SmURFP

📅 آخر تحديث: ٣٠ يوليو ٢٠٢٦
✍️ نُشر في: ٣٠ يوليو ٢٠٢٦
📷 يحتوي على 7 صور
الموسوعة الحرة
تُستخدم البروتينات الفلورية لتصوير مراحل دورة الخلية. يظهر تألق IFP2.0-hGem(1/110) باللون الأخضر، مما يُبرز مراحل S/G2 / M. بينما يظهر تألق smURFP-hCdtI(30/120) باللون الأحمر، مما يُبرز مراحل G0 / G1 .

البروتين الفلوري الأحمر فائق الصغر الصغير ( smURFP ) هو فئة من البروتينات الفلورية ذات اللون الأحمر البعيد، تم تطويرها من خلال التطور الموجه من بروتين الفيكوبيلين الموجود في البكتيريا الزرقاء ( Trichodesmium erythraeum ) ، وهو ألفا - ألوفيوكوسيانين . [ 1 ] [ 2 ] [ 3 ] يتطلب ألفا-ألوفيوكوسيانين الطبيعي بروتينًا خارجيًا، يُعرف باسم اللياس ، لربط الكروموفور ، الفيكوسيانوبيلين. لا يوجد الفيكوسيانوبيلين في خلايا الثدييات . تم تطوير smURFP ليرتبط تساهميًا بالفيكوسيانوبيلين دون الحاجة إلى اللياس، ويصدر فلورة ، كما يرتبط تساهميًا بالبيليفيردين (الموجود في جميع خلايا الثدييات) ويصدر فلورة، ويُظهر انزياحًا أزرقًا في الفلورة ليتوافق مع الفلوروفور العضوي ، Cy5 ، ولا يثبط نمو الإشريكية القولونية . تم اكتشاف smURFP بعد 12 جولة من الطفرات العشوائية والفحص اليدوي لـ 10,000,000 مستعمرة بكتيرية .

ملكيات

smURFP هو ثنائي متجانس ذو امتصاص أقصى عند 642 نانومتر وانبعاث أقصى عند  670  نانومتر. تم إنتاج ثنائي متسلسل من smURFP (TDsmURFP) يتمتع بخصائص مشابهة لـ smURFP. يتميز smURFP بثباته العالي، حيث يبلغ نصف عمر تحلل البروتين 17 ساعة في غياب الكروموفور (بيلفيردين) و33 ساعة في وجوده. وهذا يُقارن بنصف عمر تحلل بروتين الفلورسنت الأخضر المُحسَّن ( eGFP ) المُستخلص من قنديل البحر، والذي يبلغ 24 ساعة. [ 4 ] يتميز smURFP بثباته الضوئي العالي، ويتفوق على mCherry [ 5 ] وtdTomato [ 5 ] في الخلايا الحية. تُصدر جزيئات smURFP المفردة ضعف عدد الفوتونات قبل التلاشي الضوئي مقارنةً بصبغات الجزيئات الصغيرة AlexaFluor647 وCyanine5. [ 6 ] يتميز بروتين smURFP بمعامل امتصاص عالٍ للغاية (180,000 M⁻¹ cm⁻¹) وعائد كمي متواضع ( 0.18 ) ، مما يجعله ذا سطوع فيزيائي حيوي مماثل لبروتين eGFP ، وأكثر سطوعًا بمرتين تقريبًا من معظم البروتينات الفلورية الحمراء أو الحمراء البعيدة المشتقة من المرجان . يمتلك smURFP أكبر مقطع عرضي ثنائي الفوتون تم قياسه لبروتين فلوري . يوجد مقطعان عرضيان ذرويان، 1060 و60 GM عند 820 و1196 نانومتر على التوالي. [ 6 ] على الرغم من كونه ثنائيًا متجانسًا، فإن جميع عمليات الاندماج المختبرة في الطرفين الأميني والكربوكسيلي تُظهر توضعًا خلويًا صحيحًا، بما في ذلك الاندماج الصعب مع ألفا-توبولين ولامين B1 ( الشكل ). [ 1 ] سُمي smURFP تيمنًا بالسنافر ، نظرًا لمظهره الأزرق الفاتح في الضوء الأبيض. [ 1 ]

