جين BRAF

📅 آخر تحديث: ١ أغسطس ٢٠٢٦
✍️ نُشر في: ١ أغسطس ٢٠٢٦
📷 يحتوي على 6 صور
الموسوعة الحرة

BRAF هو جين بشري يُشفّر بروتينًا يُسمى B-Raf. يُشار إلى هذا الجين أيضًا باسم الجين الأولي المسرطن B-Raf، أو نظير الجين المسرطن الفيروسي v-Raf الخاص بسرطان الفئران B ، بينما يُعرف البروتين رسميًا باسم كيناز البروتين سيرين/ثريونين B-Raf . [ 5 ] [ 6 ]

يشارك بروتين B-Raf في إرسال إشارات داخل الخلايا، والتي بدورها تُسهم في توجيه نمو الخلايا . وفي عام 2002، تبين أنه يُصاب بطفرة في بعض أنواع السرطان البشري . [ 7 ]

تسبب بعض الطفرات الوراثية الأخرى في جين BRAF تشوهات خلقية.

تم تطوير أدوية لعلاج السرطانات الناتجة عن طفرات جين BRAF . اثنان من هذه الأدوية، وهما فيمورافينيب [ 8 ] ودابرافينيب ، معتمدان من قِبل إدارة الغذاء والدواء الأمريكية لعلاج سرطان الجلد الميلانيني في مراحله المتأخرة. وكان فيمورافينيب أول دواء معتمد تم التوصل إليه من خلال اكتشاف الأدوية باستخدام تقنية التجزئة . [ 9 ]

وظيفة

نظرة عامة على مسارات نقل الإشارة المشاركة في موت الخلايا المبرمج . يُشار إلى دور بروتينات Raf مثل B-Raf في المنتصف.

يُعدّ B-Raf أحد أفراد عائلة كينازات Raf من كينازات البروتين المسؤولة عن نقل إشارات النمو . يلعب هذا البروتين دورًا في تنظيم مسار إشارات كيناز MAP / ERKs ، الذي يؤثر على انقسام الخلايا وتمايزها وإفرازها . [ 10 ]

بناء

B-Raf هو بروتين كيناز مُنظَّم، يتكون من 766 حمضًا أمينيًا ، ويُعنى بنقل الإشارات ، وهو مُختص بالسيرين/ثريونين . يتكون بشكل عام من ثلاثة نطاقات محفوظة تُميز عائلة كيناز Raf : المنطقة المحفوظة 1 (CR1)، وهي نطاق ذاتي التنظيم يرتبط بـ Ras - GTP [ 11 ] ، والمنطقة المحفوظة 2 (CR2)، وهي منطقة مفصلية غنية بالسيرين ، والمنطقة المحفوظة 3 (CR3)، وهي نطاق كيناز بروتيني مُحفِّز يقوم بفسفرة تسلسل مُتفق عليه على ركائز البروتين. [ 12 ] في هيئته النشطة، يُشكِّل B-Raf ثنائيات عبر روابط هيدروجينية وتفاعلات كهروستاتيكية بين نطاقات الكيناز الخاصة به. [ 13 ]

CR1

تُثبّط المنطقة المحفوظة 1 (CR1) ذاتيًا نطاق الكيناز الخاص بـ B-Raf (CR3)، مما يُنظّم إشارات B-Raf بدلًا من أن تكون مُستمرة. [ 12 ] تُشكّل البقايا من 155 إلى 227 [ 14 ] نطاق ربط Ras (RBD)، الذي يرتبط بنطاق التأثير الخاص بـ Ras-GTP لتحرير CR1 وإيقاف تثبيط الكيناز. تُشكّل البقايا من 234 إلى 280 وحدة إصبع الزنك الرابطة لإستر الفوربول / DAG، والتي تُشارك في التحام B-Raf بالغشاء بعد ارتباطه بـ Ras. [ 14 ] [ 15 ]

2

توفر المنطقة المحفوظة 2 (CR2) رابطًا مرنًا يربط بين CR1 و CR3 ويعمل كمفصل. [ 16 ]

CR3

الشكل 1: التكوين غير النشط لنطاق كيناز B-Raf (CR3). تُظهر العصي التفاعلات الكارهة للماء لحلقة P (البرتقالية) مع بقايا حلقة التنشيط (الرمادية) التي تُثبّت التكوين غير النشط للكيناز. يحجب F595 (الأحمر) الجيب الكاره للماء حيث يرتبط الأدينين في ATP (الأصفر). يظهر D576 (البرتقالي) كجزء من الحلقة التحفيزية (الأرجواني). الشكل مُعدّل من PDB id 1UWH.

