الميكروتوم

📅 آخر تحديث: ٢٧ يوليو ٢٠٢٦
✍️ نُشر في: ٢٧ يوليو ٢٠٢٦
📷 يحتوي على 12 صور
الموسوعة الحرة

الميكروتوم (من الكلمتين اليونانيتين mikros بمعنى "صغير"، و temnein بمعنى "يقطع") هو أداة قطع تُستخدم لإنتاج شرائح رقيقة للغاية من المواد تُعرف بالمقاطع ، وتُسمى هذه العملية بالتقطيع المجهري . للميكروتوم أهمية بالغة في العلوم ، حيث يُستخدم في المجهر لتحضير العينات للملاحظة تحت الضوء النافذ أو الإشعاع الإلكتروني .

تستخدم الميكروتومات شفرات من الفولاذ أو الزجاج أو الماس، وذلك حسب العينة المراد تقطيعها وسُمك المقاطع المطلوبة. تُستخدم الشفرات الفولاذية لتحضير المقاطع النسيجية من أنسجة الحيوانات أو النباتات للفحص المجهري الضوئي . أما الشفرات الزجاجية فتُستخدم لتقطيع المقاطع للفحص المجهري الضوئي ولتقطيع مقاطع رقيقة جدًا للفحص المجهري الإلكتروني . وتُستخدم شفرات الماس الصناعية لتقطيع المواد الصلبة كالعظام والأسنان والمواد النباتية القاسية، وذلك للفحص المجهري الضوئي والإلكتروني على حد سواء. كما تُستخدم شفرات الماس عالية الجودة لتقطيع مقاطع رقيقة للفحص المجهري الإلكتروني.

يُعدّ التقطيع المجهري طريقةً لتحضير شرائح رقيقة من مواد مثل العظام والمعادن والأسنان، وهو بديلٌ للتلميع الكهربائي والطحن الأيوني . ويمكن الحصول على شرائح رقيقة بما يكفي لتقطيع شعرة بشرية عرضياً، حيث يتراوح سمك الشريحة بين 50 نانومتر و100 ميكرومتر .  

تاريخ

رسم تخطيطي للميكروتوم رسمه كامينغز في عام 1770 [ 1 ]

في بدايات تطوير المجهر الضوئي ، كانت تُحضّر مقاطع من النباتات والحيوانات يدويًا باستخدام شفرات الحلاقة. وقد تبيّن أنه لمراقبة بنية العينة قيد الفحص، كان من المهم إجراء قطوع نظيفة ومتكررة بحجم 100  ميكرومتر تقريبًا، تسمح بمرور الضوء. وقد أتاح ذلك مراقبة العينات باستخدام المجاهر الضوئية في وضع النقل.

اخترع جورج آدامز الابن (1750-1795) أحد أوائل الأجهزة المستخدمة في تحضير هذه المقاطع عام 1770، ثم طوره ألكسندر كامينغز . [ 2 ] كان الجهاز يعمل يدويًا، حيث تُثبّت العينة في أسطوانة، وتُقطع المقاطع من أعلى العينة باستخدام ذراع تدوير يدوي. [ 1 ] [ 3 ]

في عام 1835، طور أندرو بريتشارد نموذجًا قائمًا على الطاولة يسمح بعزل الاهتزاز عن طريق تثبيت الجهاز على الطاولة، مما يفصل المشغل عن السكين. [ 4 ]

يُنسب اختراع الميكروتوم أحيانًا إلى عالم التشريح فيلهلم هيس الأب (1865). [ 5 ] [ 6 ] كتب فيلهلم في كتابه "وصف الميكروتوم " (بالألمانية: Beschreibung eines Mikrotoms ):

لقد مكّنني هذا الجهاز من تحقيق دقة عالية في العمل، مما يسمح لي بإنجاز أجزاء لا يمكنني إنجازها يدوياً. وبالتحديد، فقد مكّنني من إنجاز أجزاء متصلة من الأشياء أثناء البحث.

تُنسب مصادر أخرى هذا التطوير إلى عالم وظائف الأعضاء التشيكي يان إيفانجيليستا بوركينيه . [ 7 ] وتصف مصادر عديدة نموذج بوركينيه بأنه أول نموذج يُستخدم عمليًا. [ 8 ] [ 9 ]

يعود الغموض في أصول الميكروتوم إلى حقيقة أن الميكروتومات الأولى كانت مجرد أجهزة قطع، وأن المرحلة التطويرية للأجهزة المبكرة غير موثقة على نطاق واسع.

