النيوكلياز

📅 آخر تحديث: ٣١ يوليو ٢٠٢٦
✍️ نُشر في: ٣١ يوليو ٢٠٢٦
📷 يحتوي على 2 صور
الموسوعة الحرة
تصوير إنزيم التقييد (إندو نوكلياز) HindIII وهو يقوم بقطع جزيء DNA مزدوج السلسلة في موقع تقييد صالح ( 5'–A | AGCTT–3' ).

في الكيمياء الحيوية ، يُعرف النيوكلياز (أو ما يُسمى قديمًا بإنزيم إزالة البلمرة أو متعدد النيوكليوتيدات ) بأنه إنزيم قادر على كسر روابط الفوسفودايستر التي تربط النيوكليوتيدات معًا لتكوين الأحماض النووية . تؤثر النيوكليازات بشكل متفاوت على كسور الحمض النووي أحادي السلسلة وثنائي السلسلة في جزيئاتها المستهدفة. في الكائنات الحية، تُعد النيوكليازات آلية أساسية للعديد من جوانب إصلاح الحمض النووي . يمكن أن تؤدي العيوب في بعض النيوكليازات إلى عدم استقرار جيني أو نقص مناعي . [ 1 ] كما تُستخدم النيوكليازات على نطاق واسع في الاستنساخ الجزيئي . [ 2 ]

يوجد تصنيفان رئيسيان يعتمدان على موضع النشاط. تقوم الإكسونوكليازات بهضم الأحماض النووية من الأطراف. أما الإندونوكليازات فتعمل على مناطق في منتصف الجزيئات المستهدفة. وتنقسم بدورها إلى فئتين فرعيتين: ديوكسي ريبونوكليازات وريبونوكليازات . تعمل الأولى على الحمض النووي DNA ، بينما تعمل الثانية على الحمض النووي RNA . [ 2 ]

تاريخ

في أواخر الستينيات، عزل العالمان ستيوارت لين وفيرنر أربر نوعين من الإنزيمات المسؤولة عن كبح نمو العاثيات في بكتيريا الإشريكية القولونية ( E. coli ). [ 3 ] [ 4 ] أضاف أحد هذين الإنزيمين مجموعة ميثيل إلى الحمض النووي، مُنتجًا حمضًا نوويًا مُمَثْيَلًا ، بينما قام الآخر بقطع الحمض النووي غير المُمَثْيَل في مواقع مُتعددة على طول الجزيء. سُمي النوع الأول من الإنزيمات " الميثيلاز " والآخر " النوكلياز المُقَيِّد ". كانت هذه الأدوات الإنزيمية مهمة للعلماء الذين كانوا يجمعون الأدوات اللازمة لقطع ولصق جزيئات الحمض النووي. كان المطلوب حينها أداة تقطع الحمض النووي في مواقع مُحددة، بدلًا من مواقع عشوائية على طول الجزيء، حتى يتمكن العلماء من قطع جزيئات الحمض النووي بطريقة قابلة للتنبؤ والتكرار.

حدث تطور هام عندما قام كل من إتش أو سميث ، وكيه دبليو ويلكوكس، وتي جيه كيلي ، العاملون في جامعة جونز هوبكنز عام 1968، بعزل وتوصيف أول نوكلياز تقييد يعتمد عمله على تسلسل نيوكليوتيدي محدد في الحمض النووي . وبالعمل مع بكتيريا المستدمية النزلية ، عزل هذا الفريق إنزيمًا يُسمى Hind II ، والذي يقطع جزيئات الحمض النووي دائمًا عند نقطة معينة ضمن تسلسل محدد من ستة أزواج قاعدية. ووجدوا أن إنزيم Hind II يقطع دائمًا مباشرة في منتصف هذا التسلسل (بين الزوجين القاعديين الثالث والرابع).

نظام التصنيف العددي

تُصنَّف معظم النيوكليازات، وفقًا لرقم لجنة الإنزيم التابعة للجنة التسمية في الاتحاد الدولي للكيمياء الحيوية والبيولوجيا الجزيئية ، ضمن مجموعة الهيدرولازات (رقم EC 3). وتنتمي النيوكليازات، مثلها مثل الفوسفودايستراز والليباز والفوسفاتاز ، إلى مجموعة الإسترازات (رقم EC 3.1)، وهي مجموعة فرعية من الهيدرولازات. وتُصنَّف الإسترازات التي تنتمي إليها النيوكليازات بأرقام EC من 3.1.11 إلى 3.1.31.