تُشكّل المنطقة المحفوظة 3 (CR3)، المكونة من الأحماض الأمينية 457-717، [ 14 ] نطاق الكيناز الإنزيمي لبروتين B-Raf. يتميز هذا التركيب المحفوظ إلى حد كبير [ 17 ] بأنه ثنائي الفصوص، ويرتبطان بمنطقة مفصلية قصيرة. [ 18 ] يُعدّ الفص N الأصغر (الأحماض الأمينية 457-530) مسؤولاً بشكل أساسي عن ارتباط ATP، بينما يرتبط الفص C الأكبر (الأحماض الأمينية 535-717) ببروتينات الركيزة . [ 17 ] يقع الموقع النشط في الشق بين الفصين، ويقع الحمض الأميني Asp 576 المحفز على الفص C، مواجهًا لداخل هذا الشق. [ 14 ] [ 17 ]

المناطق الفرعية

حلقة P

تعمل حلقة P في بروتين B-Raf (بقايا الأحماض الأمينية 464-471) على تثبيت مجموعات الفوسفات غير القابلة للانتقال في جزيء ATP أثناء ارتباط الإنزيم به. وبالتحديد، ترتبط روابط هيدروجينية بين مجموعات الأميد في العمود الفقري للأحماض الأمينية S 467 و F 468 و G 469 ومجموعة الفوسفات β في جزيء ATP لتثبيت الجزيء. وقد حُددت الأنماط الوظيفية لبروتين B-Raf من خلال تحليل التشابه بين بروتين كيناز A (PKA) الذي حلله هانكس وهنتر ونطاق كيناز B-Raf. [ 17 ]

جيب ارتباط النيوكليوتيدات

تشكل الأحماض الأمينية V 471 و C 532 و W 531 و T 529 و L 514 و A 481 جيبًا كارهًا للماء، حيث يتم تثبيت الأدينين الموجود في جزيء ATP من خلال قوى فان دير فالس عند ارتباط ATP. [ 17 ] [ 19 ]

حلقة تحفيزية

تشكل البقايا من 574 إلى 581 جزءًا من نطاق الكيناز المسؤول عن دعم نقل مجموعة الفوسفات γ من ATP إلى ركيزة البروتين B-Raf. وعلى وجه الخصوص، يعمل الحمض الأميني D 576 كمستقبل للبروتون لتنشيط ذرة الأكسجين الهيدروكسيلية المحبة للنواة على بقايا السيرين أو الثريونين في الركيزة، مما يسمح بحدوث تفاعل نقل الفوسفات بوساطة التحفيز القاعدي . [ 17 ]

زخرف DFG

تُشكّل الأحماض الأمينية D 594 و F 595 و G 596 وحدة بنائية أساسية لوظيفة بروتين B-Raf في كلتا حالتيه النشطة وغير النشطة. في الحالة غير النشطة، يشغل الحمض الأميني F595 جيب ارتباط النيوكليوتيدات، مانعًا دخول جزيء ATP ومقللًا من احتمالية تحفيز الإنزيم. [ 13 ] [ 19 ] [ 20 ] أما في الحالة النشطة، فيرتبط الحمض الأميني D594 بأيون المغنيسيوم ثنائي التكافؤ الذي يُثبّت مجموعتي الفوسفات β وγ في جزيء ATP، موجهًا مجموعة الفوسفات γ لنقلها. [ 17 ]

حلقة التنشيط

تُشكّل البقايا 596-600 تفاعلات كارهة للماء قوية مع حلقة P في التكوين غير النشط للكيناز، مما يُثبّت الكيناز في حالته غير النشطة حتى يتم فسفرة حلقة التنشيط ، ويُزعزع وجود الشحنة السالبة استقرار هذه التفاعلات. وهذا يُحفّز الانتقال إلى الحالة النشطة للكيناز. على وجه التحديد، يتفاعل كل من L597 وV600 من حلقة التنشيط مع G466 وF468 وV471 من حلقة P للحفاظ على نطاق الكيناز غير نشط حتى يتم فسفرته. [ 18 ]

علم الإنزيمات

إنزيم B-Raf هو كيناز بروتين متخصص في السيرين/ثريونين . وبذلك، يحفز فسفرة بقايا السيرين والثريونين في تسلسل توافقي على البروتينات المستهدفة بواسطة ATP ، مما ينتج عنه ADP وبروتين مُفسفر. [ 17 ] ولأنه كيناز إشارة عالي التنظيم ، يجب أن يرتبط B-Raf أولاً بـ Ras - GTP قبل أن يصبح نشطًا كإنزيم. [ 15 ] بمجرد تنشيط B-Raf، يقوم لب كيناز البروتين المحفوظ بفسفرة ركائز البروتين عن طريق تعزيز الهجوم النيوكليوفيلي لذرة أكسجين الهيدروكسيل في السيرين أو الثريونين في الركيزة المنشطة على مجموعة الفوسفات γ في ATP من خلال الاستبدال النيوكليوفيلي ثنائي الجزيء . [ 17 ] [ 21 ] [ 22 ] [ 23 ]

