اختبار كومبس

اختبار كومبس المباشر وغير المباشر ، المعروف أيضًا باختبار الأضداد المضادة للغلوبولين ( AGT )، هما اختباران دمويان يُستخدمان في علم المناعة الدموية . يكشف اختبار كومبس المباشر عن الأجسام المضادة الملتصقة بسطح خلايا الدم الحمراء. ^{[ 1 ]} ولأن هذه الأجسام المضادة قد تُدمر خلايا الدم الحمراء أحيانًا، فقد تُسبب فقر الدم ؛ لذا يُساعد هذا الاختبار في توضيح الحالة. أما اختبار كومبس غير المباشر، فيكشف عن الأجسام المضادة التي تسبح بحرية في الدم. ^{[ 1 ]} قد تُهاجم هذه الأجسام المضادة أنواعًا مُعينة من خلايا الدم الحمراء؛ ويُمكن إجراء هذا الاختبار لتشخيص ردود الفعل التحسسية لنقل الدم . ^{[ 1 ]}

يُستخدم اختبار كومبس المباشر للكشف عن فقر الدم الانحلالي المناعي الذاتي ، وهي حالة يقوم فيها الجهاز المناعي بتكسير خلايا الدم الحمراء ، مما يؤدي إلى فقر الدم. يكشف هذا الاختبار عن وجود أجسام مضادة أو بروتينات متممة مرتبطة بسطح خلايا الدم الحمراء. ولإجراء الاختبار، تُؤخذ عينة دم، وتُغسل خلايا الدم الحمراء (لإزالة بلازما المريض والأجسام المضادة غير المرتبطة بها)، ثم تُحضن مع مضاد الغلوبولين البشري (كاشف كومبس). إذا تجمعت خلايا الدم الحمراء بعد ذلك ، تكون نتيجة الاختبار إيجابية، وهو مؤشر مرئي على ارتباط الأجسام المضادة أو بروتينات المتممة بسطح خلايا الدم الحمراء، مما قد يُسبب تدميرها.

يُستخدم اختبار كومبس غير المباشر في الفحوصات قبل الولادة للنساء الحوامل، وفي الفحوصات التي تُجرى قبل نقل الدم. يكشف هذا الاختبار عن وجود أجسام مضادة لخلايا الدم الحمراء الغريبة. في هذه الحالة، يُستخلص المصل من عينة دم مأخوذة من المريض، ثم يُحضن مع خلايا دم حمراء غريبة ذات خصائص مستضدية معروفة . وأخيرًا، يُضاف الغلوبولين المضاد للخلايا البشرية. إذا حدث التراص، تكون نتيجة اختبار كومبس غير المباشر إيجابية. ^{[ 2 ]}

يعتمد اختبارا كومبس على ارتباط الأجسام المضادة البشرية بالأجسام المضادة البشرية، وعادةً ما تكون من نوع IgG أو IgM . تُنتَج هذه الأجسام المضادة البشرية بواسطة خلايا البلازما في الحيوانات غير البشرية بعد تحصينها ببلازما بشرية . بالإضافة إلى ذلك، ترتبط هذه الأجسام المضادة البشرية أيضًا بالأجسام المضادة البشرية التي قد تكون مثبتة على مستضدات على سطح خلايا الدم الحمراء . في ظروف أنبوب الاختبار المناسبة، يمكن أن يؤدي ذلك إلى تكتل خلايا الدم الحمراء، مما يسمح برؤية التكتلات الناتجة. إذا لوحظ التكتل، يكون اختبار كومبس إيجابيًا؛ وإذا لم يُلاحظ، يكون الاختبار سلبيًا. ^{[ 3 ]}

تشمل الاستخدامات السريرية الشائعة لاختبار كومبس تحضير الدم لنقل الدم في اختبار التوافق ، والأجسام المضادة غير النمطية في بلازما دم النساء الحوامل كجزء من الرعاية السابقة للولادة ، والكشف عن الأجسام المضادة لتشخيص فقر الدم الانحلالي المناعي . ^{[ 4 ]}

تُجرى اختبارات كومبس باستخدام كريات الدم الحمراء أو المصل (مباشرةً أو غير مباشرةً، على التوالي) من عينات الدم الوريدي الكامل التي تُسحب من المرضى عن طريق بزل الوريد . يُنقل الدم الوريدي إلى مختبر (أو بنك دم)، حيث يقوم فنيون متخصصون بإجراء اختبارات كومبس. ويُقيّم الطبيب الذي طلب اختبار كومبس الأهمية السريرية للنتيجة، ربما بمساعدة أخصائي أمراض الدم في المختبر .

يُستخدم اختبار كومبس المباشر، المعروف أيضًا باسم اختبار الأضداد المباشر (DAT)، للكشف عما إذا كانت الأضداد أو عوامل نظام المتممة قد ارتبطت بمستضدات سطح كريات الدم الحمراء . ^{[ 5 ]} لا يُشترط إجراء اختبار الأضداد المباشر قبل نقل الدم ^{[ 6 ]} ، ولكن قد تُجريه بعض المختبرات. وقبل نقل الدم، يُجرى غالبًا اختبار كومبس غير المباشر .

