مناعة نسيجية كيميائية

📅 آخر تحديث: ٢ أغسطس ٢٠٢٦
✍️ نُشر في: ٢ أغسطس ٢٠٢٦
📷 يحتوي على 10 صور
الموسوعة الحرة

أنماط التلوين الرئيسية في المناعة النسيجية الكروموجينية.
المناعة الفلورية لجلد الإنسان باستخدام جسم مضاد لـ IgA. الجلد مأخوذ من مريض مصاب بمرض فرفرية هينوخ شونلاين : توجد رواسب IgA في جدران الشعيرات الدموية السطحية الصغيرة (الأسهم الصفراء). المنطقة الخضراء الباهتة المتموجة في الأعلى هي البشرة ، والمنطقة الليفية السفلية هي الأدمة .
التلوين "الكتلي": التعبير النووي والسيتوبلازمي القوي في جزء متصل من الخلايا. [1]

المناعة النسيجية هي شكل من أشكال التلوين المناعي . وهي تتضمن عملية تحديد المستضدات (البروتينات) بشكل انتقائي في الخلايا والأنسجة، من خلال استغلال مبدأ ارتباط الأجسام المضادة بشكل خاص بالمستضدات في الأنسجة البيولوجية . كان ألبرت هيويت كونز وإرنست برلينر ونورمان جونز وهيو جيه كريتش أول من طور المناعة الفلورية في عام 1941. وقد أدى هذا إلى تطوير المناعة النسيجية لاحقًا. [2] [3]

تُستخدم الصبغة المناعية الكيميائية على نطاق واسع في تشخيص الخلايا غير الطبيعية مثل تلك الموجودة في الأورام السرطانية . في بعض الخلايا السرطانية، يتم التعبير عن مستضدات الورم معينة مما يجعل من الممكن اكتشافها. تُستخدم المناعة الكيميائية أيضًا على نطاق واسع في الأبحاث الأساسية، لفهم توزيع وتوطين المؤشرات الحيوية والبروتينات المعبر عنها بشكل مختلف في أجزاء مختلفة من الأنسجة البيولوجية. [4]

إعداد العينة

يمكن إجراء المناعة النسيجية على الأنسجة التي تم تثبيتها وغمرها في البارافين ، ولكن أيضًا على الأنسجة المحفوظة بالتبريد (المجمدة). بناءً على طريقة حفظ الأنسجة، توجد خطوات مختلفة لإعداد الأنسجة للمناعة النسيجية، ولكن الطريقة العامة تتضمن التثبيت المناسب، واستعادة المستضد والحضانة مع الأجسام المضادة الأولية، ثم الحضانة مع الأجسام المضادة الثانوية. [5] [6]

تحضير الأنسجة وتثبيتها

تثبيت الأنسجة مهم للحفاظ على الأنسجة والحفاظ على مورفولوجيا الخلايا. ستؤثر صيغة التثبيت ونسبة المثبت إلى الأنسجة والوقت في المثبت على النتيجة. غالبًا ما يكون محلول التثبيت (المثبت) عبارة عن 10٪ من محلول الفورمالين المحايد . وقت التثبيت الطبيعي هو 24 ساعة في درجة حرارة الغرفة. تتراوح نسبة المثبت إلى الأنسجة من 1: 1 إلى 1: 20. بعد تثبيت الأنسجة يمكن تضمينها في شمع البارافين. [5] [6]

بالنسبة للأقسام المجمدة، يتم التثبيت عادة بعد التقطيع إذا لم يكن من المقرر اختبار أجسام مضادة جديدة. ثم يمكن استخدام الأسيتون أو الفورمالين. [6]

التقطيع

يتم تقسيم عينة الأنسجة باستخدام ميكروتوم. بالنسبة للأنسجة المغطاة بالبارافين، يكون السُمك الطبيعي 4 ميكرومتر، وللأقسام المجمدة 4 – 6 ميكرومتر. [6] سمك الأقسام المقطعة مهم، وهو عامل مهم في المناعة الكيميائية. إذا قارنت قسمًا من أنسجة المخ يبلغ قياسه 4 ميكرومتر بقسم يبلغ قياسه 7 ميكرومتر، فقد يكون بعض ما تراه في القسم الذي يبلغ سمكه 7 ميكرومتر مفقودًا في القسم الذي يبلغ سمكه 4 ميكرومتر. يوضح هذا أهمية الأساليب التفصيلية المتعلقة بهذه المنهجية. [7] يجب إزالة البارافين من الأنسجة المغطاة بالبارافين لإزالة كل البارافين الموجود على عينة الأنسجة وحولها في زيلين أو بديل جيد، متبوعًا بالكحول. [8]

