ديجوكسيجينين

الديجوكسيجينين ( DIG ) هو ستيرويد موجود حصريًا في أزهار وأوراق نباتات الديجيتاليس الأرجوانية والديجيتاليس الشرقية والديجيتاليس الصوفية (قفازات الثعلب)، حيث يرتبط بالسكريات لتكوين الجليكوسيدات (مثل الديجوكسين ، لاناتوسيد سي ). [ 2 ]

الاستخدامات في مجال التكنولوجيا الحيوية

الديجوكسيجينين هو هابتين ، وهو جزيء صغير ذو قدرة عالية على إثارة الاستجابة المناعية ، ويُستخدم في العديد من تطبيقات البيولوجيا الجزيئية، على غرار هابتينات أخرى شائعة الاستخدام مثل 2،4-ثنائي نيتروفينول ، والبيوتين ، والفلوريسين . عادةً ما يُدخل الديجوكسيجينين كيميائيًا ( عن طريق الاقتران ) في الجزيئات الحيوية (البروتينات، والأحماض النووية) ليتم الكشف عنه في فحوصات لاحقة. وقد قُدِّر ثابت تفكك (Kd) لتفاعل الديجوكسيجينين مع الأجسام المضادة بحوالي 12 نانومتر [ 3 ] (مقارنةً بثابت تفكك (Kd ) يبلغ حوالي 0.1 بيكومتر لتفاعل البيوتين مع الستربتافيدين [ 4 ] ).

البروتينات الرابطة لـ DIG

قام تينبرغ وآخرون بتصميم بروتينات اصطناعية ترتبط بـ DIG. وكان أفضل بروتين مرتبط بهم، DIG10.3، عبارة عن بروتين مكون من 141 حمض أميني يرتبط بـ DIG بثابت تفكك (K d ) قدره 541 (+/- 193) بيكومولار. [ 5 ]

تُستخدم الأجسام المضادة للديجوكسيجينين ذات الألفة العالية والنوعية في مجموعة متنوعة من المقايسات المناعية البيولوجية (مثل مقايسة الامتصاص المناعي المرتبط بالإنزيم ELISA ). يتم وسم هذه الأجسام المضادة بالأصباغ أو الإنزيمات أو الفلورة، بشكل مباشر أو غير مباشر، من أجل الرؤية والكشف.

وبالتالي، فإن الديجوكسيجينين عبارة عن علامة مناعية متعددة الأغراض، وخاصة علامة مناعية نسيجية قياسية للتهجين الموضعي . [ 6 ] [ 7 ] في هذه الحالة، يتم اقترانه بنوع واحد من نيوكليوسيد ثلاثي الفوسفات RNA (عادةً يوريدين )، والذي يتم دمجه بعد ذلك في RNA (مسبار ريبوزي ) أثناء تصنيعه بواسطة الآلية الخلوية.

يُتيح ذلك القيام بما يلي  :

  • مجسات تهجين حساسة غير مشعة في الموقع للكشف عن الأحماض النووية في النباتات، قادرة على الكشف عن 1  ميكروغرام من الحمض النووي البلازميدي. [ 8 ]
  • مقترنات الببتيد-DIG، أي فحص البراديكينين بواسطة فحوصات المناعة الكيميائية الضوئية شديدة الحساسية. [ 9 ]
  • المتتبعات الفلورية والموسومة بـ DIG للاختبارات المناعية التنافسية، أي للحد من الكشف عن الديجوكسين، وهو دواء يستخدم لعلاج اضطراب النظم القلبي، إلى 0.2  نانوغرام/ مل . [ 10 ]
  • يمكن ربط الديجوكسيجينين بالسكريات لدراسة أحداث الغليكوزيل ، [ 11 ] حتى في الأنظمة البيولوجية.