تم تحديد البنية البلورية لبروتين smURFP ( PDB: 7UQA ) واستُخدمت لفهم التطور الموجه . كما قورن بروتين smURFP ببروتين ألفا-ألوفيوكوسيانين الأصلي . [ 6 ] نُشرت البنية البلورية لطفرة من بروتين smURFP ( PDB : 6FZN ) بواسطة فوينزاليدا-فيرنر وآخرون. [ 7 ] تُظهر الطفرات جيوبًا كروموفورية أكبر بكثير وحجمًا بروتينيًا أكبر، مما يؤدي إلى انخفاض في المردود الكمي. [ 6 ] يناقش استعراض نُشر عام 2020 التطبيقات الحديثة لبروتين smURFP كمسبار مُشفّر جينيًا أو خارجي للتصوير الحيوي ، ويناقش مشاكل توافر البيلفيردين . [ 8 ]

تُظهر الصورة بكتيريا الإشريكية القولونية التي تُعبر عن smURFP، وترسيب بكتيريا الإشريكية القولونية ، وإزالة الوسط، وتحلل بكتيريا الإشريكية القولونية ، وارتباط smURFP بـ NiNTA، وإذابة smURFP، وتبادل المحلول المنظم.

تُستخدم جزيئات smURFP كجسيمات نانوية، ومجسات خارجية، واختبارات في المختبر.

 يبلغ قطر جزيئات smURFP الحرة 2-3 نانومتر. ويمكن تصنيع جزيئات smURFP النانوية التي يبلغ قطرها حوالي 10-14 نانومتر في مستحلب  من الزيت والماء ، مع الحفاظ على خاصية التألق. وتتميز هذه الجزيئات النانوية البروتينية المتألقة بثباتها في الفئران الحية، مما يجعلها مفيدة في التصوير الفلوري غير الجراحي للأورام . [ 9 ]

يبقى بروتين smURFP النقي قادراً على البقاء بعد التعرض للموجات فوق الصوتية والتثبيت ، مما يسمح بالتصوير الفلوري لتوصيل الجزيئات الكبيرة بالموجات فوق الصوتية إلى القرنيات . [ 10 ]

يمكن تغليف بروتين smURFP الحر، وهو بروتين نقي وغير مشفر جينياً، داخل الفيروسات واستخدامه للتصوير الفلوري غير الجراحي لتوزيعه الحيوي في الفئران الحية. [ 11 ] [ 12 ] [ 13 ]

يرتبط بروتين smURFP تساهميًا بالبيلفيردين لتفعيل خاصية التألق، وهو في جوهره مستشعر للبيلفيردين. وقد أظهرت الأبحاث أن بروتين smURFP النقي يتمتع بحد كشف يبلغ 0.4 نانومتر للبيلفيردين في مصل الدم البشري . [ 14 ] يسمح بروتين smURFP بإنشاء فحوصات مخبرية للكشف عن نشاط الإنزيم . وقد طُوّر فحص للثرومبين بنطاق كشف يتراوح بين 1.07 أتو مولار و0.01 ملي مولار، وحد كشف يبلغ 0.2 أتو مولار. [ 15 ]

استُخدم ثنائي smURFP المتتالي (TDsmURFP) كعلامة فلورية خارجية لوسم مستقبل Smoothened (SMO) ذي الأغشية السبعة العابرة للغشاء . نُقّيَ TDsmURFP من بكتيريا الإشريكية القولونية ، ثم رُبط بـ SMO بواسطة الاقتران بوساطة إنزيم السورتاز لفرز الخلايا المنشط بالفلورة (FACS) . [ 16 ] تتجنب هذه الطريقة المبتكرة لوسم البروتينات الفلورية الخارجية فحص مواقع إدخال البروتينات المتعددة، والمذيبات العضوية، والتفاعلات الكيميائية التي قد تؤدي إلى طي البروتينات بشكل خاطئ، أو تعطيلها، أو تحللها.

smURFP هو بروتين ذاتي التسمية

البروتين الفلوري الأحمر فائق الصغر الصغير (smURFP) هو بروتين ذاتي الوسم. الركيزة فلورية، وتتألق عند ارتباطها، وتخمد توهج الحمولة الفلورية. يتميز وسم smURFP [ 17 ] بخصائص جديدة لتطوير الأدوات.