في أواخر القرن التاسع عشر، أتاح تطوير عينات رقيقة للغاية وذات سماكة ثابتة عن طريق التقطيع المجهري، إلى جانب التلوين الانتقائي لمكونات الخلية أو الجزيئات المهمة، إمكانية رؤية التفاصيل المجهرية. [ 10 ] [ 11 ]

تعتمد غالبية أجهزة الميكروتوم اليوم على تصميم كتلة السكين، حيث تتميز بسكين قابلة للتغيير، وحامل للعينة، وآلية تحريك. في معظم هذه الأجهزة، تبدأ عملية تقطيع العينة بتحريكها فوق السكين، حيث تتحرك آلية التحريك تلقائيًا للأمام لإجراء القطع التالي بالسمك المطلوب. ويتم التحكم في سمك المقطع بواسطة آلية ضبط، مما يتيح تحكمًا دقيقًا.

التطبيقات

الميكروتوم (سي. رايشرت، فيينا، 1905-1915)

أكثر استخدامات الميكروتوم شيوعًا هي:

  • تقنية علم الأنسجة التقليدية : تُثبّت الأنسجة، وتُجفف، وتُنقى، ثم تُغمر في البارافين المذاب ، الذي يُشكّل كتلة صلبة عند تبريده. بعد ذلك، يُقطع النسيج في الميكروتوم إلى شرائح بسماكات تتراوح من 2 إلى 50  ميكرومتر. ومن ثم، يُمكن تثبيت النسيج على شريحة مجهرية، وتلوينه بصبغة مائية مناسبة بعد إزالة البارافين، وفحصه باستخدام المجهر الضوئي. [ 12 ]
  • إجراء التجميد النسيجي : تُجمّد الأنسجة الغنية بالماء وتُقطع وهي مجمدة باستخدام ميكروتوم تجميد أو ميكروتوم- كريوستات ؛ ثم تُصبغ المقاطع وتُفحص بالمجهر الضوئي. هذه التقنية أسرع بكثير من علم الأنسجة التقليدي (5 دقائق مقابل 16 ساعة)، وتُستخدم بالتزامن مع الإجراءات الطبية لتحقيق تشخيص سريع. كما يمكن استخدام المقاطع المجمدة في الكيمياء المناعية النسيجية ، لأن تجميد الأنسجة يوقف تحللها أسرع من استخدام المثبتات ، ولا يُغير تركيبها الكيميائي أو يُخفيه بنفس القدر.
  • تقنية المجهر الإلكتروني : بعد تضمين الأنسجة في راتنج الإيبوكسي، يُستخدم ميكروتوم مزود بشفرة زجاجية أو ماسية عالية الجودة لتقطيع شرائح رقيقة جدًا (عادةً من 60 إلى 100 نانومتر). تُصبغ الشرائح بمحلول مائي لملح معدني ثقيل مناسب، ثم تُفحص باستخدام مجهر إلكتروني نافذ . يُطلق على هذا الجهاز غالبًا اسم الميكروتوم فائق الدقة . يُستخدم الميكروتوم فائق الدقة أيضًا مع شفرته الزجاجية أو شفرة ماسية صناعية لتقطيع شرائح مسحية قبل التقطيع إلى شرائح رقيقة. يبلغ  سمك هذه الشرائح المسحية عادةً من 0.5 إلى 1 ميكرومتر، وتُثبت على شريحة زجاجية وتُصبغ لتحديد المناطق المهمة تحت المجهر الضوئي قبل التقطيع إلى شرائح رقيقة للمجهر الإلكتروني النافذ. غالبًا ما يُجرى التقطيع إلى شرائح رقيقة للمجهر الإلكتروني النافذ باستخدام شفرة ماسية عالية الجودة. بالإضافة إلى تقنيات المجهر الإلكتروني النافذ التقليدية، تُستخدم الميكروتومات فائقة الدقة بشكل متزايد داخل حجرة المجهر الإلكتروني الماسح، بحيث يمكن تصوير سطح العينة ثم إزالته باستخدام الميكروتوم للكشف عن السطح التالي للتصوير. تُسمى هذه التقنية المجهر الإلكتروني الماسح ذو الوجه الكتلي التسلسلي (SBFSEM).
  • تقنية التقطيع المجهري النباتي: تتطلب المواد الصلبة مثل الخشب والعظام والجلد استخدام ميكروتوم انزلاقي . تتميز هذه الميكروتومات بشفرات أثقل ولا يمكنها التقطيع بدقة الميكروتوم العادي.
  • تقنية التحليل الطيفي (وخاصةً التحليل الطيفي بالأشعة تحت الحمراء بتقنية تحويل فورييه ): تتطلب هذه التقنية استخدام مقاطع بوليمرية رقيقة لتمكين شعاع الأشعة تحت الحمراء من اختراق العينة قيد الفحص. من المعتاد تقطيع العينات بسماكة تتراوح بين 20 و100 ميكرومتر. ولتحليل أكثر تفصيلاً لمناطق أصغر بكثير في المقطع الرقيق، يمكن استخدام مجهر التحليل الطيفي بالأشعة تحت الحمراء بتقنية تحويل فورييه لفحص العينة. 
  • تصنيع الأجهزة النانوية السائلة: استُخدمت تقنية القطع المجهري فائق الدقة مؤخرًا لتصنيع قنوات نانوية سائلة لتطبيقات الاستشعار الحيوي. [ 13 ] [ 14 ] . مكّنت هذه الطريقة الدقيقة والمباشرة من الإنتاج المستدام لمئات الشقوق النانوية ثنائية الأبعاد المصنوعة من ثاني كبريتيد الموليبدينوم (MoS2) بأبعاد مقطع عرضي متطابقة وأطوال قابلة للتعديل من بلورات طبقية. كما حُسب ثابت للانحراف عن قانون هوج التجريبي، واستُخدم في تطبيقات استشعار الحمض النووي.

