علم الأنسجة المرضية

علم الأنسجة المرضية (مصطلح مُركّب من ثلاث كلمات يونانية : ἱστός histos بمعنى "نسيج"، و πάθος pathos بمعنى "معاناة"، و- λογία -logia بمعنى "دراسة") هو الفحص المجهري للأنسجة لدراسة مظاهر الأمراض . وبالتحديد، في الطب السريري، يشير علم الأنسجة المرضية إلى فحص عينة خزعة أو عينة جراحية من قِبل أخصائي علم الأمراض ، بعد معالجة العينة ووضع المقاطع النسيجية على شرائح زجاجية. في المقابل، يفحص علم الخلايا المرضية الخلايا الحرة أو أجزاء الأنسجة الدقيقة (مثل "كتل الخلايا").

يبدأ الفحص النسيجي المرضي للأنسجة بالجراحة أو الخزعة أو التشريح . تُستأصل الأنسجة من الجسم أو النبات ، ثم تُوضع، غالبًا بعد تشريح دقيق من قبل خبير وهي طازجة، في مُثبِّت يُحافظ على الأنسجة ويمنع تحللها . المُثبِّت الأكثر شيوعًا هو الفورمالين المُحايد المُخفَّف بنسبة 10% (ما يُعادل 3.7% وزن/حجم من الفورمالديهايد في ماء مُحايد مُخفَّف، مثل محلول ملحي مُخفَّف بالفوسفات ).

ثم يتم تحضير النسيج للفحص تحت المجهر باستخدام التثبيت الكيميائي أو القطع المجمدة.

إذا تم الحصول على عينة كبيرة، مثلاً من إجراء جراحي، يقوم أخصائي علم الأمراض بفحص عينة الأنسجة واختيار الجزء الذي يُرجّح أن يُسفر عن تشخيص دقيق ومفيد. يُستأصل هذا الجزء لفحصه في عملية تُعرف عادةً بالفحص العياني أو التقطيع. تُقطع العينات الكبيرة لوضع بنيتها التشريحية في مكانها الصحيح داخل الكاسيت. يمكن لبعض العينات (خاصةً الخزعات) أن تخضع لعملية تضمين مسبق في الأجار لضمان التوجيه الصحيح للأنسجة داخل الكاسيت، ثم في الكتلة، ثم على شريحة المجهر التشخيصية. بعد ذلك، تُوضع العينة في كاسيت بلاستيكي لإتمام معظم مراحل العملية المتبقية.

معالجة المقاطع المجمدة

تتمثل الخطوة الأولى في التقييم الأولي لحالة اللمفوما المشتبه بها في تحضير عينة نسيجية بالضغط الخفيف على شريحة زجاجية، ثم صبغها (عادةً بصبغة الهيماتوكسيلين والإيوسين ) لفحصها بالمجهر الضوئي . أما الطريقة الثانية لمعالجة الأنسجة فتُسمى معالجة المقاطع المجمدة . وهي طريقة علمية دقيقة للغاية يقوم بها أخصائي أنسجة مُدرَّب. في هذه الطريقة، يُجمَّد النسيج ويُقطَّع إلى شرائح رقيقة باستخدام ميكروتوم مُثبَّت في جهاز تبريد بدرجة حرارة أقل من الصفر يُسمى جهاز التجميد . تُثبَّت المقاطع المجمدة الرقيقة على شريحة زجاجية، وتُثبَّت فورًا ولمدة قصيرة في مُثبِّت سائل، ثم تُصبغ باستخدام تقنيات صبغ مشابهة لتلك المُستخدمة في المقاطع التقليدية المُضمَّنة في الشمع. من مزايا هذه الطريقة سرعة المعالجة، وقلة المعدات المطلوبة، وقلة الحاجة إلى التهوية في المختبر. أما عيبها فهو رداءة جودة الشريحة النهائية. تُستخدم هذه الطريقة في علم الأمراض أثناء العمليات الجراحية لتحديد بعض الأمور التي قد تُساعد في اختيار الخطوة التالية في الجراحة خلال نفس الجلسة (على سبيل المثال، لتحديد مدى وضوح حافة استئصال الورم أثناء الجراحة).

يمكن تطبيق هذه الطريقة على الشرائح المعالجة بالتثبيت الكيميائي أو شرائح المقاطع المجمدة. ولرؤية النسيج تحت المجهر، تُصبغ المقاطع بصبغة واحدة أو أكثر . والهدف من الصبغ هو إظهار المكونات الخلوية، بينما تُستخدم الصبغات المضادة لتوفير التباين.