بناء

إن البنية الأولية للنيوكليازات غير محفوظة بشكل عام، ومحفوظة بشكل ضئيل في المواقع النشطة، التي تتكون أسطحها بشكل أساسي من بقايا الأحماض الأمينية الحمضية والقاعدية. ويمكن تصنيف النيوكليازات إلى عائلات طي. [ 1 ]

البنية البلورية لـ EcoRV في مركب مع الحمض النووي. [ 5 ]

التعرف على الموقع

يجب أن يرتبط النيوكلياز بالحمض النووي قبل أن يتمكن من قطع الجزيء. وهذا يستلزم درجة من التعرف. تستخدم النيوكليازات، على نحو متنوع، ارتباطات غير محددة ومحددة في آليات التعرف والارتباط. ويلعب كلا النمطين أدوارًا مهمة في الكائنات الحية، وخاصة في إصلاح الحمض النووي. [ 1 ]

تستطيع الإنزيمات النووية الداخلية غير المتخصصة، المشاركة في إصلاح الحمض النووي، مسح الحمض النووي بحثًا عن التسلسلات المستهدفة أو التلف . ينتشر هذا الإنزيم على طول الحمض النووي حتى يصادف هدفًا، حيث تتفاعل بقايا موقعه النشط مع المجموعات الكيميائية للحمض النووي. في حالة الإنزيمات النووية الداخلية مثل EcoRV و BamHI وPvuII، يتضمن هذا الارتباط غير المتخصص تفاعلات كهروستاتيكية بين مساحة سطحية ضئيلة للبروتين والحمض النووي. هذا الارتباط الضعيف يحافظ على الشكل العام للحمض النووي دون تغيير، ويبقى على شكله B. [ 1 ]

أعلى النقيض من ذلك، تُكوّن النيوكليازات المتخصصة في مواقع محددة ارتباطات أقوى بكثير. فهي تسحب الحمض النووي إلى الأخدود العميق لنطاق ارتباطها بالحمض النووي . وينتج عن ذلك تشوه كبير في البنية الثلاثية للحمض النووي ، ويتم ذلك عبر أسطح غنية ببقايا قاعدية (مشحونة إيجابياً). وتتفاعل هذه النيوكليازات بشكل مكثف مع الحمض النووي عن طريق التجاذب الكهروستاتيكي. [ 1 ]

تُظهر بعض النيوكليازات المشاركة في إصلاح الحمض النووي خصوصية جزئية للتسلسل. ومع ذلك، فإن معظمها غير متخصص، حيث يتعرف بدلاً من ذلك على التشوهات الهيكلية الناتجة في هيكل الحمض النووي بسبب عدم تطابق أزواج القواعد . [ 1 ]

نوكلياز متخصص في البنية

للمزيد من التفاصيل، انظر إلى إنزيم النوكلياز الداخلي للغطاء .

نوكلياز متخصص في التسلسل

إنزيممصدرتسلسل التعرفيقطع
هند 2المستدمية النزلية

5'–GTYRAC–3' 3'–CARYTG–5'

5'- GTY RAC –3' 3'- CAR YTG –5'

R = A أو G ؛ Y = C أو T

تم عزل أكثر من 900 إنزيم تقييد، بعضها متخصص في تسلسل معين والبعض الآخر غير متخصص، من أكثر من 230 سلالة بكتيرية منذ الاكتشاف الأولي لإنزيم Hind II. تحمل هذه الإنزيمات عادةً أسماءً تعكس أصلها ؛ فالحرف الأول من الاسم يُشير إلى الجنس، والحرفان الأخيران يُشيران إلى نوع الخلية بدائية النواة التي عُزلت منها. على سبيل المثال، يُستخلص إنزيم Eco RI من بكتيريا الإشريكية القولونية RY13، بينما يُستخلص إنزيم Hind II من سلالة المستدمية النزلية Rd. تشير الأرقام التي تلي أسماء الإنزيمات إلى ترتيب عزلها من سلالات بكتيرية محددة: Eco RI ، Eco RII .