من التطورات الحديثة جهاز الميكروتوم الليزري ، الذي يقطع العينة المستهدفة باستخدام ليزر الفيمتو ثانية  بدلاً من السكين الميكانيكي. هذه الطريقة لا تتطلب أي تلامس ولا تحتاج إلى تقنيات تحضير العينات. يتميز الميكروتوم الليزري بقدرته على تقطيع جميع أنواع الأنسجة تقريبًا في حالتها الطبيعية. وبحسب نوع المادة المراد معالجتها، يمكن الحصول على شرائح بسماكة تتراوح بين 10 و100 ميكرومتر.

يمكن تصنيف فترات التقطيع بشكل رئيسي إلى أحد النوعين التاليين:

  • التقطيع التسلسلي: الحصول على شريط متصل من المقاطع من كتلة البارافين واستخدامها جميعًا للشرائح.
  • أقسام متدرجة: يتم جمعها على أعماق محددة في الكتلة.

شرائح الكلى المقطعة بدقة

تشير شرائح الكلى المقطوعة بدقة إلى مقاطع رقيقة من نسيج الكلى تُحضّر باستخدام الميكروتوم لدراسة وظائف الكلى، واستقلاب الأدوية، أو العمليات المرضية. يستخدم الباحثون هذه الشرائح لدراسة تأثير المواد على وظائف الكلى. [ 15 ] [ 16 ] ويشمل ذلك استقلاب الأدوية [ 17 ] [ 18 ] وتأثيرات المواد السامة. [ 19 ]

الأنواع

مزلقة

ميكروتوم منزلق يستخدم لتقسيم الجليد البحري إلى شرائح رقيقة

الميكروتوم المنزلق هو جهاز تُوضع فيه العينة في حامل ثابت (مكوك)، يتحرك ذهابًا وإيابًا على نصل. في الميكروتومات المنزلقة الحديثة، يُثبّت المكوك على محمل خطي، وهو تصميم يسمح للميكروتوم بقطع العديد من المقاطع الخشنة بسهولة. [ 20 ] من خلال ضبط الزوايا بين العينة ونصل الميكروتوم، يمكن تقليل الضغط المُطبّق على العينة أثناء القطع. [ 20 ] من التطبيقات الشائعة لهذا التصميم من الميكروتوم تحضير العينات الكبيرة، مثل تلك المُضمّنة في البارافين للتحضيرات البيولوجية. يتراوح سُمك القطع النموذجي الذي يمكن تحقيقه على الميكروتوم المنزلق بين 1 و60  ميكرومترًا.