استرجاع المستضد

إن استرجاع المستضد مطلوب لجعل المستضدات متاحة للصبغ المناعي الكيميائي لمعظم أقسام الأنسجة المثبتة بالفورمالين. تعتبر المستضدات مواقع ربط للأجسام المضادة المستخدمة لتصور المستضد المستهدف والذي قد يكون مقنعًا بسبب التثبيت. قد يتسبب تثبيت الأنسجة في تكوين جسور الميثيلين أو تشابك المجموعات الأمينية، بحيث لم تعد المستضدات متاحة. يمكن لاسترجاع المستضد استعادة المستضد المقنع، ربما عن طريق تحطيم الروابط المتشابكة الناتجة عن التثبيت. [9] الطريقة الأكثر شيوعًا لإجراء استرجاع المستضد هي استخدام التسخين عالي الحرارة أثناء نقع الشرائح في محلول منظم. [10] يمكن القيام بذلك بطرق مختلفة، على سبيل المثال باستخدام فرن الميكروويف أو الأوتوكلاف أو ألواح التسخين أو حمامات الماء. بالنسبة للأقسام المجمدة، لا يكون استرجاع المستضد ضروريًا بشكل عام، ولكن بالنسبة للقسم المجمد الذي تم تثبيته في الأسيتون أو الفورمالين، يمكن لاسترجاع المستضد تحسين إشارة المناعة الكيميائية. [6]

حجب

يمكن أن يؤدي الارتباط غير النوعي للأجسام المضادة إلى تلطيخ الخلفية. على الرغم من أن الأجسام المضادة ترتبط بنظائر محددة، إلا أنها قد ترتبط أيضًا جزئيًا أو ضعيفًا بمواقع على البروتينات غير النوعية تشبه موقع الارتباط بالبروتين المستهدف. من خلال حضانة الأنسجة بمصل طبيعي معزول من الأنواع التي تم إنتاج الجسم المضاد الثانوي منها، يمكن تقليل تلطيخ الخلفية. من الممكن أيضًا استخدام مخازن الحجب العالمية المتوفرة تجاريًا. تشمل مخازن الحجب الشائعة الأخرى المصل الطبيعي أو الحليب المجفف منزوع الدسم أو BSA أو الجيلاتين. [5] [6] قد يتسبب نشاط الإنزيم الداخلي أيضًا في تلطيخ الخلفية ولكن يمكن تقليله إذا تمت معالجة الأنسجة ببيروكسيد الهيدروجين. [5]

عينة من العلامات

بعد تحضير العينة، يمكن تصور الهدف باستخدام الأجسام المضادة الموسومة بمركبات فلورية أو معادن أو إنزيمات. هناك طرق مباشرة وغير مباشرة لوسم العينة. [6] [11]

أنواع الأجسام المضادة

يمكن أن تكون الأجسام المضادة المستخدمة للكشف متعددة النسائل أو أحادية النسيلة. يتم تصنيع الأجسام المضادة متعددة النسيلة باستخدام حيوانات مثل خنزير غينيا أو أرنب أو فأر أو جرذ أو ماعز. يتم حقن الحيوان بالمستضد المطلوب لتحفيز استجابة مناعية. يمكن عزل الأجسام المضادة من مصل الحيوان بالكامل. سيؤدي إنتاج الأجسام المضادة متعددة النسيلة إلى مزيج من الأجسام المضادة المختلفة وسيتعرف على العديد من النمطيات. يتم تصنيع الأجسام المضادة وحيدة النسيلة عن طريق حقن الحيوان بالمستضد المطلوب ثم عزل خلية B منتجة للأجسام المضادة، عادةً من الطحال. يتم بعد ذلك دمج الخلية المنتجة للأجسام المضادة مع سلالة خلايا السرطان. يؤدي هذا إلى إظهار الأجسام المضادة لخصوصية نمطية واحدة. [12]

بالنسبة لاستراتيجيات الكشف المناعي الكيميائي، يتم تصنيف الأجسام المضادة على أنها كواشف أولية أو ثانوية. يتم إنتاج الأجسام المضادة الأولية ضد مستضد موضع اهتمام وعادة ما تكون غير مقترنة (غير مُسمَّاة). يتم إنتاج الأجسام المضادة الثانوية ضد الغلوبولينات المناعية من أنواع الأجسام المضادة الأولية. عادةً ما يتم ربط الجسم المضاد الثانوي بجزيء رابط، مثل البيوتين، والذي يقوم بعد ذلك بتجنيد جزيئات المراسل، أو يرتبط الجسم المضاد الثانوي نفسه مباشرة بالجزيء المراسل. [11]