الإنزيمات الداخلية

يعمل إنزيم القطع الداخلي عن طريق "مسح" طول جزيء الحمض النووي. بمجرد أن يصادف تسلسل التعرف الخاص به، يرتبط بجزيء الحمض النووي ويُحدث قطعًا واحدًا في كل من هيكلي السكر والفوسفات. يتم تحديد موضع هذين القطعين، سواء بالنسبة لبعضهما البعض أو بالنسبة لتسلسل التعرف نفسه، من خلال نوع إنزيم القطع الداخلي. تُنتج إنزيمات القطع الداخلية المختلفة مجموعات مختلفة من القطع، ولكن إنزيم القطع الداخلي الواحد سيقطع دائمًا تسلسلًا قاعديًا معينًا بنفس الطريقة، بغض النظر عن جزيء الحمض النووي الذي يعمل عليه. بمجرد حدوث القطع، ينقسم جزيء الحمض النووي إلى أجزاء. [ 6 ]

قطع متداخل

لا تقطع جميع إنزيمات القطع المحددة بشكل متناظر وتترك نهايات غير لاصقة مثل إنزيم Hind II الموصوف أعلاه. تقوم العديد من هذه الإنزيمات بقطع هيكل الحمض النووي في مواضع غير متقابلة تمامًا، مما يُنشئ نهايات بارزة. على سبيل المثال، يحتوي إنزيم Eco RI على تسلسل التعرف 5'—GAATTC—3'.

إنزيممصدرتسلسل التعرفيقطع
هند الثالثالمستدمية النزلية
5'–AAGCTT–3' 3'–TTCGAA–5'
5'– A AGCTT –3' 3'– TTCGA A –5'
إيكو رود آيلاندالإشريكية القولونية
5'–GAATTC-3' 3'-CTTAAG–5'
5'– G AATTC –3' 3'– CTTAA G –5'
بام هايبكتيريا العصوية المحللة للنشا
5'–GGATCC–3' 3'–CCTAGG–5'
5'– G GATCC –3' 3'– CCTAG G –5'

عندما يصادف الإنزيم هذا التسلسل، يقوم بقطع كل جزء من هيكل الحمض النووي بين قاعدة الجوانين (G) وأقرب قاعدة أدينين (A). بعد القطع، تبقى الشظايا الناتجة متماسكة فقط بواسطة روابط هيدروجينية ضعيفة نسبيًا تربط القواعد المتكاملة ببعضها. يسمح ضعف هذه الروابط لقطع الحمض النووي بالانفصال عن بعضها. لكل شظية ناتجة طرف 5' بارز يتكون من قواعد غير مزدوجة. تقوم إنزيمات أخرى بعمل شقوق في هيكل الحمض النووي، مما ينتج عنه أطراف 3' بارزة. تُسمى الأطراف البارزة - سواء 3' أو 5' - أحيانًا " الأطراف اللاصقة " لأنها تميل إلى الارتباط بتسلسلات القواعد المتكاملة. بعبارة أخرى، إذا 5'—AATT—3'صادفت مجموعة من القواعد غير المزدوجة مجموعة أخرى غير مزدوجة تحمل نفس التسلسل، 3'—TTAA—5'فإنها سترتبط ببعضها - أي أنها "لاصقة" لبعضها. ثم يُستخدم إنزيم الليغاز لربط هياكل الفوسفات في الجزيئين. لا يؤثر الأصل الخلوي، أو حتى أصل النوع، للأطراف اللاصقة على لزوجتها. أي زوج من التسلسلات المتكاملة يميل إلى الارتباط، حتى لو كان أحد التسلسلات من الحمض النووي البشري والآخر من الحمض النووي البكتيري. في الواقع، هذه الخاصية من الالتصاق هي التي تسمح بإنتاج جزيئات الحمض النووي المؤتلف، وهي جزيئات تتكون من حمض نووي من مصادر مختلفة، والتي أدت إلى ظهور تقنية الهندسة الوراثية .

دورها في الطبيعة

إصلاح الحمض النووي

بما أن جميع الخلايا تعتمد على الحمض النووي (DNA) كوسيلة لنقل المعلومات الوراثية، فإن مراقبة جودة الجينات تُعد وظيفة أساسية لجميع الكائنات الحية. يُعد تضاعف الحمض النووي عمليةً عُرضةً للأخطاء، كما أن جزيئات الحمض النووي نفسها عُرضة للتلف بفعل العديد من عوامل الإجهاد الأيضية والبيئية. ومن الأمثلة الشائعة على ذلك أنواع الأكسجين التفاعلية ، والأشعة فوق البنفسجية القريبة ، والإشعاع المؤين . تشارك العديد من النيوكليازات في إصلاح الحمض النووي من خلال التعرف على مواقع التلف وفصلها عن الحمض النووي المحيط. تعمل هذه الإنزيمات بشكل مستقل أو ضمن مُركبات . معظم النيوكليازات المُشاركة في إصلاح الحمض النووي ليست مُتخصصة في تسلسل مُعين، بل تتعرف على مواقع التلف من خلال تشويه البنية الثانوية للحمض النووي ثنائي السلاسل (dsDNA). [ 1 ]