روتاري

ميكروتوم دوار من تصميم قديم

هذا الجهاز هو تصميم شائع للميكروتوم. يعمل هذا الجهاز بحركة دورانية متدرجة بحيث يكون القطع الفعلي جزءًا من الحركة الدورانية. في الميكروتوم الدوار، تُثبّت الشفرة عادةً في وضع رأسي، [ 21 ] وتتحرك كتلة النسيج لأعلى ولأسفل داخل الشفرة، فتقطعها إلى شرائح رقيقة.

مبدأ حركة العينة لإجراء قطع على الميكروتوم الدوار

يوضح الشكل على اليسار مبدأ القطع. من خلال حركة حامل العينة، تُقطع العينة من موضع السكين 1 إلى الموضع 2، حيث يبقى الجزء الطازج على السكين. عند أعلى نقطة في الحركة الدورانية، يتقدم حامل العينة بمقدار يساوي سُمك الجزء المراد قطعه، مما يسمح بصنع الجزء التالي.

يمكن تشغيل دولاب الموازنة في العديد من الميكروتومات يدويًا. وتتمثل ميزة ذلك في إمكانية الحصول على قطع نظيف، حيث تمنع الكتلة الكبيرة نسبيًا لدولاب الموازنة توقف العينة أثناء القطع. غالبًا ما يكون دولاب الموازنة في الطرازات الأحدث مدمجًا داخل غلاف الميكروتوم. يتراوح سُمك القطع النموذجي للميكروتوم الدوار بين 1 و60  ميكرومترًا. بالنسبة للمواد الصلبة، مثل عينة مغمورة في راتنج صناعي، يسمح هذا التصميم من الميكروتوم بالحصول على مقاطع "شبه رقيقة" جيدة بسُمك يصل إلى 0.5  ميكرومتر.

الميكروتوم المبرد

جهاز تقطيع الأنسجة بالتبريد

لتقطيع العينات المجمدة، يمكن تكييف العديد من الميكروتومات الدوارة للتقطيع في حجرة نيتروجين سائل، فيما يُعرف بجهاز الميكروتوم المبرد. تسمح درجة الحرارة المنخفضة بزيادة صلابة العينة، مثلاً عن طريق التحول الزجاجي، مما يُتيح تحضير عينات شبه رقيقة. [ 20 ] مع ذلك، يجب التحكم في درجة حرارة العينة ودرجة حرارة الشفرة لتحسين سُمك العينة الناتج.

الميكروتوم فائق الدقة

شريط من المقاطع الرقيقة للغاية، مُحضّر بتقنية التقطيع المجهري فائق الدقة في درجة حرارة الغرفة، يطفو على الماء داخل قارب سكين ماسي يُستخدم لقطع المقاطع. نصل السكين هو الحافة الموجودة في الطرف العلوي لحوض الماء.

يُعدّ الميكروتوم فائق الدقة أداةً رئيسيةً في تقنية التقطيع فائق الدقة . فهو يسمح بتحضير مقاطع رقيقة للغاية، ويعمل الجهاز بنفس طريقة الميكروتوم الدوراني، ولكن بدقة متناهية في بنيته الميكانيكية. ونتيجةً لهذه الدقة في البنية الميكانيكية، يُستغل التمدد الحراري الخطي للحامل لتوفير تحكم دقيق للغاية في سُمك المقطع. [ 20 ]

تُعدّ هذه المقاطع الرقيقة للغاية مهمةً للاستخدام مع المجهر الإلكتروني النافذ (TEM) والمجهر الإلكتروني الماسح ذي السطح الكتلي التسلسلي (SBFSEM)، كما أنها مهمة أحيانًا للمجهر الضوئي. [ 21 ] يتراوح سُمك هذه المقاطع عادةً بين 40 و100  نانومتر للمجهر الإلكتروني النافذ، وغالبًا ما يتراوح بين 30 و50  نانومتر للمجهر الإلكتروني الماسح ذي السطح الكتلي التسلسلي. كما تُؤخذ مقاطع أكثر سُمكًا تصل إلى 500  نانومتر لتطبيقات المجهر الإلكتروني النافذ المتخصصة أو لمقاطع المسح المجهري الضوئي لاختيار منطقة للمقاطع الرقيقة النهائية. تُستخدم سكاكين الماس (ويُفضّل استخدامها) وسكاكين الزجاج مع الميكروتومات فائقة الدقة. لجمع المقاطع، تُطفى على سطح سائل أثناء قطعها، ثم تُرفع بعناية على شبكات مناسبة لفحص عينات المجهر الإلكتروني النافذ. يُمكن تقدير سُمك المقطع من خلال ألوان تداخل الأغشية الرقيقة للضوء المنعكس، والتي تُرى نتيجةً لسُمك العينة الرقيق للغاية. [ 22 ]