البروتين الفلوري الأحمر فائق الصغر (smURFP) هو بروتين ذاتي الوسم، مثل علامات Halo و SNAP و CLIP . تستقبل علامة smURFP ركيزة بيليفيردين مُعدّلة على مجموعة كربوكسيلية بواسطة رابط بولي إيثيلين جلايكول (PEG) مع جزيء الحمولة. على عكس علامات Halo وSNAP وCLIP التي تستخدم الركيزة فقط لربط جزيء الحمولة تساهميًا، فإن البيلفيردين فلوري ، ويتم تفعيل الفلورة عند ارتباطه تساهميًا بعلامة smURFP، مما يسمح بتتبع جزيء الحمولة بالفلورة في نطاق الأشعة تحت الحمراء البعيدة داخل الخلايا الحية. كما يُخمد البيلفيردين حمولة الفلورسين، مما يسمح بالتصوير دون إزالة الركيزة. يُنتج تعديل البيلفيردين على مجموعة كربوكسيلية واحدة جزيئًا متعادلًا يعبر الغشاء الخارجي والنووي للخلايا الثديية . [ 18 ]

توافر الكروموفور في الخلايا والفئران

تم دمج بروتين smURFP وراثيًا مع بروتين لامين B1 البشري لإظهار الغلاف النووي باستخدام التألق. يتغير موضع بروتين لامين B1 خلال مراحل مختلفة من دورة الخلية.

على الرغم من إظهار سطوع بيوفيزيائي مماثل لبروتين eGFP عند معايرة البروتين النقي، إلا أن هذا لم يُلاحظ في الخلايا الحية. يشير هذا إلى عدم وجود كمية كافية من الكروموفور (بيلفيردين) داخل الخلايا. أدت إضافة البيلفيردين إلى زيادة التألق، لكن بروتين smURFP مع البيلفيردين لم يكن مماثلاً لبروتين eGFP. يحتوي البيلفيردين على مجموعتي كربوكسيل عند درجة حموضة متعادلة ، مما يمنع دخوله إلى الخلية. يُعد ثنائي ميثيل إستر البيلفيردين نظيرًا أكثر كراهية للماء ، ويعبر غشاء الخلية بسهولة . يُظهر بروتين smURFP مع ثنائي ميثيل إستر البيلفيردين تألقًا مماثلاً لبروتين eGFP في الخلايا ، وهو أكثر سطوعًا من بروتينات الفيتوكروم الفلورية البكتيرية .

يمكن التمييز بين الكروموفور الحر والكروموفور المرتبط بـ smURFP باستخدام تصوير عمر الفلورة ( FLIM ) في الخلايا الحية. يبلغ عمر فلورة ثنائي ميثيل إستر البيلفيردين الحر (BVMe2) 0.586 نانوثانية، بينما يبلغ عمر فلورة BVMe2 المرتبط بـ smURFP 1.27 نانوثانية . [ 6 ]

لا يُظهر smURFP المُعبر عنه في مزارع الخلايا العصبية تجمعًا في الليزوزومات، وهو ما لوحظ مع البروتين الفلوري mCherry .

في الفئران، يظهر تألق بروتين smURFP في أورام HT1080 المزروعة دون إضافة البيلفيردين الخارجي، لكن شدة التألق أقل من البروتينات الفلورية الحمراء المشتقة من المرجان، mCherry [ 5 ] وmCardinal [ 19 ] . لا يُعد التألق المرئي دائمًا تألقًا قابلًا للاستخدام، ويجب دائمًا مقارنة البروتينات الفلورية ببروتينات فلورية أخرى مفيدة ومشفرة جينيًا. لا يؤدي الحقن الوريدي للبيلفيردين الخارجي أو ثنائي ميثيل إستر البيلفيردين إلى زيادة تألق بروتين smURFP المُعبر عنه في الأورام بعد مرور 1 إلى 24 ساعة. أظهر تحليل الطيف الكتلي أن مجموعات الإستر تُزال بسرعة من ثنائي ميثيل إستر البيلفيردين. أدت إضافة 25 ميكرومول من البيلفيردين أو ثنائي ميثيل إستر البيلفيردين إلى زيادة ملحوظة في تألق الأورام المستأصلة ، ويظهر بروتين smURFP بدون مجموعة كروموفورية. هناك حاجة إلى مزيد من البحث لتحسين توافر الكروموفور في الفئران للحصول على تألق مماثل أو أكبر من البروتينات الفلورية الحمراء المشتقة من المرجان .