التفعيل

تخفيف التثبيط الذاتي لـ CR1

يُثبَّط نطاق الكيناز (CR3) لكينازات Raf البشرية بآليتين: التثبيط الذاتي بواسطة نطاقه التنظيمي CR1 المرتبط بـ Ras - GTP ، وغياب الفسفرة بعد الترجمة لبقايا السيرين والتيروسين الرئيسية (S338 وY341 في c-Raf) في منطقة المفصل CR2. أثناء تنشيط B-Raf، يرتبط نطاق CR1 المُثبِّط ذاتيًا أولًا بنطاق التأثير لـ Ras-GTP بنطاق ربط Ras (RBD) في CR1 لتحرير نطاق الكيناز CR3، كما هو الحال في أفراد آخرين من عائلة كينازات Raf البشرية . ثم يتعزز تفاعل CR1-Ras لاحقًا من خلال ارتباط النطاق الفرعي الغني بالسيستين (CRD) في CR1 بـ Ras وفوسفوليبيدات الغشاء . [ 12 ] على عكس A-Raf و C-Raf ، اللذين يجب فسفرتهما على بقايا CR2 المحتوية على مجموعة هيدروكسيل قبل تحرير CR1 بالكامل ليصبحا نشطين، فإن B-Raf يتم فسفرته بشكل دائم على CR2 S445. [ 24 ] يسمح هذا للفوسفوسيرين سالب الشحنة بدفع CR1 على الفور من خلال التفاعلات الفراغية والكهروستاتيكية بمجرد انفصال المجال التنظيمي، مما يحرر مجال كيناز CR3 للتفاعل مع بروتينات الركيزة.

تفعيل نطاق CR3

بعد تحرير نطاق CR1 التنظيمي المثبط ذاتيًا، يجب أن يتحول نطاق CR3 الكيناز الخاص بـ B-Raf إلى شكله النشط المرتبط بـ ATP قبل أن يتمكن من تحفيز فسفرة البروتين . في الشكل غير النشط، يحجب F595 من وحدة DFG جيب ارتباط الأدينين الكاره للماء، بينما تُشكل بقايا حلقة التنشيط تفاعلات كارهة للماء مع حلقة P، مما يمنع ATP من الوصول إلى موقع ارتباطه. عند فسفرة حلقة التنشيط، تصبح الشحنة السالبة للفوسفات غير مستقرة في البيئة الكارهة للماء لحلقة P. ونتيجة لذلك، يتغير شكل حلقة التنشيط ، ممتدةً عبر الفص C لنطاق الكيناز . في هذه العملية، تُشكل تفاعلات صفائح بيتا مُثبتة مع سلسلة بيتا 6. في الوقت نفسه، تقترب البقايا المُفسفرة من K507، مُشكلةً جسرًا ملحيًا مُثبتًا لتثبيت حلقة التنشيط في مكانها. يتغير شكل وحدة DFG مع حلقة التنشيط، مما يؤدي إلى انتقال الحمض الأميني F595 من موقع ارتباط نيوكليوتيد الأدينين إلى جيب كاره للماء محاط باللوالب αC و αE . يؤدي تحرك وحدة DFG وحلقة التنشيط معًا عند الفسفرة إلى فتح موقع ارتباط ATP . وبما أن جميع نطاقات ارتباط الركيزة والنطاقات التحفيزية الأخرى موجودة بالفعل، فإن فسفرة حلقة التنشيط وحدها تُنشط نطاق الكيناز الخاص بـ B-Raf من خلال تفاعل متسلسل يُزيل غطاءً عن موقع نشط مُجهز مسبقًا. [ 18 ]

آلية التحفيز

الشكل 2: هجوم نيوكليوفيلي محفز قاعديًا لبقايا الركيزة سيرين/ثريونين على مجموعة الفوسفات γ في جزيء ATP. الخطوة 1: ارتباط أيون المغنيسيوم الثانوي بواسطة N581 وإزالة بروتون الركيزة سيرين/ثريونين بواسطة D576. الخطوة 2: هجوم نيوكليوفيلي لمجموعة الهيدروكسيل المنشطة في الركيزة على مجموعة الفوسفات γ في جزيء ATP. الخطوة 3: تفكك معقد المغنيسيوم وإزالة بروتون D576. الخطوة 4: إطلاق النواتج.