يهتز

يعمل الميكروتوم الاهتزازي عن طريق القطع باستخدام شفرة اهتزازية، مما يسمح بإجراء القطع الناتج بضغط أقل مما هو مطلوب للشفرة الثابتة. يُستخدم الميكروتوم الاهتزازي عادةً للعينات البيولوجية المعقدة. [ 20 ] يتراوح سُمك القطع عادةً بين 30 و500  ميكرومتر للأنسجة الحية، وبين 10 و500  ميكرومتر للأنسجة المثبتة. [ 23 ]

رأى

يُستخدم الميكروتوم المنشاري بشكل خاص للمواد الصلبة كالأسنان والعظام. يحتوي هذا النوع من الميكروتوم على منشار دوار غائر يقوم بتقطيع العينة. يبلغ الحد الأدنى لسمك القطع حوالي 30  ميكرومتر، ويمكن تصنيعه لعينات كبيرة نسبياً. [ 20 ]

الليزر

رسم تخطيطي مفاهيمي لعملية تشغيل الميكروتوم الليزري

يُعدّ الميكروتوم الليزري أداةً للتقطيع دون تلامس. [ 24 ] لا يتطلب تحضير العينة مسبقًا عن طريق التضمين أو التجميد أو التثبيت  الكيميائي، مما يقلل من التشوهات الناتجة عن طرق التحضير. كما يُمكن استخدام هذا التصميم من الميكروتوم مع المواد شديدة الصلابة، مثل العظام والأسنان، بالإضافة إلى بعض أنواع السيراميك. ويتراوح سُمك الشريحة التي يُمكن الحصول عليها بين 10 و100 ميكرومتر، وذلك تبعًا لخصائص مادة العينة .

يعمل الجهاز باستخدام تقنية القطع بواسطة ليزر الأشعة تحت الحمراء. وبما أن الليزر يُصدر إشعاعًا في نطاق الأشعة تحت الحمراء القريبة، فإنه يتفاعل مع المواد البيولوجية ضمن هذا النطاق الموجي. ومن خلال التركيز الدقيق للمسبار داخل العينة، يُمكن الحصول على نقطة تركيز ذات شدة عالية جدًا، تصل إلى تيراواط /سم² . ومن خلال التفاعل غير الخطي للاختراق البصري في منطقة التركيز، يتم فصل المادة في عملية تُعرف بالتفتيت الضوئي. وبتقييد مدة نبضات الليزر إلى نطاق الفيمتوثانية، يتم التحكم بدقة في الطاقة المُستهلكة في المنطقة المستهدفة، مما يُقلل منطقة التفاعل للقطع إلى أقل من ميكرومتر. وخارج هذه المنطقة، يُحدث تطبيق الشعاع فائق القصر ضررًا حراريًا ضئيلًا أو معدومًا لبقية العينة.

يُوجَّه إشعاع الليزر نحو نظام بصري سريع المسح يعتمد على المرايا، مما يسمح بتحديد موضع تقاطع الشعاع ثلاثي الأبعاد، مع إمكانية توجيه الشعاع إلى المنطقة المستهدفة. يُمكّن الجمع بين القدرة العالية ومعدل المسح السريع الماسح الضوئي من قطع مساحات كبيرة من العينة في وقت قصير. كما يُتيح الميكروتوم الليزري إمكانية التشريح المجهري بالليزر للمناطق الداخلية في الأنسجة، والتركيبات الخلوية، وغيرها من التفاصيل الدقيقة.

السكاكين

شفرة سكين ماسية تُستخدم لقطع مقاطع رقيقة للغاية (عادةً من 70 إلى 350  نانومتر) من أجل المجهر الإلكتروني النافذ
الحافة القاطعة لشفرة قابلة للاستخدام لمرة واحدة لجهاز الميكروتوم تحت المجهر

يعتمد اختيار شكل شفرة سكين الميكروتوم على مادة العينات وإعدادها، بالإضافة إلى متطلبات العينة النهائية (مثل سمك القطع وجودته).