طرق الكشف

الطريقة المباشرة هي طريقة تلوين من خطوة واحدة وتتضمن تفاعل جسم مضاد مُسمّى بشكل مباشر مع المستضد في أقسام الأنسجة. وبينما تستخدم هذه التقنية جسمًا مضادًا واحدًا فقط وبالتالي فهي بسيطة وسريعة، فإن الحساسية أقل بسبب تضخيم الإشارة القليل، على النقيض من الأساليب غير المباشرة. [11]

تتضمن الطريقة غير المباشرة جسمًا مضادًا أوليًا غير مُسمّى يرتبط بالمستضد المستهدف في الأنسجة. ثم يُضاف جسم مضاد ثانوي، يرتبط بالجسم المضاد الأولي كطبقة ثانية. وكما ذكرنا، يجب رفع الجسم المضاد الثانوي ضد الجسم المضاد IgG للأنواع الحيوانية التي تم رفع الجسم المضاد الأولي فيها. هذه الطريقة أكثر حساسية من استراتيجيات الكشف المباشر بسبب تضخيم الإشارة بسبب ارتباط العديد من الأجسام المضادة الثانوية بكل جسم مضاد أولي. [11]

تتميز الطريقة غير المباشرة، بالإضافة إلى حساسيتها الأكبر، بميزة أخرى وهي أنها لا تحتاج إلا إلى توليد عدد صغير نسبيًا من الأجسام المضادة الثانوية القياسية المقترنة (المسماة). على سبيل المثال، يكون الجسم المضاد الثانوي المسمى الذي تم تربيته ضد IgG الأرنبي مفيدًا مع أي جسم مضاد أولي تم تربيته في الأرنب. وهذا مفيد بشكل خاص عندما يقوم الباحث بتسمية أكثر من جسم مضاد أولي، سواء بسبب الانتقاء متعدد النسائل الذي ينتج مجموعة من الأجسام المضادة الأولية لمستضد مفرد أو عندما يكون هناك اهتمام بمستضدات متعددة. مع الطريقة المباشرة، سيكون من الضروري تسمية كل جسم مضاد أولي لكل مستضد موضع اهتمام. [11]

المناعة النسيجية الكروموجينية: تتعرض الخلية لجسم مضاد أولي (أحمر) يرتبط بمستضد محدد (مربع أرجواني). يرتبط الجسم المضاد الأولي بجسم مضاد ثانوي (أخضر) مرتبط كيميائيًا بإنزيم (أزرق). يغير الإنزيم لون الركيزة إلى لون أكثر تصبغًا (نجمة بنية).

جزيئات المراسل

تختلف جزيئات المراسل بناءً على طبيعة طريقة الكشف، وأكثرها شيوعًا هو الكشف الكروموجيني والفلوري. في المناعة النسيجية الكروموجينية، يتم ربط الأجسام المضادة بإنزيم، مثل الفوسفات القلوي وبيروكسيديز الفجل، والذي يمكن أن يحفز تفاعلًا ينتج اللون في وجود ركيزة كروموجينية مثل ثنائي أمينوبنزيدين. [5] يمكن تحليل المنتج الملون باستخدام مجهر ضوئي عادي. [13] في المناعة الفلورية، يتم وضع علامة على الجسم المضاد على الفلوروفور ، مثل إيزوثيوسيانات الفلوريسين ، أو إيزوثيوسيانات رباعي ميثيل رودامين، أو أسيتات أمينوميثيل كومارين أو سيانين5. تُستخدم أيضًا الفلوروكرومات الاصطناعية من Alexa Fluors بشكل شائع. [13] [14] يمكن تصور الفلوروكرومات بواسطة مجهر فلوري أو مجهر بؤري. [13]

بالنسبة لطرق الكشف الكروموجيني والفلوري، يمكن للتحليل الكثافة الضوئية للإشارة أن يوفر بيانات كمية شبه كمية وكمية كاملة، على التوالي، لربط مستوى إشارة المراسل بمستوى التعبير عن البروتين أو توطينه. [6]

البقع المضادة

صبغة المناعة الكيميائية مقابل صبغة الهيماتوكسيلين المضادة.