الاستخدامات

يُستخدم اختبار كومبس المباشر سريريًا عند الاشتباه في فقر الدم الانحلالي المناعي (تدمير كريات الدم الحمراء بواسطة الأجسام المضادة). تشير نتيجة اختبار كومبس الإيجابية إلى أن آلية مناعية تهاجم كريات الدم الحمراء لدى المريض . قد تكون هذه الآلية مناعة ذاتية ، أو مناعة ضد الأجسام المضادة ، أو آلية مناعية ناتجة عن دواء. ^{[ 3 ]}

أمثلة على انحلال الدم المناعي الذاتي

• مرض انحلال الدم عند حديثي الولادة (المعروف أيضًا باسم HDN أو داء انحلال الدم الجنيني)
  • مرض انحلال الدم لدى حديثي الولادة Rh D (المعروف أيضًا باسم مرض Rh)
  • مرض انحلال الدم لدى حديثي الولادة (قد تكون نتيجة اختبار كومبس المباشر إيجابية بشكل ضعيف فقط)
  • مرض انحلال الدم المضاد لـ Kell عند حديثي الولادة
  • مرض انحلال الدم لدى حديثي الولادة من النوع Rh c
  • مرض انحلال الدم Rh E عند حديثي الولادة
  • عدم توافق فصائل الدم الأخرى (RhC، Rhe، Kidd، Duffy، Lewis، MN، P وغيرها)
• تفاعلات نقل الدم الانحلالية المناعية الذاتية

أمثلة على انحلال الدم المناعي الذاتي/انحلال الدم المناعي

• فقر الدم الانحلالي المناعي الذاتي للأجسام المضادة الدافئة
  • مجهول السبب
  • الذئبة الحمامية الجهازية
  • متلازمة إيفانز (الأجسام المضادة للصفيحات والأجسام المضادة الانحلالية)
• فقر الدم الانحلالي المناعي الناتج عن الأجسام المضادة للبرد
  • متلازمة الهيماغلوتينين الباردة مجهولة السبب
  • والدنستروم ماكروغلوبولين الدم
  • داء كثرة الوحيدات العدوائية
  • بيلة الهيموغلوبين الباردة الانتيابية (نادرة)

انحلال الدم المناعي الناجم عن الأدوية

• ميثيل دوبا (فرط الحساسية من النوع الثاني بوساطة IgG)
• البنسلين (جرعة عالية)
• الكينيدين (تنشيط مسار المتممة الكلاسيكي بواسطة IgM ومركب الهجوم الغشائي، MAC)

( وسيلة تذكيرية لتذكر أن اختبار DAT يختبر خلايا الدم الحمراء ويستخدم لاختبار الرضع للكشف عن مرض انحلال الدم عند حديثي الولادة هي: R h D isease ; R = خلايا الدم الحمراء، D = DAT.)

يُستخدم اختبار كومبس غير المباشر، المعروف أيضًا باسم اختبار الأضداد غير المباشر (IAT)، للكشف عن تفاعلات الأجسام المضادة مع المستضدات في المختبر . ويُستخدم للكشف عن تراكيز منخفضة جدًا من الأجسام المضادة الموجودة في بلازما/مصل المريض قبل نقل الدم. في رعاية ما قبل الولادة، يُستخدم اختبار الأضداد غير المباشر لفحص النساء الحوامل بحثًا عن الأجسام المضادة التي قد تُسبب مرض انحلال الدم لدى حديثي الولادة . كما يُمكن استخدام اختبار الأضداد غير المباشر لاختبارات التوافق ، وتحديد الأجسام المضادة، وتحديد النمط الظاهري لخلايا الدم الحمراء، ودراسات المعايرة.

يُستخدم كاشف كومبس (المعروف أيضًا باسم مضاد غلوبولين كومبس أو مضاد الغلوبولين البشري ) في كلٍ من اختبار كومبس المباشر واختبار كومبس غير المباشر. ويتم إنتاجه عن طريق حقن الغلوبولين البشري في الحيوانات، التي تُنتج بدورها أجسامًا مضادة متعددة النسائل مُخصصة للغلوبولينات المناعية البشرية وعوامل نظام المتممة البشري. ويمكن استخدام كواشف كومبس أكثر تخصصًا أو أجسام مضادة أحادية النسيلة .

ترتبط الأجسام المضادة من نوع IgM و IgG بقوة مع مستضداتها المكملة. وتكون الأجسام المضادة من نوع IgG أكثر تفاعلاً عند درجة حرارة 37 درجة مئوية. يسهل الكشف عن الأجسام المضادة من نوع IgM في المحلول الملحي عند درجة حرارة الغرفة ، وذلك لقدرتها على الارتباط بين كريات الدم الحمراء نظرًا لكبر حجمها، مما يؤدي إلى تكوين ما يُعرف بالتراص . أما الأجسام المضادة من نوع IgG فهي أصغر حجمًا وتحتاج إلى مساعدة للارتباط بشكل كافٍ لتكوين تفاعل تراص مرئي . تُعرف الكواشف المستخدمة لتعزيز الكشف عن IgG باسم المُعززات. تمتلك كريات الدم الحمراء شحنة سالبة صافية تُسمى جهد زيتا، مما يُسبب تنافرًا طبيعيًا بينها. تعمل المُعززات على تقليل جهد زيتا لأغشية كريات الدم الحمراء. تشمل المُعززات الشائعة محلولًا منخفض القوة الأيونية، والألبومين ، والبولي إيثيلين جليكول ، والإنزيمات المحللة للبروتين . 

وُصِف اختبار كومبس لأول مرة عام 1945 على يد علماء المناعة في جامعة كامبريدج ، روبن كومبس (الذي سُمّي الاختبار باسمه)، وآرثر مورانت ، وروب ريس . ^{[ 8 ]} تاريخيًا، كان يُجرى في أنابيب اختبار . أما اليوم، فيُجرى عادةً باستخدام تقنية الطور الصلب أو الهلام الآلية.

• اختبار كومبس - Medlineplus.org.
• الأدوية التي تسبب فقر الدم الانحلالي - دليل ميرك.
• اختبار كومبس في رؤوس الموضوعات الطبية (MeSH) التابعة للمكتبة الوطنية الأمريكية للطب