التدقيق اللغوي للنسخ

أثناء تضاعف الحمض النووي ، تقوم بوليميرازات الحمض النووي بإطالة سلاسل جديدة من الحمض النووي مقابل سلاسل القالب المكملة. تتكون معظم بوليميرازات الحمض النووي من نطاقين إنزيميين مختلفين : بوليميراز ونوكلياز خارجي مصحح . يقوم البوليميراز بإطالة السلسلة الجديدة في الاتجاه 5' → 3'. بينما يقوم النوكلياز الخارجي بإزالة النيوكليوتيدات الخاطئة من السلسلة نفسها في الاتجاه 3' → 5'. يُعد نشاط النوكلياز الخارجي هذا ضروريًا لقدرة بوليميراز الحمض النووي على التصحيح. تؤدي عمليات الحذف التي تُعطل أو تُزيل هذه النوكليازات إلى زيادة معدلات الطفرات والوفيات في الميكروبات المصابة ، وإلى الإصابة بالسرطان في الفئران. [ 1 ]

تم إيقاف عملية نسخ البيانات

تُؤدي العديد من أشكال تلف الحمض النووي إلى توقف تقدم شوكة التضاعف ، مما يدفع بوليميرازات الحمض النووي والآليات المرتبطة بها إلى التخلي عن الشوكة. ويجب حينها معالجتها بواسطة بروتينات خاصة بالشوكة. وأبرز هذه البروتينات هو MUS81 ، الذي يُسبب حذفه حساسية الخميرة للأشعة فوق البنفسجية أو تلف المثيلة ، بالإضافة إلى عيوب الانقسام الاختزالي. [ 1 ]

معالجة أجزاء أوكازاكي

تُعدّ إزالة بادئات الحمض النووي الريبوزي (RNA) لقطع أوكازاكي من عملية التضاعف مهمة شائعة في الخلايا. تُستأصل معظم هذه البادئات من الحمض النووي (DNA) المُصنّع حديثًا في السلسلة المتأخرة بواسطة إنزيمات نووية داخلية من عائلة RNase H. في حقيقيات النوى والعتائق ، يشارك الإنزيم النووي الداخلي FEN1 أيضًا في معالجة قطع أوكازاكي. [ 1 ]

إصلاح عدم التطابق

تتم عملية إصلاح عدم تطابق الحمض النووي في أي كائن حي بواسطة مجموعة من الإنزيمات النووية الداخلية المتخصصة في إصلاح عدم التطابق. في بدائيات النوى، يضطلع بهذا الدور بشكل أساسي بروتين MutSLH والبروتينات المرتبطة بإصلاح الرقعة القصيرة جدًا (إصلاح VSP).

يقوم نظام MutSLH (الذي يتألف من MutS وMutL وMutH) بتصحيح الطفرات النقطية والانعطافات الصغيرة . يتعرف MutS على عدم تطابق القواعد ويرتبط به، حيث يستقطب MutL وMutH. يتوسط MutL التفاعل بين MutS وMutH، ويعزز النشاط الإندونوكليازي للأخير. يتعرف MutH على 5'—GATC—3'المواقع نصف الميثيلية ويقطع بجوارها في Gالسلسلة غير الميثيلية (السلسلة التي تم تصنيعها مؤخرًا).

يبدأ إصلاح VSP بواسطة الإندونوكلياز Vsr. يقوم هذا الإندونوكلياز بتصحيح عدم تطابق محدد ناتج عن نزع الأمينT/G التلقائي للسيتوزينات الميثيلية إلى ثايمينات. يتعرف Vsr على التسلسل ، حيث يقوم بقطع شريط الحمض النووي على الجانب 5' من الثايمين غير المتطابق (المُسطَّر في التسلسل السابق). بعد ذلك، يقوم أحد الإكسونوكليازات RecJ أو ExoVII أو ExoI بتحليل الموقع قبل أن يقوم بوليميراز الحمض النووي بإعادة بناء الفجوة في الشريط. [ 1 ]5'—CTWGG—3'

