صبغة حمض البيروديك-شيف

يُعدّ تفاعل حمض البيروديك-شيف ( PAS ) طريقة تلوين تُستخدم للكشف عن السكريات المتعددة (مثل الجليكوجين ) والمواد المخاطية (مثل البروتينات السكرية ، والدهون السكرية، والميوسينات) في الأنسجة. يُؤكسد تفاعل حمض البيروديك مجموعات الديول المتجاورة في هذه السكريات ، وعادةً ما يُؤدي إلى كسر الرابطة بين ذرتي كربون متجاورتين غير مشاركتين في الرابطة الجليكوسيدية أو إغلاق الحلقة في حلقة وحدات السكريات الأحادية التي تُشكّل جزءًا من السكريات المتعددة الطويلة، مُكوّنًا زوجًا من الألدهيدات عند الطرفين الحرّين لكل حلقة سكر أحادي مكسورة . يجب ضبط ظروف الأكسدة بدقة كافية لمنع أكسدة الألدهيدات بشكل أكبر. تتفاعل هذه الألدهيدات بعد ذلك مع كاشف شيف لتُعطي لونًا أرجوانيًا داكنًا. غالبًا ما يُستخدم مُلوّن قاعدي مناسب كمُلوّن مُعاكس .

• صبغة PAS دياستاز (PAS-D) هي صبغة PAS تستخدم مع الدياستاز ، وهو إنزيم يقوم بتكسير الجليكوجين.

• يستخدم ألسيان الأزرق / حمض البيروديك - شيف (AB/PAS أو AB-PAS) ألسيان الأزرق قبل خطوة PAS.

يستخدم تلوين PAS بشكل أساسي لتلوين الهياكل التي تحتوي على نسبة عالية من جزيئات الكربوهيدرات الكبيرة ( الجليكوجين ، والبروتين السكري ، والبروتيوغليكانات )، والتي توجد عادة في الأنسجة الضامة ، والمخاط ، والطبقة السكرية ، والصفائح القاعدية .

يمكن استخدام صبغة PAS للمساعدة في تشخيص العديد من الحالات الطبية:

• مرض تخزين الجليكوجين (مقارنة باضطرابات التخزين الأخرى).
• الأورام الغدية السرطانية ، والتي غالباً ما تفرز الميوسينات المحايدة.
• مرض باجيت في الثدي . ^{[ 1 ]}
• ساركوما الأجزاء الرخوة السنخية . ^{[ 2 ]}
• تلوين الخلايا البلعمية في مرض ويبل . ^{[ 3 ]}
• يمكن استخدامه لتشخيص نقص ألفا-1 أنتيتريبسين إذا كانت خلايا الكبد المحيطة بالبوابة الكبدية إيجابية التلوين.
• توجد تجمعات من الخلايا الليمفاوية الإيجابية لصبغة PAS في البشرة في حالة الفطار الفطري ومتلازمة سيزاري ، وتسمى هذه التجمعات بالخراجات الدقيقة لبوترييه.
• ساركوما إيوينغ
• ابيضاض الدم النخاعي ، وهو نوع من ابيضاض الدم يصيب خلايا الدم الحمراء غير الناضجة. تتلون هذه الخلايا بلون فوشيا زاهٍ.
• داء البروتين السنخي الرئوي .
• في حالة العدوى الفطرية ، تتلون جدران خلايا الفطريات باللون الأرجواني؛ وهذا لا ينطبق إلا على الفطريات الحية. في المقابل، يصبغ صبغ غروكوت الفضي الميثينامين (GMS) كلاً من الكائنات الفطرية الحية والميتة.
• يستخدم لتحديد الجليكوجين في عينات خزعة الرئة للرضع المصابين بتليف الرئة الخلالي (PIG).
• يمكن استخدامه لتسليط الضوء على شوائب الدهون المتشابكة للغاية في داء ليبوفوسين السيرويد (NCL).

يمكن تأكيد وجود الجليكوجين في مقطع نسيجي باستخدام إنزيم الدياستاز لهضم الجليكوجين، ثم مقارنة مقطع PAS مهضوم بالدياستاز مع مقطع PAS طبيعي. ستظهر الشريحة غير المعالجة بالدياستاز تلوينًا أرجوانيًا في مواضع وجود الجليكوجين في المقطع النسيجي. أما الشريحة المعالجة بالدياستاز فستفتقر إلى أي تلوين PAS إيجابي في تلك المواضع.

يُستخدم تلوين PAS أيضًا لتلوين السليلوز . ومن الأمثلة على ذلك البحث عن الأجهزة الطبية المزروعة المصنوعة من السليلوز غير المؤكسد.

إذا كان سيتم إجراء صبغة PAS على الأنسجة، فإن المثبت الموصى به هو الفورمالين المتعادل المخفف بنسبة 10% أو محلول بوين . أما بالنسبة لمسحات الدم ، فإن المثبت الموصى به هو الميثانول . لا يُنصح باستخدام الغلوتارالدهيد لأن مجموعات الألدهيد الحرة قد تكون متاحة للتفاعل مع كاشف شيف ، مما قد يؤدي إلى نتائج إيجابية خاطئة . ^{[ 4 ]}

• تفاعل PAS