إضافة الكروموفور إلى الخلايا

يُذاب ثنائي ميثيل إستر البيلفردين، أو البيلفردين ، أو الفيكوسيانوبيلين في ثنائي ميثيل سلفوكسيد ( DMSO ) بتركيز 5 ملي مولار. يكون المحلول داكنًا جدًا، لذا يُرج جيدًا بالماصة لضمان ذوبانه بالكامل. لا يذوب ثنائي ميثيل إستر البيلفردين في المحاليل المنظمة الشائعة ، بما في ذلك محلول الفوسفات الملحي (PBS) أو محلول هانكس الملحي المتوازن (HBSS). يُضاف 1-5 ميكرومولار من ثنائي ميثيل إستر البيلفردين إلى الوسط أو المحلول المنظم الذي يحتوي على 10% من مصل الأبقار الجنيني (FBS). يُضاف 25 ميكرومولار من البيلفردين (غير نافذ عبر الغشاء) إلى الخلايا . لا يُشبع البيلفردين مواقع smURFP ولا يُحقق أقصى شدة فلورية. يُنصح باستخدام ثنائي ميثيل إستر البيلفردين للحصول على أقصى شدة فلورية. يُحضن smURFP مع الكروموفور لأطول فترة ممكنة لزيادة تراكم البروتين الناتج عن زيادة استقرار البروتين بوجود الكروموفور . اترك الكروموفور لمدة لا تقل عن 3 ساعات، ويُوصى بـ 24 ساعة. أزل الكروموفور ، واغسل العينة بوسط يحتوي على 10% من مصل بقري جنيني ، ثم صوّرها في وسط خالٍ من الفينول الأحمر أو محلول التصوير .

أجهزة الاستشعار الحيوية المشفرة جينياً بواسطة smURFP

يُظهر التصوير بالأشعة تحت الحمراء البعيدة والقريبة بتقنية FUCCI ولادة خلية متعددة النوى، وهو أمر شائع في العديد من الخلايا السرطانية.

مستشعر كيناز بتقنية نقل طاقة الرنين الفلوري (FRET) . يُعدّ بروتين smURFP مستقبلًا مفيدًا للعديد من البروتينات الفلورية الحمراء نظرًا للتداخل الطيفي. يسمح بروتين stagRFP، المصمم بعناية، بإنشاء مستشعرات FRET بسهولة أكبر . يُعدّ stagRFP مانحًا مفيدًا لتقنية FRET للمستقبل smURFP ذي اللون الأحمر البعيد، وقد تم إنشاء مُبلِّغ FRET لكيناز ERK بمتوسط ​​استجابة يبلغ حوالي 15%. سمح المستشعر الجديد بالتصوير المتزامن لثلاثة كينازات، Src و Akt و ERK ، في خلية واحدة. [ 20 ] تصوير دورة الخلية بالفلورة . طوّر أتسوكي مياواكي وزملاؤه، في عمل رائد، مؤشر دورة الخلية القائم على اليوبيكويتين الفلوري (FUCCI)، والذي يُتيحتصوير دورة الخلية بالفلورة . في الأصل، تم دمج بروتين فلوري أخضر ، mAG، مع hGem(1/110)، وبروتين فلوري برتقالي(mKO 2 ) مع hCdt1(30/120). تجدر الإشارة إلى أن هذه البروتينات المدمجة عبارة عن أجزاء تحتوي على إشارة توطين نووي ومواقع يوبيكويتين للتحلل، ولكنها ليست بروتينات وظيفية.يُصنع البروتين الفلوري الأخضر خلال طور S أو G2 أو M ويتحلل خلال طور G0 أو G1 ، بينما يُصنع البروتين الفلوري البرتقالي خلال طور G0 أو G1 ويُدمر خلال طور S أو G2 أو M. [ 21 ] تم تطوير FUCCI للأشعة تحت الحمراء البعيدة والقريبة باستخدام بروتين فلوري مشتق من البكتيريا الزرقاء (smURFP) وبروتين فلوري مشتق من البكتيريوفيتوكروم ( يمكن مشاهدة الفيديو على هذا الرابط ). [ 1 ]

smURFP (أزرق فاتح) معبر عنه في E. coli .