إصلاح استئصال القاعدة

يُعدّ تكوين مواقع AP ظاهرة شائعة في الحمض النووي المزدوج. وهو ناتج عن التحلل المائي التلقائي ونشاط إنزيمات غليكوزيلاز الحمض النووي كخطوة وسيطة في إصلاح استئصال القاعدة . تُزال مواقع AP هذه بواسطة إنزيمات AP الداخلية ، التي تُحدث كسورًا في السلسلة المفردة حول الموقع. [ 1 ]

إصلاح استئصال النيوكليوتيدات

إصلاح استئصال النيوكليوتيدات ، والذي يجب عدم الخلط بينه وبين إصلاح استئصال القاعدة، يتضمن إزالة النيوكليوتيدات التالفة واستبدالها. يمكن أن تؤدي حالات التشابك ، والإضافات ، والآفات (الناتجة عن الأشعة فوق البنفسجية أو أنواع الأكسجين التفاعلية ) إلى تحفيز مسار الإصلاح هذا. تُزال أجزاء قصيرة من الحمض النووي أحادي السلسلة، التي تحتوي على هذه النيوكليوتيدات التالفة، من الحمض النووي المزدوج بواسطة إنزيمات نووية داخلية منفصلة تُحدث شقوقًا قبل وبعد التلف. تؤدي الحذوفات أو الطفرات التي تؤثر على هذه الإنزيمات النووية إلى زيادة الحساسية لأضرار الأشعة فوق البنفسجية والتسرطن. يمكن أن تؤثر هذه التشوهات أيضًا على نمو الجهاز العصبي.

في البكتيريا، يتم تنفيذ كلا القطعين بواسطة معقد UvrB-UvrC . في الخميرة المتبرعمة، يقوم Rad2 ومعقد Rad1-Rad10 بعمل القطع من الطرف 5' والطرف 3' على التوالي. في الثدييات، تؤثر البروتينات المتماثلة XPG و XPF - ERCC1 على نفس الشقوق. [ 1 ]

إصلاح انقطاع الشعر المزدوج

تحدث كسور الحمض النووي المزدوجة ، سواءً كانت مقصودة أو غير مقصودة، بشكل منتظم في الخلايا. وتنتج الكسور غير المقصودة عادةً عن الإشعاع المؤين ، والعديد من العوامل الكيميائية الخارجية والداخلية، وشوكات التضاعف المتوقفة. أما الكسور المقصودة فتنتج كوسيط في الانقسام الاختزالي وإعادة تركيب V(D)J ، والتي تُصلح في المقام الأول من خلال إعادة التركيب المتماثل والربط غير المتماثل للأطراف . وفي كلتا الحالتين، تتطلب معالجة أطراف الحمض النووي المزدوجة بواسطة النيوكليازات قبل أن يتم الإصلاح. ومن هذه النيوكليازات Mre11 المرتبط بـ Rad50 . ويمكن أن تؤدي طفرات Mre11 إلى اضطراب شبيه برنح توسع الشعيرات . [ 1 ]

تتضمن عملية إعادة تركيب V(D)J فتح بنى الحلقات الجذعية المرتبطة بكسور الحمض النووي المزدوج، ثم ربط طرفيها. يشارك معقد Artemis-DNAPK cs في هذا التفاعل. على الرغم من أن Artemis يُظهر نشاطًا نوكليازيًا خارجيًا من 5' إلى 3' في الحمض النووي أحادي السلسلة عندما يكون بمفرده، إلا أن ارتباطه بـ DNA-PK cs يسمح بمعالجة الحلقات الجذعية داخليًا. يؤدي وجود خلل في أي من البروتينين إلى نقص مناعي حاد. [ 1 ]

من ناحية أخرى، تتضمن عملية إعادة التركيب المتماثل وجود سلسلتين مزدوجتين من الحمض النووي المتماثل متصلتين بحلقات D أو وصلات هوليداي . في البكتيريا، تقوم إنزيمات نووية داخلية مثل RuvC بفصل وصلات هوليداي إلى سلسلتين منفصلتين من الحمض النووي المزدوج عن طريق قطع الوصلات في موقعين متناظرين بالقرب من مركز الوصلة. في حقيقيات النوى، تقوم إنزيمات FEN1 و XPF - ERCC1 و MUS81 بقطع حلقات D، بينما يقوم إنزيم Cce1 / Ydc2 بمعالجة وصلات هوليداي في الميتوكوندريا. [ 1 ]