لتحفيز فسفرة البروتين بشكل فعال عبر الاستبدال الجزيئي الثنائي لبقايا السيرين والثريونين باستخدام ADP كمجموعة مغادرة ، يجب على B-Raf أولاً أن يرتبط بـ ATP ثم يعمل على تثبيت الحالة الانتقالية أثناء نقل مجموعة الفوسفات γ من ATP. [ 17 ]

ربط ATP

يرتبط بروتين B-Raf بجزيء ATP عن طريق تثبيت نيوكليوتيد الأدينين في جيب غير قطبي (أصفر، الشكل 1) وتوجيه الجزيء من خلال الروابط الهيدروجينية والتفاعلات الكهروستاتيكية مع مجموعات الفوسفات. بالإضافة إلى ارتباط الفوسفات بحلقة P ونمط DFG الموصوف أعلاه، يلعب كل من K483 وE501 دورًا رئيسيًا في تثبيت مجموعات الفوسفات غير القابلة للانتقال. تسمح الشحنة الموجبة على الأمين الأولي لـ K483 بتثبيت الشحنة السالبة على مجموعتي الفوسفات α وβ في ATP عند ارتباط ATP. في حالة عدم وجود ATP، تعادل الشحنة السالبة لمجموعة الكربوكسيل لـ E501 هذه الشحنة. [ 17 ] [ 18 ]

الفسفرة

بمجرد ارتباط جزيء ATP بنطاق كيناز B-Raf، يقوم الحمض الأميني D576 في الحلقة التحفيزية بتنشيط مجموعة الهيدروكسيل في الركيزة، مما يزيد من قدرتها على التفاعل مع النواة، وبالتالي يحفز تفاعل الفسفرة حركيًا، بينما تعمل بقايا الأحماض الأمينية الأخرى في الحلقة التحفيزية على تثبيت الحالة الانتقالية (الشكل 2). يرتبط الحمض الأميني N581 بأيون المغنيسيوم ثنائي التكافؤ المرتبط بجزيء ATP، مما يساعد على توجيه الجزيء نحو الاستبدال الأمثل. يعمل الحمض الأميني K578 على معادلة الشحنة السالبة على مجموعة الفوسفات γ في جزيء ATP، بحيث لا تتعرض بقايا الركيزة سيرين/ثريونين المنشطة لتنافر إلكتروني كبير عند مهاجمة الفوسفات. بعد نقل مجموعة الفوسفات، يتم إطلاق جزيء ADP والبروتين الفسفوري الجديد. [ 17 ]

المثبطات

بما أن طفرات B-Raf النشطة باستمرار تُسبب السرطان عادةً (انظر الأهمية السريرية) من خلال إرسال إشارات مفرطة للخلايا لتحفيز نموها، فقد تم تطوير مثبطات B-Raf لكل من التكوينات غير النشطة والنشطة لنطاق الكيناز كمرشحات علاجية للسرطان. [ 18 ] [ 19 ] [ 20 ]

سورافينيب

الشكل 3: نطاق كيناز B-Raf مُثبَّت في هيئة غير نشطة بواسطة BAY43-9006 المرتبط به. تعمل التفاعلات الكارهة للماء على تثبيت BAY43-9006 في موقع ارتباط ATP، بينما تعمل الروابط الهيدروجينية لمجموعة اليوريا على حصر D594 من وحدة DFG. كما تمنع حلقة فينيل ثلاثي فلورو ميثيل BAY43-9006 حركة وحدة DFG وحلقة التنشيط إلى المُحَوِّل النشط عبر إعاقة فراغية.

BAY43-9006 ( سورافينيب ، نيكسافار) هو مثبط لطفرة V600E في بروتيني B-Raf و C-Raf، معتمد من قِبل إدارة الغذاء والدواء الأمريكية لعلاج سرطان الكبد والكلى الأولي. يُعطّل BAY43-9006 نطاق كيناز B-Raf عن طريق تثبيت الإنزيم في حالته غير النشطة. ويحقق المثبط ذلك من خلال حجب جيب ارتباط ATP عبر انجذابه الشديد لنطاق الكيناز. ثم يرتبط ببقايا حلقة التنشيط الرئيسية ونمط DFG لمنع انتقال حلقة التنشيط ونمط DFG إلى التكوين النشط. وأخيرًا، تحجب مجموعة فينيل ثلاثي فلورو ميثيل فراغيًا موقع التكوين النشط لنمط DFG وحلقة التنشيط، مما يجعل من المستحيل على نطاق الكيناز تغيير تكوينه ليصبح نشطًا. [ 18 ]

تستقر حلقة البيريديل البعيدة لـ BAY43-9006 في الجيب الكاره للماء المرتبط بالنيوكليوتيدات في الفص N من الكيناز، متفاعلةً مع W531 وF583 وF595. تعمل التفاعلات الكارهة للماء مع الحلقة التحفيزية F583 ونمط DFG F595 على تثبيت التكوين غير النشط لهذه البنى، مما يقلل من احتمالية تنشيط الإنزيم. كما أن التفاعل الكاره للماء بين K483 وL514 وT529 مع حلقة الفينيل المركزية يزيد من ألفة نطاق الكيناز للمثبط. كذلك، يقلل التفاعل الكاره للماء بين F595 والحلقة المركزية من احتمالية تحول تكوين DFG. وأخيرًا، تستمر التفاعلات القطبية لـ BAY43-9006 مع نطاق الكيناز في زيادة ألفة الإنزيم للمثبط وتثبيت بقايا DFG في التكوين غير النشط. يشكل كل من E501 و C532 روابط هيدروجينية مع مجموعتي اليوريا والبيريديل في المثبط على التوالي، بينما تستقبل مجموعة الكربونيل في اليوريا رابطة هيدروجينية من نيتروجين الأميد في العمود الفقري لـ D594 لتثبيت وحدة DFG في مكانها. [ 18 ]