مراجع

  1. 1 2 3 4 رودريغيز، إريك أ.؛ تران، جيرالدين ن.؛ غروس، لاري أ.؛ كريسب، جيسيكا ل.؛ شو، شياوكون؛ لين، جون ي.؛ تسين، روجر ي. (2016-08-01). "بروتين فلوري أحمر بعيد مُتطور من بروتين فيكوبيلوبروتين بكتيري أزرق" . Nature Methods . 13 (9): 763–9 . doi : 10.1038/nmeth.3935 . ISSN 1548-7105 . PMC 5007177. PMID 27479328 .   
  2. ↑ براءة اختراع أمريكية رقم 20180201655A1 ، رودريغيز، إريك أ.؛ تران، جيرالدين ن.؛ لين ، جون ي . وآخرون، "بروتينات وسم متطورة للوحدة الفرعية ألفا من الألوفيوكوسيانين (smURFPs)"، صدرت بتاريخ 10 ديسمبر 2019 . 
  3. ↑ ماتسون، سارة؛ تران، جيرالدين ن.؛ رودريغيز، إريك أ. (2023)، "التطور الموجه للبروتينات الفلورية في البكتيريا" ، في شارما، مايانك (محرر)، البروتينات الفلورية ، المجلد 2564، نيويورك، نيويورك: سبرينغر الولايات المتحدة، الصفحات 75-97 ، doi : 10.1007/978-1-0716-2667-2_4 ، ISBN   978-1-0716-2666-5PMID 36107338 ، تم الاطلاع عليه بتاريخ 16 سبتمبر 2022 
  4. ↑ ستاك، جيه إتش؛ ويتني، إم؛ روديمز، إس إم؛ بولوك، بي إيه (1 ديسمبر 2000). "نظام وسم قائم على اليوبيكويتين للتحكم في استقرار البروتين". مجلة نيتشر للتكنولوجيا الحيوية . 18 (12): 1298-1302 . doi : 10.1038/82422 . ISSN 1087-0156 . PMID 11101811. S2CID 23741831 .   
  5. 1 2 3 شانر، ناثان سي؛ كامبل، روبرت إي؛ شتاينباخ، بول أ؛ جيبمانز، بن إن جي؛ بالمر، إيمي إي؛ تسين، روجر واي. (2004-12-01). "بروتينات فلورية أحادية محسّنة باللون الأحمر والبرتقالي والأصفر مشتقة من البروتين الفلوري الأحمر من نوع Discosoma sp.". مجلة Nature Biotechnology . 22 (12): 1567–1572 . doi : 10.1038/nbt1037 . ISSN 1087-0156 . PMID 15558047. S2CID 205272166 .   
  6. 1 2 3 4 5 مايتي، أتانو؛ بافالو، كوزمو ز.؛ سوراب، سوميا؛ مونتيسينوس-فرانجولا، فيليبي؛ هاشي، جاستن س.؛ كونلون، ويليام ج.؛ تران، جيرالدين ن.؛ حسن، بكر؛ والترز، كايلي ج.؛ دروبيزيف، ميخائيل؛ مورنر، دبليو إي؛ غوش، بارثو؛ ماتسو، هيروشي؛ تسين، روجر واي.؛ لين، جون واي. (2023-07-12). "التوصيف البنيوي والضوئي الفيزيائي للبروتين الفلوري الأحمر الصغير" . نيتشر كوميونيكيشنز . 14 (1): 4155. Bibcode : 2023NatCo..14.4155M . doi : 10.1038/s41467-023-39776-9 . ISSN 2041-1723 . PMC 10338489. PMID 37438348 .​   
  7. ↑ فوينزاليدا-فيرنر، جيه بي؛ يانوفسكي، آر؛ ميشرا، كيه؛ وايدنفيلد، آي؛ نيسينغ، دي؛ نتزياكريستوس، في؛ ستيل، إيه سي (ديسمبر 2018). "البنية البلورية لبروتين فيكوبيلوبروتين مرتبط بالبيلفيردين: الترابط بين تكوين القليل والصبغة". مجلة البيولوجيا التركيبية . 204 (3): 519-522 . doi : 10.1016/j.jsb.2018.09.013 . PMID 30287387. S2CID 52919137 .  