انظر أيضاً

مراجع

  1. "ديجوكسيجينين" . صحيفة بيانات سلامة المواد . ChemSrc.
  2. بوليا، ج. (2003). الأهداف البيوكيميائية للمركبات النشطة بيولوجيًا في النباتات . نيويورك: مطبعة سي آر سي. رقم ISBN 978-0-415-30829-8.
  3. تيتين إس واي، ماتايوشي إي دي (أغسطس 2002). "قياس ألفة الأجسام المضادة وإجراء المقايسة المناعية على مستوى الجزيء الواحد". الكيمياء الحيوية التحليلية . 307 (1): 84-91 . doi : 10.1016/S0003-2697(02)00011-8 . PMID 12137783 . 
  4. دوان إكس (2012). "قياس تقارب وحركية تفاعلات البروتين باستخدام أجهزة الاستشعار الحيوية المصنوعة من أسلاك السيليكون النانوية" . مجلة نيتشر لتقنية النانو . 7 (6): 401-407 . Bibcode : 2012NatNa...7..401D . doi : 10.1038 / nnano.2012.82 . PMC 4180882. PMID 22635097 .  
  5. تينبرغ، سي. إي.، خاري، إس. دي.، دو، ج.، دويل، إل.، نيلسون، جيه. دبليو.، شينا، إيه.، جانكوفسكي، دبليو.، كالوديموس، سي. جي.، جونسون، ك.، ستودارد، بي. إل.، بيكر، دي. (سبتمبر 2013). " التصميم الحاسوبي لبروتينات ربط الليجاند ذات الألفة والانتقائية العالية" . مجلة نيتشر . 501 (7466): 212-216 . Bibcode : 2013Natur.501..212T . doi : 10.1038/nature12443 . PMC 3898436. PMID 24005320 .  
  6. ^ إيزل د، غرونوالد-جانهو إس، كروشين ب، محرران. (2002). دليل تطبيق DIG للتهجين غير المشع في الموقع ( الطبعة الثالثة). بنزبرغ: تشخيصات روش. 
  7. هاوبتمان جي، جيرستر تي (أغسطس 1994). "التهجين الموضعي ثنائي اللون للأجنة الكاملة في الفقاريات وذبابة الفاكهة". اتجاهات في علم الوراثة . 10 (8): 266. doi : 10.1016/0168-9525(90)90008-T . PMID 7940754 . 
  8. هارت إس إم، باسو سي (أبريل 2009). "تحسين نظام المقايسة المناعية القائم على الديجوكسيجينين للكشف عن الجينات في نبات رشاد أذن الفأر" . مجلة التقنيات الجزيئية الحيوية . 20 (2): 96-100 . PMC 2685603. PMID 19503620 .  
  9. ديكاري أ، درابو ج، كلوسيه ج، كوتور ر، آدم أ (1994). "تطوير ببتيد موسوم بالديجوكسيجينين: تطبيقه على المقايسة المناعية الكيميائية الضوئية للبراديكينين في الأنسجة الملتهبة". الببتيدات . 15 ( 3): 511-518 . doi : 10.1016/0196-9781(94)90214-3 . PMID 7937327. S2CID 19210640 .  
  10. ماييلو إس، إيلرز بي، ونديرليش إم، كلار تي إيه، جوسيل إتش بي، هايندل دي، نيشتل إيه، كورزينجر كيه، فيلدمان جيه (يوليو 2009). "مقايسة مناعية تنافسية متجانسة للديجوكسيجينين تعتمد على إخماد التألق بواسطة جسيمات الذهب النانوية". مجلة Analytica Chimica Acta . 646 ( 1-2 ): 119-122 . Bibcode : 2009AcAC..646..119M . doi : 10.1016/j.aca.2009.05.023 . PMID 19523564 . 
  11. غودارزي إم تي، رفيق إم، تيرنر جي (مايو 1995). "فحص مناعي متعدد الآبار مُحسَّن باستخدام الليكتينات الموسومة بالديجوكسيجينين لدراسة غلكزة البروتينات السكرية النقية". معاملات الجمعية الكيميائية الحيوية . 23 (2): 168S. doi : 10.1042/bst023168s . PMID 7672194 .