أكثر الصبغات استخدامًا في علم الأنسجة هي مزيج من الهيماتوكسيلين والإيوسين (يُختصر غالبًا إلى H&E). يُستخدم الهيماتوكسيلين لتلوين النوى باللون الأزرق ، بينما يُلوّن الإيوسين السيتوبلازم ومصفوفة النسيج الضام خارج الخلوي لمعظم الخلايا باللون الوردي . توجد مئات التقنيات الأخرى التي تُستخدم لتلوين الخلايا بشكل انتقائي. تشمل المركبات الأخرى المستخدمة لتلوين مقاطع الأنسجة: السافرانين ، والأحمر الزيتي O ، والأحمر الكونغولي ، وأملاح الفضة ، والأصباغ الاصطناعية. يشير علم الكيمياء النسيجية إلى علم استخدام التفاعلات الكيميائية بين المواد الكيميائية المخبرية ومكونات الأنسجة. من التقنيات الكيميائية النسيجية الشائعة تفاعل بيرلز الأزرق البروسي ، المستخدم لإظهار ترسبات الحديد في أمراض مثل داء ترسب الأصبغة الدموية . ^{[ 2 ]}

استُخدمت الأجسام المضادة مؤخرًا لتلوين بروتينات ودهون وكربوهيدرات محددة . تُعرف هذه التقنية باسم الكيمياء المناعية النسيجية ، وقد حسّنت بشكل كبير القدرة على تحديد فئات الخلايا بدقة تحت المجهر. تشمل التقنيات المتقدمة الأخرى التهجين الموضعي لتحديد جزيئات الحمض النووي DNA أو RNA . غالبًا ما تتطلب طرق التلوين بالأجسام المضادة هذه استخدام مقاطع نسيجية مجمدة. تُجرى هذه الإجراءات أيضًا في المختبر تحت إشراف دقيق من قِبل أخصائي مختبرات طبية مُدرَّب (أخصائي علم الأنسجة). تُستخدم الكاميرات الرقمية بشكل متزايد لالتقاط صور الأنسجة المرضية.

تُفحص الشرائح النسيجية تحت المجهر بواسطة أخصائي علم الأمراض ، وهو طبيب متخصص مؤهل أكمل برنامجًا تدريبيًا معتمدًا. يُصاغ هذا التشخيص الطبي في تقرير علم الأمراض ، يصف النتائج النسيجية ورأي أخصائي علم الأمراض. في حالة السرطان ، يُمثل هذا التشخيص النسيجي المطلوب لمعظم بروتوكولات العلاج. عند استئصال السرطان ، يُحدد أخصائي علم الأمراض ما إذا كانت حافة الاستئصال الجراحي سليمة أم لا (أي وجود بقايا سرطانية). يتم ذلك باستخدام طريقة " خبز الخبز" أو طريقة CCPDMA للمعالجة. قد تُؤدي التشوهات البصرية المجهرية إلى تشخيص خاطئ للعينات. يُتيح مسح الشرائح استخدام طرق متنوعة لعلم الأمراض الرقمي ، بما في ذلك تطبيق الذكاء الاصطناعي للتفسير.

فيما يلي أمثلة على السمات العامة للنتائج المشبوهة التي يمكن ملاحظتها من التكبير المنخفض إلى التكبير العالي في علم الأنسجة المرضية:

• 
  التوجيه (أقل تكبير): في هذه الحالة، يتم التوجيه بواسطة سطح الجلد (باللون الأخضر). تظهر آفة (باللون الأحمر) ويمكن تمييز حدودها (منتشرة في هذه الحالة).
• 
  النمط المعماري لأي خلايا مشبوهة، وفي هذه الحالة أعشاش الخلايا، بالإضافة إلى مكونات النسيج الضام المتداخل.
• 
  الترتيب الخلوي ، بما في ذلك الازدحام واستقطاب الخلايا (الاتجاهات الشائعة بين الخلايا على الحدود، مثل الاستطالة أو " التراص " في هذه الحالة). ويمكن أيضًا ملاحظة كمية الانقسامات الخلوية على هذا المستوى.
• 
  الخصائص الخلوية الفرعية (قد تتطلب أعلى تكبير)

• علم الأمراض التشريحي
• علم الأمراض الجزيئي
• إجراء الفحص النسيجي بالتجميد
• فني مختبر طبي
• التشريح المجهري بالتقاط الليزر
• قائمة أخصائيي علم الأمراض

• علم الأنسجة المرضية لعنق الرحم - أطلس رقمي (مجموعة الفحص التابعة للوكالة الدولية لأبحاث السرطان)
• مجموعة شرائح علم الأنسجة المرضية الافتراضية - جامعة أيوا