بعد التلوين المناعي الكيميائي للمستضد المستهدف، يتم غالبًا تطبيق صبغة أخرى. توفر الصبغة المضادة تباينًا يساعد على إبراز الصبغة الأساسية ويجعل من السهل فحص مورفولوجيا الأنسجة. كما تساعد في توجيه وتصور مقطع الأنسجة. يستخدم الهيماتوكسيلين بشكل شائع. [6] [15]

استكشاف الأخطاء وإصلاحها

في تقنيات المناعة الكيميائية، هناك عدة خطوات قبل التلوين النهائي للأنسجة والتي يمكن أن تسبب مجموعة متنوعة من المشاكل. يمكن أن يكون التلوين قويًا للخلفية، أو تلوينًا ضعيفًا لمستضد الهدف ووجود آثار. من المهم تحسين جودة الأجسام المضادة وتقنيات المناعة الكيميائية. [16] البيوتين الداخلي، أو الإنزيمات المراسلة أو التفاعل المتبادل للأجسام المضادة الأولية/الثانوية هي أسباب شائعة للتلوين القوي للخلفية. [11] [13] قد يكون التلوين الضعيف أو الغائب ناتجًا عن التثبيت غير الدقيق للأنسجة أو مستويات المستضد المنخفضة. يجب معالجة جوانب تحضير الأنسجة المناعية الكيميائية والتلوين بالأجسام المضادة بشكل منهجي لتحديد مشاكل التلوين والتغلب عليها. [5] [6]

الضوابط الإيجابية والسلبية في الكيمياء المناعية. لهذا الغرض، تعني كلمة "داخلي" الأنسجة من المريض المستهدف، وتعني كلمة "خارجي" أن الأنسجة من مريض آخر. [17]

تتضمن طرق التخلص من البقع الخلفية تخفيف الأجسام المضادة الأولية أو الثانوية، وتغيير وقت أو درجة حرارة الحضانة، واستخدام نظام كشف مختلف أو جسم مضاد أولي مختلف. يجب أن تتضمن مراقبة الجودة كحد أدنى أنسجة معروفة بالتعبير عن المستضد كعنصر تحكم إيجابي وضوابط سلبية للأنسجة المعروفة بعدم التعبير عن المستضد، بالإضافة إلى أنسجة الاختبار التي تم فحصها بنفس الطريقة مع حذف الجسم المضاد الأولي (أو بشكل أفضل، امتصاص الجسم المضاد الأولي). [5] [18]

علامات المناعة الكيميائية التشخيصية

مناعة نسيجية كروموجينية لكلى طبيعية تستهدف البروتين CD10 .

المناعة النسيجية هي تقنية كشف ممتازة ولها ميزة هائلة تتمثل في القدرة على إظهار مكان وجود بروتين معين بالضبط داخل الأنسجة التي تم فحصها. إنها أيضًا طريقة فعالة لفحص الأنسجة. هذا جعلها تقنية مستخدمة على نطاق واسع في علم الأعصاب ، مما يتيح للباحثين فحص التعبير البروتيني داخل هياكل دماغية محددة. عيبها الرئيسي هو أنه على عكس تقنيات المناعة الغربية حيث يتم فحص الصبغ مقابل سلم الوزن الجزيئي ، من المستحيل إظهار أن الصبغ يتوافق مع البروتين المطلوب في المناعة النسيجية. لهذا السبب، يجب التحقق من صحة الأجسام المضادة الأولية جيدًا في Western Blot أو إجراء مماثل. تُستخدم هذه التقنية على نطاق أوسع في علم الأمراض الجراحي التشخيصي للأورام المناعية (على سبيل المثال، الصبغ المناعي للكادهيرين الإلكتروني للتمييز بين سرطان القناة الموضعي (الصبغات إيجابية) وسرطان الفصيص الموضعي (لا يصبغ إيجابيًا) [19] ). وفي الآونة الأخيرة، أصبحت تقنيات المناعة الكيميائية مفيدة في التشخيص التفريقي لأشكال متعددة من سرطان الغدد اللعابية والرأس والرقبة. [20]

إن تنوع العلامات المناعية الكيميائية المستخدمة في علم الأمراض الجراحي التشخيصي كبير. حيث تحتوي العديد من المختبرات السريرية في المستشفيات الجامعية على قوائم تضم أكثر من 200 جسم مضاد تستخدم كعلامات حيوية تشخيصية وتنبؤية. ومن أمثلة بعض العلامات الشائعة الاستخدام ما يلي:

تلطيخ PIN-4 لغدة حميدة (على اليسار) وسرطان غدة البروستاتا (على اليمين) باستخدام مزيج PIN-4. يفتقر السرطان الغدي إلى الخلايا الظهارية القاعدية (ملطخة باللون البني الداكن بواسطة p63 و CK-5 و CK-14 ). أيضًا، في العينات الملطخة بـ PIN-4، تُظهر خلايا السرطان الغدي عمومًا سيتوبلازمًا أحمر (ملطخًا بـ AMACR ).

