362 .
- 1 2 "11885 - DMEM، منخفض الجلوكوز، بيروفات (تركيبة)" . شركة Thermo Fisher Scientific . تم الاطلاع عليه بتاريخ 28-12-2021 .
- ↑ ستانرز سي بي؛ إليسيري جي إل؛ غرين إتش (1971). "نوعان من الريبوسومات في خلايا هجينة من الفأر والهامستر". نات نيو بيول . 230 (10): 52-4 . doi : 10.1038/newbio230052a0 . PMID 5279808 .
- ↑ "α-MEM" (ملف PDF) . كواشف ITW .
- ↑ "Alpha MEM مع النيوكليوسيدات" . Stem Cell Tech.
- ↑ "Glasgow's Modified Eagle's Medium 51492C" . Sigma-Aldrich . تم الاطلاع عليه بتاريخ 4 نوفمبر 2018 .
- ↑ "Basal Medium Eagle (BME)" . Thermofisher .
- ↑ "MEM" . Thermofisher .
- ↑ "MEM α، بدون نيوكليوسيدات" . Thermofisher .
- أوساط زراعة الخلايا
- ملخصات علم الأحياء الخلوي