  8. ↑ مونتيسينوس-فرانجولا، فيليبي؛ لين، جون واي؛ رودريغيز، إريك أ. (16 نوفمبر 2020). "البروتينات الفلورية للتصوير الحيوي، أين البيلفيردين؟" . معاملات الجمعية الكيميائية الحيوية . 48 (6): 2657-2667 . doi : 10.1042/BST20200444 . ISSN 0300-5127 . PMID 33196077. S2CID 226971864 .   
  9. ↑ آن، فيفي؛ تشين، ناندي؛ كونلون، ويليام جيه؛ هاشي، جاستن إس؛ شين، جينغكي؛ أراس، عمر؛ رودريغيز، إريك أ؛ تينغ، ريتشارد (فبراير 2020). "جسيمات نانوية صغيرة من البروتين الفلوري الأحمر الفائق كمجسات خارجية لتصوير الأورام غير الجراحي في الجسم الحي" . المجلة الدولية للجزيئات الحيوية الكبيرة . 153 : 100-106 . doi : 10.1016/j.ijbiomac.2020.02.253 . PMC 7493049. PMID 32105698 .  
  10. ↑ ألموغبيل، هناء ح.؛ مونتيسينوس-فرانجولا، فيليبي؛ دازينسكي، كاميل؛ كونلون، ويليام ج.؛ هاشي، جاستن س.؛ كورازا، جيافانا؛ رودريغيز، إريك أ.؛ زديريك، فيسنا (2022-08-01). "الموجات فوق الصوتية العلاجية لتوصيل الجزيئات الكبيرة موضعيًا إلى القرنية" . مجلة علوم وتكنولوجيا الرؤية الانتقالية . 11 (8): 23. doi : 10.1167/tvst.11.8.23 . ISSN 2164-2591 . PMC 9424970. PMID 35998058. S2CID 251743679 .    
  11. ↑ هربرت، فابيان سي.؛ بروهلين، أوليفيا ر.؛ غالبريث، تايلر؛ بنجامين، كانداس؛ رييس، سيزار أ.؛ لوزورياغا، مايكل أ.؛ شهرياركيفيشاهي، أرزو؛ غاسنسيمث، جيريميا ج. (20 مايو 2020). "التغليف فوق الجزيئي للبروتينات الفلورية فائقة الأشعة تحت الحمراء الصغيرة في جسيمات نانوية شبيهة بالفيروسات لعوامل التصوير الحيوي غير الجراحية". كيمياء الاقتران الحيوي . 31 (5): 1529-1536 . doi : 10.1021/acs.bioconjchem.0c00190 . PMID 32343135 . 
  12. ↑ هربرت، فابيان سي.؛ بروهلين، أوليفيا ر.؛ غالبريث، تايلر؛ بنجامين، كانداس؛ رييس، سيزار أ.؛ لوزورياغا، مايكل أ.؛ شهرياركيفيشاهي، أرزو؛ غاسنسيمث، جيريميا ج. (2020-05-07). "التغليف فوق الجزيئي للبروتينات الفلورية فائقة الأشعة تحت الحمراء الصغيرة في جسيمات نانوية شبيهة بالفيروسات لعوامل التصوير الحيوي غير الجراحية" . كيمياء الاقتران الحيوي . 31 (5): 1529-1536 . doi : 10.1021/acs.bioconjchem.0c00190 . ISSN 1043-1802 . PMID 32343135 .  
  13. ^ تراشي، إيكيدا؛ دورباكز، ماتيوز Z .؛ تراشي، أوريكيدا؛ ويجيسوندارا، ياليني هـ؛ ايرمان، ريان ن.؛ تشيف، أليسا سي؛ داروين، كاري ب. هربرت، فابيان C.؛ غادفي، جاشكران؛ نيسكو، نيكول جيه دي؛ نيلسن، ستيفن O.؛ جاسنسميث ، ارميا ج. (25/04/2023). "التجميع الذاتي لجسيم يشبه فيروس الفلورسنت للتصوير في الأنسجة ذات التألق الذاتي العالي" . مجلة كيمياء المواد ب . 11 (20): 4445-4452 . دوى : 10.1039/D3TB00469D . ISSN 2050-7518 . بميد 37144595 .  
  14. ^ تشو، شياكينغ؛ فنغ، شورين. جيانغ، تشونغ يى؛ تشانغ، هوايو؛ وانغ، يايان؛ يانغ، هايتاو؛ وانغ ، زيفانغ (أغسطس 2021). "جهاز استشعار بيولوجي فلوري أحمر للغاية للكشف السريع والحساس للغاية عن البيليفيردين" . أناليتيكا كيميكا أكتا . 1174 338709. بيب كود : 2021AcAC.117438709Z . دوى : 10.1016/j.aca.2021.338709 . بميد 34247733 . S2CID 235796133 .  