توجيه العلاج

تتغير مجموعة متنوعة من المسارات الجزيئية في السرطان ويمكن استهداف بعض هذه التغييرات في علاج السرطان. يمكن استخدام المناعة الكيميائية لتقييم الأورام التي من المرجح أن تستجيب للعلاج، من خلال الكشف عن وجود أو ارتفاع مستويات الهدف الجزيئي. [ بحاجة لمصدر ]

المثبطات الكيميائية

يسمح علم الأحياء الورمي بعدد من الأهداف المحتملة داخل الخلايا. تعتمد العديد من الأورام على الهرمونات. يمكن استخدام وجود مستقبلات الهرمونات لتحديد ما إذا كان الورم يستجيب بشكل محتمل للعلاج المضاد للهرمونات. كان أحد العلاجات الأولى هو مضاد الإستروجين، تاموكسيفين ، المستخدم لعلاج سرطان الثدي. يمكن الكشف عن مستقبلات الهرمونات هذه عن طريق المناعة الكيميائية. [23] تم تطوير إيماتينيب ، وهو مثبط كيناز التيروزين داخل الخلايا ، لعلاج سرطان الدم النقوي المزمن ، وهو مرض يتميز بتكوين كيناز التيروزين غير الطبيعي المحدد. أثبت إيماتينيب فعاليته في الأورام التي تعبر عن كينازات التيروزين الأخرى، وأبرزها KIT. تعبر معظم أورام الخلايا الظهارية المعوية عن KIT، والتي يمكن اكتشافها عن طريق المناعة الكيميائية. [24]

الأجسام المضادة وحيدة النسيلة

العديد من البروتينات التي ثبت ارتفاع تنظيمها بشكل كبير في الحالات المرضية عن طريق المناعة الكيميائية هي أهداف محتملة للعلاجات التي تستخدم الأجسام المضادة وحيدة النسيلة . تُستخدم الأجسام المضادة وحيدة النسيلة، نظرًا لحجمها، ضد أهداف سطح الخلية. من بين الأهداف المفرطة التعبير عنها أعضاء من عائلة EGFR ، وهي بروتينات عبر الغشاء ذات مجال مستقبل خارج الخلية ينظم كيناز التيروزين داخل الخلايا. [25] من بين هذه البروتينات، كان HER2 / neu (المعروف أيضًا باسم Erb-B2) أول من تم تطويره. يتم التعبير عن الجزيء بشكل كبير في مجموعة متنوعة من أنواع الخلايا السرطانية، وأبرزها سرطان الثدي. على هذا النحو، تمت الموافقة من قِبل إدارة الغذاء والدواء على الأجسام المضادة ضد HER2 / neu للعلاج السريري للسرطان تحت اسم الدواء Herceptin . هناك اختبارات مناعية كيميائية متوفرة تجاريًا، Dako HercepTest وLeica Biosystems Oracle [26] و Ventana Pathway. [27]

وبالمثل، يتم التعبير بشكل مفرط عن مستقبل عامل نمو البشرة (HER-1) في مجموعة متنوعة من أنواع السرطان بما في ذلك سرطان الرأس والرقبة والقولون. تُستخدم المناعة النسيجية لتحديد المرضى الذين قد يستفيدون من الأجسام المضادة العلاجية مثل Erbitux (cetuximab). [28] تشمل الأنظمة التجارية للكشف عن مستقبل عامل نمو البشرة عن طريق المناعة النسيجية Dako pharmDx.

رسم خريطة تعبير البروتين

يمكن أيضًا استخدام المناعة النسيجية لتحديد ملف تعريف البروتين بشكل عام، بشرط توفر الأجسام المضادة المعتمدة للمناعة النسيجية. يعرض أطلس البروتين البشري خريطة للتعبير البروتيني في الأعضاء والأنسجة البشرية الطبيعية. يوفر الجمع بين المناعة النسيجية ومصفوفات الأنسجة أنماط التعبير البروتيني في عدد كبير من أنواع الأنسجة المختلفة. تُستخدم المناعة النسيجية أيضًا لتحديد ملف تعريف البروتين في أكثر أشكال السرطان البشري شيوعًا. [29] [30]