الميغانوكليازات

يعتمد معدل قطع إنزيم نوكلياز معين لجزيء DNA معين على مدى تعقيد DNA وطول تسلسل التعرف الخاص بالإنزيم؛ ونظرًا لاحتمالية وجود القواعد بترتيب معين بالصدفة، فإن تسلسل التعرف الأطول سيؤدي إلى هضم أقل تكرارًا. على سبيل المثال، من المتوقع أن يظهر تسلسل مكون من أربع قواعد (يُقابل موقع التعرف لإنزيم نوكلياز افتراضي) كل 256 زوجًا من القواعد في المتوسط ​​(حيث 4 × 4 = 256)، بينما من المتوقع أن يظهر أي تسلسل مكون من ست قواعد مرة واحدة كل 4096 زوجًا من القواعد في المتوسط ​​(4 × 6 = 4096). [ 7 ]

تُعدّ النيوكليازات الضخمة عائلة فريدة من النيوكليازات ، وتتميز بامتلاكها تسلسلات تعرف أكبر حجمًا، وبالتالي أقل شيوعًا، تتكون من 12 إلى 40 زوجًا من القواعد. وتُعدّ هذه النيوكليازات مفيدة بشكل خاص في تطبيقات الهندسة الوراثية وهندسة الجينوم في الكائنات الحية المعقدة كالنباتات والثدييات، حيث أن الجينومات الأكبر حجمًا (التي يصل عددها إلى مليارات أزواج القواعد) عادةً ما تؤدي إلى هضم متكرر وضار لمواقع محددة باستخدام النيوكليازات التقليدية.

انظر أيضاً

مراجع

  1. ١ ٢ ٣ ٤ ٥ ٦ ٧ ٨ ٩ ١٠ ١١ ١٢ ١٣ ١٤ ١٥ ١٦ نيشينو تي، موريكاوا ك (ديسمبر ٢٠٠٢). "بنية ووظيفة النيوكليازات في إصلاح الحمض النووي: شكل ومقبض وشفرة مقص الحمض النووي" . أونكوجين . ٢١ (٥٨): ٩٠٢٢-٣٢ . doi : 10.1038/sj.onc.1206135 . PMID 12483517 . 
  2. 1 2 ريتي إل، بيربال ب (يونيو 2008). "الإنزيمات المستخدمة في البيولوجيا الجزيئية: دليل مفيد" . مجلة اتصالات الخلايا والإشارات . 2 ( 1-2 ): 25-45 . doi : 10.1007/ s12079-008-0026-2 . PMC 2570007. PMID 18766469 .  
  3. ↑ لين إس، آربر دبليو (أبريل 1968). "تخصص العائل للحمض النووي الذي تنتجه الإشريكية القولونية، X. التقييد المختبري للشكل التضاعفي للفيروس fd" . وقائع الأكاديمية الوطنية للعلوم في الولايات المتحدة الأمريكية . 59 (4): 1300-1306 . Bibcode : 1968PNAS...59.1300L . doi : 10.1073/pnas.59.4.1300 . PMC 224867. PMID 4870862 .  
  4. ↑ آربر دبليو، لين إس (1969). "تعديل الحمض النووي وتقييده". المراجعة السنوية للكيمياء الحيوية . 38 : 467-500 . doi : 10.1146/annurev.bi.38.070169.002343 . PMID 4897066 . 
  5. ↑ وينكلر إف كيه، بانر دي دبليو، أوفنر سي، تسيرنوغلو دي، براون آر إس، هيثمان إس بي، وآخرون . (مايو 1993). "البنية البلورية لإنزيم EcoRV الداخلي ومركباته مع شظايا الحمض النووي المتوافقة وغير المتوافقة" . مجلة EMBO . 12 (5): 1781-1795 . doi : 10.2210/pdb4rve/pdb . PMC 413397. PMID 8491171 .   
  6. ↑ بينغود، أ.؛ يلتش، أ . (15-09-2001). "بنية ووظيفة إنزيمات القطع من النوع الثاني" . مجلة أبحاث الأحماض النووية . 29 (18): 3705-3727 . doi : 10.1093/nar/29.18.3705 . ISSN 1362-4962 . PMC 55916. PMID 11557805 .   
  7. ↑ هيرنانديز. "النيوكليازات: من المدافعين المناعيين البدائيين إلى أدوات التكنولوجيا الحيوية الحديثة" . علم المناعة . doi : 10.1111/imm.13884 . PMC 11799398 .