تعمل مجموعة ثلاثي فلورو ميثيل فينيل على تعزيز الاستقرار الديناميكي الحراري للتكوين غير النشط عندما يرتبط نطاق الكيناز بـ BAY43-9006 عن طريق حجب الجيب الكاره للماء بين حلزونات αC و αE الذي سيشغله كل من وحدة DFG وحلقة التنشيط عند انتقالهما إلى مواقعهما في التكوين النشط للبروتين. [ 18 ]

فيمورافينيب

الشكل 4: بنية فيمورافينيب (يمين) وسلفه، PLX 4720 (يسار)، وهما مثبطان للتكوين النشط لنطاق كيناز B-Raf

يُعدّ PLX4032 ( فيمورافينيب ) مثبطًا لطفرة V600 في بروتين B-Raf، وقد اعتمدته إدارة الغذاء والدواء الأمريكية لعلاج المراحل المتأخرة من سرطان الجلد الميلانيني . [ 13 ] على عكس BAY43-9006 ، الذي يثبط الشكل غير النشط لنطاق الكيناز، يثبط فيمورافينيب الشكل النشط "DFG-in" من الكيناز، [ 19 ] [ 20 ] ويرتبط بقوة بموقع ارتباط ATP. من خلال تثبيط الشكل النشط فقط من الكيناز، يثبط فيمورافينيب بشكل انتقائي تكاثر الخلايا التي تحتوي على بروتين B-Raf غير منظم، وهي عادةً الخلايا التي تسبب السرطان .

بما أن فيمورافينيب لا يختلف عن سلفه، PLX4720، إلا في حلقة فينيل مضافة لأسباب تتعلق بالحرائك الدوائية ، [ 20 ] فإن آلية عمل PLX4720 مكافئة لآلية عمل فيمورافينيب. يتمتع PLX4720 بألفة جيدة لموقع ارتباط ATP، ويعود ذلك جزئيًا إلى أن منطقة التثبيت فيه، وهي حلقة ثنائية من 7-أزا إندول ، لا تختلف عن الأدينين الطبيعي الذي يشغل الموقع إلا في موضعين استُبدلت فيهما ذرات النيتروجين بذرات الكربون. وهذا يُتيح الحفاظ على التفاعلات الجزيئية القوية، مثل الرابطة الهيدروجينية N7 مع C532 والرابطة الهيدروجينية N1 مع Q530. كما أن التوافق الممتاز داخل الجيب الكاره للماء المرتبط بـ ATP (C532، W531، T529، L514، A481) يزيد من ألفة الارتباط. تساهم الروابط الهيدروجينية لرابط الكيتون مع الماء، بالإضافة إلى مجموعة ثنائي فلورو فينيل التي تتلاءم مع جيب كاره للماء (A481، V482، K483، V471، I527، T529، L514، وF583)، في قوة الارتباط العالية بشكل استثنائي. ويتحقق الارتباط الانتقائي مع Raf النشط من خلال مجموعة البروبيل الطرفية التي ترتبط بجيب انتقائي لـ Raf ناتج عن انزياح حلزون αC. وتزداد انتقائية الشكل النشط للكيناز بفضل مجموعة سلفوناميد منزوعة البروتون حساسة للأس الهيدروجيني ، والتي تستقر بروابط هيدروجينية مع مجموعة NH في العمود الفقري للببتيد D594 في الحالة النشطة. أما في الحالة غير النشطة، فتتفاعل مجموعة السلفوناميد للمثبط مع مجموعة الكربونيل في العمود الفقري لهذا الحمض الأميني، مما يُحدث تنافرًا. وبالتالي، يرتبط فيمورافينيب بشكل تفضيلي بالحالة النشطة لنطاق كيناز B-Raf. [ 19 ] [ 20 ]

الأهمية السريرية

يمكن أن تُسبب الطفرات في جين BRAF المرض بطريقتين. أولاً، يمكن أن تكون الطفرات وراثية وتُسبب تشوهات خلقية. ثانياً، يمكن أن تظهر الطفرات في مراحل لاحقة من العمر وتُسبب السرطان، باعتبارها جيناً ورمياً .