انظر أيضا

مراجع

  1. ^ الصورة من إعداد الدكتور ميكائيل هاجستروم. المرجع للمصطلحات: الدكتورة أنجليكا هودجسون، الدكتورة كارلوس بارا هيران "ص16". مخططات علم الأمراض .{{cite web}}:CS1 maint: أسماء متعددة: قائمة المؤلفين ( الرابط )آخر تحديث للموظفين: 25 يناير 2024
  2. ^ Ortiz Hidalgo C (2022)، Del Valle L (محرر)، "Immunohistochemistry in Historical Perspective: Knowing the Past to Understand the Present"، Immunohistochemistry and Immunocytochemistry ، Methods in Molecular Biology، المجلد 2422، نيويورك، نيويورك: Springer US، ص 17-31، doi :10.1007/978-1-0716-1948-3_2، ISBN 978-1-0716-1947-6, PMID  34859396, S2CID  244861186 , تم الاسترجاع في 2024-02-22
  3. ^ "المناعة الكيميائية: الأصول والنصائح ونظرة إلى المستقبل". مجلة The Scientist® . تم الاسترجاع في 2024-02-22 .
  4. ^ Duraiyan J, Govindarajan R, Kaliyappan K, Palanisamy M (2012). "تطبيقات الكيمياء المناعية". مجلة الصيدلة والعلوم الحيوية المتحالفة . 4 (6): S307-9. doi : 10.4103/0975-7406.100281 . ISSN  0975-7406. PMC 3467869. PMID  23066277 . 
  5. ^ abcdefg Magaki S، Hojat SA، Wei B، So A، Yong WH (2019)، Yong WH (ed.)، "مقدمة لأداء الكيمياء المناعية"، Biobanking ، المجلد. 1897، نيويورك، نيويورك: سبرينغر نيويورك، الصفحات من 289 إلى 298، دوى :10.1007/978-1-4939-8935-5_25، ISBN 978-1-4939-8933-1، PMC  6749998 ، PMID  30539453
  6. ^ abcdefghij Kim SW, Roh J, Park CS (2016-11-15). "الكيمياء المناعية لعلماء الأمراض: البروتوكولات والمزالق والنصائح". مجلة علم الأمراض والطب الانتقالي . 50 (6): 411-418. doi :10.4132/jptm.2016.08.08. ISSN  2383-7837. PMC 5122731. PMID 27809448  . 
  7. ^ Libard S, Cerjan D, Alafuzoff I (يناير 2019). "خصائص مقطع الأنسجة التي تؤثر على نتائج التلوين في المناعة النسيجية". علم الأحياء الخلوي والكيمياء النسيجية . 151 (1): 91-96. doi :10.1007/s00418-018-1742-1. ISSN  0948-6143. PMC 6328518. PMID 30357509  . 
  8. ^ Binch A, Snuggs J, Le Maitre CL (2020-05-15). "التحليل المناعي الكيميائي لتعبير البروتين في أنسجة القرص الفقري البشري المضمنة بالبارافين والمثبتة بالفورمالين". Jor Spine . 3 (3): e1098. doi :10.1002/jsp2.1098. ISSN  2572-1143. PMC 7524243. PMID 33015573  . 
  9. ^ Shi SR, Cote RJ, Taylor CR (مارس 1997). "Antigen Retrieval Immunohistochemistry: Past, Present, and Future". مجلة الكيمياء النسيجية والكيمياء الخلوية . 45 (3): 327–343. doi :10.1177/002215549704500301. ISSN  0022-1554. PMID  9071315.
  10. ^ Shi SR, Key ME, Kalra KL (يونيو 1991). "استرجاع المستضد في الأنسجة المثبتة بالفورمالين والمغموسة بالبارافين: طريقة تعزيز للصبغ المناعي الكيميائي القائم على تسخين أقسام الأنسجة في فرن الميكروويف". مجلة الكيمياء النسيجية والكيمياء الخلوية . 39 (6): 741-748. doi :10.1177/39.6.1709656. ISSN  0022-1554. PMID  1709656.
  11. ^ abcdef Ramos-Vara JA (2005-07-04). "الجوانب الفنية للمناعة الكيميائية". علم الأمراض البيطرية . 42 (4): 405-426. doi :10.1354/vp.42-4-405. ISSN  0300-9858. PMID  16006601. S2CID  6229029.
  12. ^ Peltomaa R, Barderas R, Benito-Peña E, Moreno-Bondi MC (2021-08-21). "الأجسام المضادة المؤتلفة واستخدامها في التحليل المناعي الغذائي". الكيمياء التحليلية والحيوية . 414 (1): 193-217. doi :10.1007/s00216-021-03619-7. ISSN 1618-2642  . PMC 8380008. PMID  34417836. 
  13. ^ abcd Krenacs T, Krenacs L, Raffeld M (2010), Oliver C, Jamur MC (eds.), "Multiple Antigen Immunostaining Procedures", Immunocytochemical Methods and Protocols , vol. 588, Totowa, NJ: Humana Press, pp. 281–300, doi :10.1007/978-1-59745-324-0_28, ISBN 978-1-58829-463-0، PMC  7670878 ، PMID  20012839
  14. ^ Im K, Mareninov S, Diaz MF, Yong WH (2019), Yong WH (ed.), "An Introduction to Performing Immunofluorescence Staining", Biobanking , vol. 1897, New York, NY: Springer New York, pp. 299–311, doi :10.1007/978-1-4939-8935-5_26, ISBN 978-1-4939-8933-1، PMC  6918834 ، PMID  30539454