أنواع التصميم والقطع

ملامح سكاكين الميكروتوم

بشكل عام، تتميز السكاكين بشكل نصلها، والذي يندرج تحت فئات التصميمات المستوية المقعرة أو ذات الشكل الإسفيني أو ذات الشكل الإزميلي.

تتميز سكاكين الميكروتوم المقعرة المستوية بحدة فائقة، لكنها في الوقت نفسه حساسة للغاية، ولذلك تُستخدم فقط مع العينات اللينة جدًا. [ 21 ] أما السكاكين ذات الشكل الإسفيني فهي أكثر ثباتًا وتُستخدم مع المواد متوسطة الصلابة، مثل الإيبوكسي أو قطع العينات المبردة. وأخيرًا، يزيد الشكل الإزميلي، بحافته غير الحادة، من ثبات السكين، ولكنه يتطلب قوة أكبر بكثير لإتمام القطع.

تتطلب أجهزة الميكروتوم فائقة الدقة استخدام سكاكين زجاجية وماسية؛ لذا فإن عرض القطع للشفرة يبلغ بضعة ملليمترات، وهو أصغر بكثير من عرض القطع في سكاكين الميكروتوم التقليدية. تُصنع السكاكين الزجاجية عادةً بكسر قضبان زجاجية باستخدام أدوات كسر خاصة. يمكن استخدام السكاكين الزجاجية في التحضير الأولي للعينات حتى في الحالات التي تُستخدم فيها السكاكين الماسية للتقطيع النهائي. تحتوي السكاكين الزجاجية عادةً على تجاويف صغيرة مصنوعة من شريط بلاستيكي، تُملأ بالماء للسماح للعينة بالطفو لجمعها لاحقًا. [ 20 ] يمكن دمج شفرات ماسية في هذه التجاويف، مما يسمح باتباع نفس طريقة الجمع.

تقسيم الأنسجة

قبل تقطيع العينات البيولوجية باستخدام الميكروتوم، تُوضع عادةً في مادة تثبيت أكثر صلابة، في عملية تُعرف بالتضمين. ويتم ذلك عن طريق ضخ مادة سائلة حول العينة، مثل البارافين (الشمع) أو الإيبوكسي، والتي توضع في قالب وتُصلّب لاحقًا لتكوين "كتلة" يسهل تقطيعها.

الميل هو زاوية التلامس بين العينة العمودية وشفرة السكين. إذا كانت شفرة السكين متعامدة (ميل = 90 درجة)، يتم القطع مباشرةً باستخدام الضغط، وبالتالي تكون القوى أكبر نسبيًا. أما إذا كانت السكين مائلة، فإن حركتها النسبية تصبح موازية لحركة العينة، مما يسمح بعملية التقطيع. هذا السلوك مهم جدًا للعينات الكبيرة أو الصلبة.

ميل السكين هو الزاوية بين سطح السكين والعينة. وللحصول على أفضل النتائج، يجب اختيار هذه الزاوية بدقة. وتعتمد الزاوية المثلى على هندسة السكين وسرعة القطع والعديد من العوامل الأخرى. إذا تم ضبط الزاوية على الصفر، فقد يصبح القطع غير منتظم، مما يستدعي تغيير موضع السكين لتصحيح هذا الخلل.

إذا كانت الزاوية كبيرة جدًا، فقد تتجعد العينة وقد يتسبب السكين في تفاوتات دورية في سمك القطع. وإذا زادت الزاوية أكثر من ذلك، فقد يتلف نصل السكين نفسه.

تقنية الميكروتوم الحالية

يشهد سوق الميكروتوم [ 25 ] تحولاً كبيراً نتيجة للتطورات السريعة في أتمتة المختبرات والهندسة الدقيقة. وتعتمد المختبرات الحديثة أنظمة ميكروتوم متطورة، مثل الميكروتوم الدوار، والميكروتوم المبرد، والميكروتوم فائق الدقة، لتحسين تحضير عينات الأنسجة.