تسبب الطفرات الوراثية في هذا الجين متلازمة القلب والوجه والجلد ، وهو مرض يتميز بعيوب في القلب، وإعاقة ذهنية، ومظهر وجه مميز. [ 25 ]

تم العثور على طفرات في هذا الجين في أنواع مختلفة من السرطانات، بما في ذلك سرطان الغدد الليمفاوية اللاهودجكينية ، وسرطان القولون والمستقيم ، والورم الميلانيني ، وسرطان الغدة الدرقية الحليمي ، وسرطان الرئة غير صغير الخلايا ، وسرطان غدي في الرئة ، وسرطان الغدد الصماء العصبية ، [ 26 ] وأورام الدماغ بما في ذلك الورم الأرومي الدبقي ، والورم النجمي الأصفر متعدد الأشكال، بالإضافة إلى الأمراض الالتهابية مثل مرض إردهايم-تشيستر . [ 10 ]

ارتبطت طفرة V600E في جين BRAF بسرطان الدم ذي الخلايا المشعرة في العديد من الدراسات، واقتُرح استخدامها في فحص متلازمة لينش لتقليل عدد المرضى الذين يخضعون لتسلسل MLH1 غير الضروري . [ 27 ] [ 28 ]

المتحولون

تم تحديد أكثر من 30 طفرة في جين BRAF مرتبطة بأنواع السرطان البشري. يتفاوت معدل حدوث طفرات BRAF بشكل كبير في أنواع السرطان البشري، من أكثر من 80% في سرطان الجلد (الورم الميلانيني) والشامات ، إلى ما بين 0 و18% في أنواع أخرى من الأورام ، مثل 1-3% في سرطان الرئة و5% في سرطان القولون والمستقيم . [ 29 ] في 90% من الحالات، يُستبدل الثايمين بالأدينين عند النيوكليوتيد 1799. يؤدي هذا إلى استبدال الفالين (V) بالجلوتامات (E) عند الكودون 600 (يُشار إليه الآن بـ V600E ) في جزء التنشيط الذي وُجد في أنواع السرطان البشري. [ 30 ] لوحظت هذه الطفرة على نطاق واسع في سرطان الغدة الدرقية الحليمي ، وسرطان القولون والمستقيم، والورم الميلانيني، وسرطان الرئة غير صغير الخلايا . [ 31 ] [ 32 ] [ 33 ] [ 34 ] [ 35 ] [ 36 ] [ 37 ] توجد طفرة BRAF-V600E لدى 57% من مرضى داء كثرة المنسجات لخلايا لانغرهانس. [ 38 ] من المرجح أن تكون طفرة V600E طفرةً محفزةً في 100% من حالات ابيضاض الدم ذي الخلايا المشعرة . [ 39 ] تم الكشف عن تردد عالٍ لطفرات BRAF V600E في الورم الأرومي المينائي ، وهو ورم سني حميد ولكنه متسلل موضعيًا. [ 40 ] قد ترتبط طفرة V600E أيضًا، كطفرة محفزة وحيدة (دليل جيني قاطع)، ببعض حالات تطور ورم القحفي البلعومي الحليمي . [ 41 ]

ومن الطفرات الأخرى التي تم العثور عليها R461I و I462S و G463E و G463V و G465A و G465E و G465V و G468A و G468E و G469R و N580S و E585K و D593V و F594L و G595R و L596V و T598I و V599D و V599E و V599K و V599R و V600K و A727V وما إلى ذلك، ومعظم هذه الطفرات تتجمع في منطقتين: حلقة P الغنية بالجليسين في الفص N وجزء التنشيط والمناطق المجاورة. [ 18 ] تُغيّر هذه الطفرات جزء التنشيط من حالة غير نشطة إلى حالة نشطة، فعلى سبيل المثال، ذُكر في الورقة البحثية المذكورة سابقًا أن السلسلة الجانبية الأليفاتية للفالين 599 تتفاعل مع حلقة الفينيل للفينيل ألانين 467 في حلقة P. ومن المتوقع أن يؤدي استبدال السلسلة الجانبية الكارهة للماء للفالين متوسطة الحجم ببقايا أكبر مشحونة، كما هو الحال في سرطان الإنسان (الجلوتامات، أو الأسبارتات، أو الليسين، أو الأرجينين)، إلى زعزعة استقرار التفاعلات التي تُبقي وحدة DFG في هيئة غير نشطة، وبالتالي قلب جزء التنشيط إلى الوضع النشط. وقد يختلف نشاط الكيناز تجاه MEK تبعًا لنوع الطفرة . تُحفّز معظم الطفرات زيادة نشاط كيناز B-Raf تجاه MEK. ومع ذلك، تعمل بعض الطفرات من خلال آلية مختلفة، لأنه على الرغم من انخفاض نشاطها تجاه MEK، فإنها تتخذ هيئة تُنشّط C-RAF من النوع البري، والذي يُرسل إشارات إلى ERK .