  15. ^ Zehntner SP, Chakravarty MM, Bolovan RJ, Chan C, Bedell BJ (2008-06-03). "تقنيات صبغ الأنسجة التآزرية وتقسيم الصور للحصول على مناعة نسيجية دقيقة وكمية". مجلة الكيمياء النسيجية والكيمياء الخلوية . 56 (10): 873–880. doi :10.1369/jhc.2008.950345. ISSN 0022-1554  . PMC 2544616. PMID  18574255. 
  16. ^ Ward JM, Rehg JE (2013-09-27). "المناعة النسيجية للقوارض: المخاطر واستكشاف الأخطاء وإصلاحها". علم الأمراض البيطرية . 51 (1): 88-101. doi :10.1177/0300985813503571. ISSN  0300-9858. PMID  24078006. S2CID  20084645.
  17. ^ صورة بواسطة الدكتور ميكائيل هاجستروم. المرجع: Torlakovic EE، Francis G، Garratt J، Gilks ​​B، Hyjek E، Ibrahim M، وآخرون (2014). "توحيد الضوابط السلبية في المناعة النسيجية التشخيصية: توصيات من لجنة الخبراء الدولية المخصصة". Appl Immunohistochem Mol Morphol . 22 (4): 241–52. doi :10.1097/PAI.0000000000000069. PMC 4206554. PMID  24714041 . {{cite journal}}:CS1 maint: أسماء متعددة: قائمة المؤلفين ( الرابط )
  18. ^ استكشاف أخطاء التلوين المناعي الكيميائي (IHC) وإصلاحها
  19. ^ O'Malley F, Pinder S (2006). Breast Pathology (الطبعة الأولى). إدنبرة: Churchill Livingstone/Elsevier. ISBN 978-0-443-06680-1.
  20. ^ Zhu S, Schuerch C, Hunt J (يناير 2015). "مراجعة وتحديثات الكيمياء المناعية في أورام الغدد اللعابية والرأس والرقبة المختارة". أرشيف علم الأمراض والطب المخبري . 139 (1): 55-66. doi : 10.5858/arpa.2014-0167-RA . PMID  25549144.
  21. ^ Taupin P (يناير 2007). "مناعة BrdU النسيجية لدراسة تكوين الخلايا العصبية لدى البالغين: النماذج والمزالق والقيود والتحقق". Brain Research Reviews . 53 (1): 198–214. doi :10.1016/j.brainresrev.2006.08.002. PMID  17020783. S2CID  23557588.
  22. ^ Leader M, Patel J, Makin C, Henry K (December 1986). "تحليل حساسية وخصوصية مؤشر الكيراتين الخلوي CAM 5.2 للأورام الظهارية. نتائج دراسة أجريت على 203 ساركوما و50 سرطانة و28 ورمًا خبيثًا". علم الأمراض النسيجي . 10 (12): 1315-1324. doi :10.1111/j.1365-2559.1986.tb02574.x. PMID  2434403. S2CID  28142859.
  23. ^ Jørgensen JT, Nielsen KV, Ejlertsen B (أبريل 2007). "التشخيص الدوائي والعلاجات المستهدفة - نهج عقلاني لتخصيص العلاج الطبي المضاد للسرطان في سرطان الثدي". The Oncologist . 12 (4): 397–405. doi : 10.1634/theoncologist.12-4-397 . PMID  17470682. S2CID  19065186.
  24. ^ Gold JS, Dematteo RP (أغسطس 2006). "العلاج الجراحي والجزيئي المشترك: نموذج ورم بطانة الجهاز الهضمي". Annals of Surgery . 244 (2): 176–184. doi :10.1097/01.sla.0000218080.94145.cf. PMC 1602162. PMID  16858179 . 
  25. ^ Harari PM (ديسمبر 2004). "استراتيجيات تثبيط مستقبلات عامل نمو البشرة في علم الأورام". سرطان الغدد الصماء المرتبط . 11 (4): 689-708. doi : 10.1677/erc.1.00600 . PMID  15613446.
  26. ^ "leicabiosystems.com". leicabiosystems.com . تم الاسترجاع في 2013-06-16 .
  27. ^ Press MF, Sauter G, Bernstein L, Villalobos IE, Mirlacher M, Zhou JY, et al. (سبتمبر 2005). "التقييم التشخيصي لـ HER-2 كهدف جزيئي: تقييم دقة وإمكانية إعادة إنتاج الاختبارات المعملية في التجارب السريرية العشوائية الكبيرة والمستقبلية". Clinical Cancer Research . 11 (18): 6598–6607. doi : 10.1158/1078-0432.CCR-05-0636 . PMID  16166438.
  28. ^ بيبو إف، بويسيير-ميشوت إف، سابورين جي سي، غورغو-بورغاد إس، رادال إم، بينولت-يوركا إف، وآخرون. (سبتمبر 2006). "تقييم تعبير مستقبل عامل نمو البشرة (EGFR) في سرطانات القولون والمستقيم الأولية والانبثاثات المرتبطة بها على أقسام الأنسجة والمصفوفة الدقيقة للأنسجة". أرشيف فيرشوس . 449 (3): 281-287. دوى :10.1007/s00428-006-0247-9. بمك 1888717 . بميد  16865406. 
  29. ^ "أطلس البروتين البشري". www.proteinatlas.org . تم الاسترجاع في 2017-10-02 .
  30. ^ Uhlén M, Fagerberg L, Hallström BM, Lindskog C, Oksvold P, Mardinoglu A, et al. (يناير 2015). "Proteomics. Tissue-based map of the human proteome". Science . 347 (6220): 1260419. doi :10.1126/science.1260419. PMID  25613900. S2CID  802377.