انظر أيضاً

مراجع

  1. 1 2 هيل، جون (1770). بناء الأخشاب، من مراحل نموها الأولى؛ مُفسَّر بالمجهر، ومُثبت بالتجارب، في أنواع عديدة . لندن: المؤلف. الصفحات 5-11 ، اللوحة الأولى. 
  2. ↑ كويكيت، جون (1848). رسالة عملية في استخدام المجهر . لندن: هيبوليت بايليير. ص 306 ، الفصل الثاني عشر (الميكروتومات وسكاكين الميكروتوم). 
  3. ↑ مجهول (1910). "ميكروتوم من القرن الثامن عشر" . مجلة الجمعية الملكية للمجهر . أكسفورد، إنجلترا: الجمعية الملكية للمجهر: 779-782 .
  4. ↑ جيلبرت مورغان سميث: تطور التقنيات المجهرية النباتية. في: معاملات الجمعية الأمريكية للمجهر 34، العدد 2، 1915، ص 71-129، ( نسخة PDF من المقالة) JSTOR 3221940 doi : 10.2307/3221940 أيقونة الوصول المجاني
  5. ↑ "فيلهلم هيس" . موسوعة بريتانيكا على الإنترنت. موسوعة بريتانيكا . تم الاطلاع عليه بتاريخ 24 مارس 2009 .
  6. ↑ لوكاس م، كلارك ب، توبس ر.س، كابوس ت، تروتز م (2008). "عائلة هيس وإسهاماتها في طب القلب". المجلة الدولية لأمراض القلب . 123 (2): 75-78 . doi : 10.1016/j.ijcard.2006.12.070 . ISSN 0167-5273 . PMID 17433467 .  
  7. ↑ "علم الأنسجة" . موسوعة إنكارتا (msn Encarta ). مؤرشف من الأصل في 25 أبريل 2009. تم الاطلاع عليه في 18 مارس 2009 .
  8. ^ ديتليف جانتن: Handbuch der molekularen Medizin (دليل الطب الجزيئي) ، سبرينغر، ISBN 3-540-64552-7( كتب جوجل )
  9. ^ فيرنر جيرابيك، بيرنهارد د. هاج، جوندولف كيل، فولفغانغ فيجنر (2005): Enzyklopädie Medizingeschichte (موسوعة التاريخ الطبي)، والتر دي جرويتر، ISBN 3-11-015714-4( كتب جوجل )
  10. ↑ إرنست ماير (2002).Die Entwicklung der biologischen Gedankenwelt. ( تطور الفكر البيولوجي ) . سبرينغر. رقم ISBN 978-3-540-43213-5.
  11. ↑ Werner Linß، Werner Linb، Jochen Fanghänel: Histologie: Zytologie، allgemeine Histologie، mikroskopische Anatomie. (علم الأنسجة: علم الخلايا، علم الأنسجة العام، التشريح المجهري) والتر دي جرويتر، 1998، ISBN 3-11-014032-2( كتب جوجل )
  12. ↑ بانكروفت، جون؛ ستيفنز، آلان، محرران. (1982). نظرية وممارسة التقنيات النسيجية ( الطبعة الثانية). مجموعة لونجمان المحدودة. 
  13. ↑ ع، محمد ساجر؛ بهاردواج، أنكيت؛ رادها، بويا؛ فارما، مانوج؛ كيرثي، أشوك (11 يوليو 2025). "الشقوق النانوية ثنائية الأبعاد المُصنّعة من خلال شق مجهري تُمكِّن من الاستشعار الحيوي لجزيء واحد" . مقياس النانو . دوى : 10.1039/D5NR01832C . ISSN 2040-3372 . 
  14. ↑ بهاردواج، أنكيت؛ جوجوي، راج كومار؛ هوارد، ويليام جوشوا؛ تيلوتسون، إيفان؛ جوثام، سوليتي؛ يو، يي؛ هاشيموتو، تيريو؛ جانزن، إيلي؛ إدجار، جيمس هـ.؛ هايغ، سارة ج.؛ كيرثي، أشوك؛ رادها، بويا (2024). "تصنيع قنوات نانوية بمساعدة القطع المجهري فائق الدقة لنقل الأيونات بكفاءة وتوليد الطاقة" . مواد وظيفية متقدمة . 34 (39) 2401988. doi : 10.1002/adfm.202401988 . ISSN 1616-3028 . 