  15. ↑ تشانغ، هوايو؛ يانغ، لو؛ تشو، شياكينغ؛ وانغ، يانيان؛ يانغ، هايتاو؛ وانغ، زيفانغ (13 مايو 2020). "مستشعر حيوي سريع وحساس للغاية للثرومبين يعتمد على بروتين ثلاثي الوظائف مصمم بعقلانية". مواد الرعاية الصحية المتقدمة . 9 (12) 2000364. doi : 10.1002/adhm.202000364 . ISSN 2192-2640 . PMID 32406199. S2CID 218633091 .   
  16. ↑ ديشباندي، إيشان؛ ليانغ، جياهاو؛ هيدين، دانييل؛ روبرتس، كيلسي جيه؛ تشانغ، يونشياو؛ ها، بيتي؛ ​​لاتوراكا، نعومي آر؛ فاوست، برايان؛ درور، رون أو؛ بيتشي، فيليب إيه؛ مايرز، بنجامين آر. (يوليو 2019). "تحفيز مُنعّم بواسطة ستيرولات الغشاء يُحفّز نشاط مسار هيدجهوج" . نيتشر . 571 (7764): 284-288 . doi : 10.1038/ s41586-019-1355-4 . ISSN 1476-4687 . PMC 6709672. PMID 31263273 .   
  17. ↑ ماتشادو، جون-هانسون؛ تينغ، ريتشارد؛ لين، جون واي؛ رودريغيز، إريك أ. (2021). " بروتين ذاتي الوسم قائم على البروتين الفلوري الأحمر الصغير للغاية، smURFP" . مجلة RSC للكيمياء الحيوية . 2 (4): 1221-1226 . doi : 10.1039/D1CB00127B . ISSN 2633-0679 . PMC 8341759. PMID 34458834 .   
  18. ↑ ماتشادو، جون-هانسون؛ تينغ، ريتشارد؛ لين، جون واي؛ رودريغيز، إريك أ. (2021). " بروتين ذاتي الوسم قائم على البروتين الفلوري الأحمر الصغير للغاية، smURFP" . مجلة RSC للكيمياء الحيوية . 2 (4): 1221-1226 . doi : 10.1039/D1CB00127B . ISSN 2633-0679 . PMC 8341759. PMID 34458834 .   
  19. ↑ تشو، جون؛ هاينز، راسل د؛ كوربيل، ستيفان ي؛ لي، بينغبينغ؛ غونزاليس-غونزاليس، إميليو؛ بورغ، جون س؛ عطائي، نيلوفر ج؛ لام، إيمي ج؛ كرانفيل، باولا ج (2014). "التصوير الحيوي غير الجراحي لتمايز الخلايا باستخدام بروتين فلوري قابل للإثارة باللون الأحمر الساطع" . Nature Methods . 11 (5): 572–578 . doi : 10.1038/nmeth.2888 . PMC 4008650. PMID 24633408 .  
  20. ↑ مو، غاري سي إتش؛ بوسنر، كلارا؛ رودريغيز، إريك أ.؛ صن، تينغكيان؛ تشانغ، جين (ديسمبر 2020). " بروتين فلوري أحمر مُحسَّن بشكل منطقي يُوسِّع نطاق استخدام أجهزة الاستشعار الحيوية بتقنية نقل طاقة الرنين الفلوري (FRET)" . مجلة نيتشر كوميونيكيشنز . 11 (1): 1848. رمز Bibcode : 2020NatCo..11.1848M . doi : 10.1038/s41467-020-15687-x . ISSN 2041-1723 . PMC 7160135. PMID 32296061 .   
  21. ^ ساكو-ساوانو، أساكو؛ كوروكاوا، هيروشي؛ موريمورا، توشيفومي؛ هانيو، آكي؛ حماة، هيروشي؛ أوساوا، هاتسوكي؛ كاشيواجي، ساوري؛ فوكامي، كيوكو؛ مياتا ، تاكاكي (2008/02/08). “تصور الديناميكيات الزمانية المكانية لتقدم دورة الخلية متعددة الخلايا” . خلية . 132 (3): 487-498 . دوى : 10.1016/j.cell.2007.12.033 . ردمك 1097-4172 . بميد 18267078 . S2CID 15704902 .