قراءة إضافية

  • بورنيت ر، جيوشارد واي، بارال إي (أبريل 1997). "المناعة النسيجية للفحص المجهري الضوئي في تقييم سلامة العوامل العلاجية: نظرة عامة". علم السموم . 119 (1): 83-93. رمز Bibcode : 1997Toxgy.119...83B. doi : 10.1016/S0300-483X(96)03600-1. PMID  9129199.
  • Joyner A, Wall N (يناير 2008). "الكيمياء المناعية للأجنة الكاملة للفئران". Cold Spring Harbor Protocols . 2008 (2): pdb.prot4820. doi : 10.1101/pdb.prot4820 . PMID  21356665.
  • راموس فارا جيه إيه، ميلر إم إيه (يناير 2014). "عندما تتوافق مستضدات الأنسجة والأجسام المضادة: إعادة النظر في الجوانب الفنية للمناعة الكيميائية - تقنية الأحمر والبني والأزرق". علم الأمراض البيطرية . 51 (1): 42-87. doi : 10.1177/0300985813505879 . PMID  24129895.
يوجد في ويكيميديا ​​كومنز وسائط متعددة متعلقة بـ المناعة الكيميائية .
  • المناعة النسيجية في المكتبة الوطنية الأمريكية للطب - العناوين الطبية (MeSH)
  • أطلس البروتين البشري
  • نظرة عامة على المناعة النسيجية - تصف جميع جوانب المناعة النسيجية بما في ذلك تحضير العينة والتلوين واستكشاف الأخطاء وإصلاحها
  • التلوين المناعي الفلوري للأنسجة المغطاة بالبارافين (IF-P)
  • نصيحة IHC 1: استرجاع المستضد - هل ينبغي لي أن أستخدم PIER أم HIER؟ أرشيف 2016-04-23 على موقع Wayback Machine
  • طرق التلوين الهيستوكيميائي - قسم علم الأمراض بجامعة روتشستر
  • بروتوكول التلوين المناعي الكيميائي محفوظ في 15 أكتوبر 2007 على موقع Wayback Machine
تم الاسترجاع من "https://en.wikipedia.org/w/index.php?title=الكيمياء المناعية&oldid=1254270478"
Original text
Rate this translation
Your feedback will be used to help improve Google Translate