  15. ^ بوستي، فاريبا. فام، باو تونغ؛ أوسترهويس، دوريندا؛ بولسترا، كلاس؛ فان جور، هاري؛ أولينجا، بيتر؛ هيلبراندز، جان لوك (1 يناير 2015). "شرائح الكلى المقطوعة بدقة (PCKS) لدراسة تطور التليف الكلوي وفعالية استهداف الأدوية خارج الجسم الحي " . نماذج وآليات المرض . 8 (10): 1227-1236 . دوى : 10.1242/dmm.020172 . ردمك 1754-8411 . بمك 4610232 . بميد 26112172 .   
  16. ↑ جينوفيز، فيديريكا؛ كارباتي، زولت س.؛ نيلسن، سيغني هـ.؛ كارسدال، مورتن أ. (2016). " شرائح الكلى المقطوعة بدقة كأداة لفهم ديناميكيات إعادة تشكيل المصفوفة خارج الخلوية في التليف الكلوي" . رؤى المؤشرات الحيوية . 11 : 77-84 . doi : 10.4137/BMI.S38439 . PMC 4877083. PMID 27257368 .  
  17. ↑ غراف، إنجي إيه إم دي؛ غروثويس، جيني إم إم؛ أولينغا، بيتر (2007). "شرائح الأنسجة المقطوعة بدقة كأداة للتنبؤ باستقلاب الأدوية الجديدة" . رأي الخبراء في استقلاب الأدوية وعلم السموم . 3 (6): 879-898 . doi : 10.1517/17425255.3.6.879 . PMID 18028031. S2CID 36518505 .  
  18. ↑ دي كانتر، ر.؛ أولينغا، ب.؛ دي جاغر، م.هـ.؛ ميريما، م.ت.؛ ماير، د.ك.ف.؛ غروثيوس، ج.م.م. (1999). "شرائح الأعضاء كنظام اختبار مخبري لاستقلاب الأدوية في الكبد والرئة والكلى البشرية" . علم السموم في المختبر . 13 ( 4-5 ): 737-744 . doi : 10.1016/S0887-2333(99)00047-8 . PMID 20654543 . 
  19. ↑ باريش، آلان ر.؛ غاندولفي، أ. جاي؛ بريندل، كلاوس (1995). "شرائح الأنسجة المقطوعة بدقة: تطبيقات في علم الأدوية وعلم السموم" . علوم الحياة . 57 (21): 1887-1901 . doi : 10.1016/0024-3205(95)02176-J . PMID 7475939 . 
  20. 1 2 3 4 5 6 7 جودرون لانج (2006).هيستوتكنيك. Praxislehrbuch für die Biomedizinische Analytik. (علم الأنسجة: كتاب عملي للطب الحيوي التحليلي) . سبرينغر، فيينا/نيويورك. رقم ISBN 978-3-211-33141-5.
  21. 1 2 3 كلاوس هنكل: Das Schneiden mit dem Mikrotom أرشفة 10 نوفمبر 2009 في آلة Wayback .. ميكروبيولوجيسش فيرينيجونج ميونخ إي. V.، 2006، تمت الزيارة في 15 فبراير 2009
  22. ↑ بيتشي لي د. (1958). "الشرائح الرقيقة: دراسة لسمك الشريحة والتشوه الفيزيائي الناتج أثناء التقطيع المجهري" (ملف PDF) . مجلة علم الأحياء الفيزيائي والكيمياء الحيوية وعلم الخلايا . 4 ( 3): 233-242 . doi : 10.1083/jcb.4.3.233 . PMC 2224471. PMID 13549493 .  
  23. ↑ كرومديك، كارلوس ل. (يناير 2013). " تطوير ميكروتوم للأنسجة الحية: تأملات هاوٍ في مجال الآلات" . زينوبيوتيكا . 43 (1): 2-7 . doi : 10.3109/00498254.2012.724727 . ISSN 0049-8254 . PMID 23009272. S2CID 6108637 .   
  24. ↑ هولجر لوباتشوفسكي 2007: القطع المجهري بالليزر ، دار نشر وايلي-في سي إتش، بيوفوتونيات، ص 49-51 ( ملف PDF مؤرشف بتاريخ 19 يوليو 2011 على موقع Wayback Machine ). doi : 10.1002/opph.201190252أيقونة الوصول المجاني
  25. ↑ "حجم سوق الميكروتوم، الإنتاج، المبيعات، متوسط ​​سعر المنتج، الحصة السوقية، الاستيراد مقابل التصدير - داتا فاغيانيك" . تم الاطلاع عليه بتاريخ 8 أغسطس 2025 .