BRAF-V600E

مثبطات BRAF

كما ذُكر سابقًا، تعمل بعض شركات الأدوية على تطوير مثبطات نوعية لبروتين BRAF المتحور لاستخدامه في علاج السرطان ، نظرًا لأن BRAF هدفٌ معروفٌ وفعّال. [ 19 ] [ 43 ] وقد رخصت إدارة الغذاء والدواء الأمريكية (FDA) دواء فيمورافينيب (RG7204 أو PLX4032) تحت اسم زيلبوراف لعلاج سرطان الجلد النقيلي في أغسطس 2011، استنادًا إلى بيانات المرحلة الثالثة من التجارب السريرية. وقد لوحظ تحسن في معدل البقاء على قيد الحياة، بالإضافة إلى معدل استجابة للعلاج بلغ 53%، مقارنةً بنسبة 7-12% مع أفضل علاج كيميائي سابق، وهو داكاربازين . [ 44 ] وفي يونيو 2022، وافقت إدارة الغذاء والدواء الأمريكية على استخدام دابرافينيب مع تراميتينيب لعلاج جميع الأورام الصلبة النقيلية التي تحمل طفرة BRAF V600E. [ 45 ] وفي التجارب السريرية، زاد مثبط BRAF من فرص بقاء مرضى سرطان الجلد النقيلي على قيد الحياة. على الرغم من فعالية الدواء العالية، لا تزال 20% من الأورام تُظهر مقاومةً للعلاج. في الفئران، تُصبح 20% من الأورام مقاومةً بعد 56 يومًا. [ 46 ] وبينما لا تزال آليات هذه المقاومة محل جدل، تشمل بعض الفرضيات فرط التعبير عن بروتين B-Raf للتعويض عن التركيزات العالية من فيمورافينيب [ 46 ] ، والتنظيم التصاعدي لإشارات النمو. [ 47 ]

تشمل مثبطات B-Raf الأكثر عمومية GDC-0879 وPLX-4720 و Sorafenib و dabrafenib و encorafenib .

مثبطات بانراف

يُصنف بيلفارافينيب كمثبط شامل لبروتين RAF. يعمل مثبط بروتين RAF الشامل على منع الوظيفة التحفيزية لكلا البروتينين في ثنائي الوحدات. [ 48 ]

التفاعلات

ثبت أن جين BRAF يتفاعل مع:

مراجع

  1. 1 2 3 GRCh38: إصدار Ensembl رقم 89: ENSG00000157764 – Ensembl ، مايو 2017
  2. 1 2 3 GRCm38: إصدار Ensembl رقم 89: ENSMUSG00000002413 – Ensembl ، مايو 2017
  3. ↑ "مرجع PubMed البشري:" . المركز الوطني لمعلومات التكنولوجيا الحيوية، المكتبة الوطنية الأمريكية للطب .
  4. ↑ "مرجع PubMed للفأر:" . المركز الوطني لمعلومات التكنولوجيا الحيوية، المكتبة الوطنية الأمريكية للطب .
  5. ↑ سيثاناندام جي، كولش دبليو، دوه إف إم، راب يو آر (ديسمبر 1990). "التسلسل الترميزي الكامل لـ cDNA البشري B-raf والكشف عن بروتين كيناز B-raf باستخدام أجسام مضادة خاصة بالإنزيمات المتماثلة". Oncogene . 5 (12): 1775–1780 . PMID 2284096 . 
  6. ↑ سيثاناندام جي، دروك تي، كانيزارو إل إيه، لوزي جي، هوبنر كيه، راب يو آر (أبريل 1992). "يقع جين B-raf وجين B-raf الكاذب على الكروموسوم 7q في الإنسان". مجلة Oncogene . 7 (4): 795-799 . PMID 1565476 . 
  7. ↑ ديفيز إتش، بيغنيل جي آر، كوكس سي، ستيفنز بي، إدكينز إس، كليغ إس، وآخرون (يونيو 2002). "طفرات جين BRAF في السرطان البشري" (ملف PDF) . مجلة نيتشر . 417 (6892): 949-954 . Bibcode : 2002Natur.417..949D . doi : 10.1038/ nature00766 . PMID 12068308. S2CID 3071547 .   
  8. ↑ «إدارة الغذاء والدواء الأمريكية توافق على دواء زيلبوراف (فيمورافينيب) واختبار تشخيصي مصاحب لعلاج سرطان الجلد النقيلي ذي الطفرة الجينية BRAF، وهو نوع مميت من سرطان الجلد» (بيان صحفي). جينينتيك . تاريخ الاطلاع: ١٧ أغسطس ٢٠١١ .
  9. ↑ إرلانسون، د. أ. ، فيسيك، س . و.، هوبارد، ر. إ.، جانكي، و.، جوتي ، هـ. (سبتمبر 2016). "بعد عشرين عامًا: أثر الشظايا على اكتشاف الأدوية". مجلة نيتشر ريفيوز. اكتشاف الأدوية . 15 (9): 605-619 . doi : 10.1038/nrd.2016.109 . PMID 27417849. S2CID 19634793 .  
  10. 1 2 "Entrez Gene: BRAF" .
  11. ↑ داوم جي، آيزنمان-تاب آي، فريز إتش دبليو، تروبماير جيه، راب يو آر (نوفمبر 1994). "أسرار كينازات راف". اتجاهات في العلوم البيوكيميائية . 19 (11): 474-480 . doi : 10.1016/0968-0004(94)90133-3 . PMID 7855890 . 
  12. 1 2 3 كتلر، ر. إي.، ستيفنز، ر. م.، ساراسينو، م. ر.، موريسون، د. ك. (أغسطس 1998). " التنظيم الذاتي لكيناز سيرين/ثريونين Raf-1" . وقائع الأكاديمية الوطنية للعلوم في الولايات المتحدة الأمريكية . 95 (16): 9214-9219 . Bibcode : 1998PNAS...95.9214C . doi : 10.1073/pnas.95.16.9214 . PMC 21318. PMID 9689060 .  
  13. 1 2 3 بولاج جي، تساي جيه، تشانغ جيه، تشانغ سي، إبراهيم بي، نولوب كيه، وآخرون . (نوفمبر 2012). "فيمورافينيب: أول دواء معتمد لعلاج السرطان ذي الطفرة الجينية BRAF". مجلة نيتشر ريفيوز. اكتشاف الأدوية . 11 (11): 873-886 . doi : 10.1038/nrd3847 . PMID 23060265. S2CID 9337155 .   
  14. 1 2 3 4 "بروتين كيناز سيرين/ثريونين B-rAF" . تم الاطلاع عليه بتاريخ 4 مارس 2013 .
  15. 1 2 موريسون، د. ك.، وكوتلر، ر. إ. (أبريل 1997). "تعقيد تنظيم Raf-1". الرأي الحالي في بيولوجيا الخلية . 9 (2): 174-179 . doi : 10.1016/S0955-0674(97)80060-9 . PMID 9069260 . 
  16. ↑ خان، ب.س.، راجيش، ب.، راجندرا، ب.، تشاسكار، م.ج.، روهيداس، أ.، جايبراكاش، س. (مارس 2022). "التطورات الحديثة في مثبطات B-RAF كعوامل مضادة للسرطان". الكيمياء الحيوية العضوية . 120 105597. دار النشر Elsevier BV. doi : 10.1016/j.bioorg.2022.105597 . PMID 35033817 . 
  17. 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 هانكس إس كيه، هنتر تي (مايو 1995). "كينازات البروتين 6. عائلة كينازات البروتين حقيقية النواة: بنية وتصنيف نطاق الكيناز (التحفيزي)" . مجلة FASEB . 9 (8): 576-596 . doi : 10.1096/fasebj.9.8.7768349 . PMID 7768349. S2CID 21377422 .  
  18. وان بي تي ، غارنيت إم جيه ، رو إس إم، لي إس، نيكوليسكو-دوفاز دي، غود في إم، وآخرون ( مارس 2004). " آلية تنشيط مسار إشارات RAF-ERK بواسطة الطفرات السرطانية لـ B-RAF" . مجلة Cell . 116 ( 6). مشروع جينوم السرطان: 855-867 . doi : 10.1016/S0092-8674( 04 )00215-6 . PMID 15035987. S2CID 126161 .   
  19. 1 2 3 4 5 6 تساي جيه، لي جيه تي، وانغ دبليو، تشانغ جيه، تشو إتش، مامو إس، وآخرون . (فبراير 2008). "اكتشاف مثبط انتقائي لكيناز B-Raf المسرطن ذي فعالية قوية مضادة لسرطان الجلد" . وقائع الأكاديمية الوطنية للعلوم في الولايات المتحدة الأمريكية . 105 (8): 3041-3046 . Bibcode : 2008PNAS..105.3041T . doi : 10.1073/pnas.0711741105 . PMC 2268581. PMID 18287029 .   
  20. 1 2 3 4 5 بولاج جي، هيرث بي، تساي جي، تشانغ جي، إبراهيم بي إن، تشو إتش، وآخرون . (سبتمبر 2010). "الفعالية السريرية لمثبط RAF تتطلب حجبًا واسع النطاق للهدف في سرطان الجلد ذي الطفرة BRAF" . نيتشر . 467 ( 7315): 596-599 . Bibcode : 2010Natur.467..596B . doi : 10.1038/nature09454 . PMC 2948082. PMID 20823850 .   
  21. ↑ هانكس إس كيه، كوين إيه إم، هنتر تي (يوليو 1988). "عائلة بروتين كيناز: السمات المحفوظة والتطور المستنتج للمجالات التحفيزية". مجلة ساينس . 241 (4861): 42-52 . Bibcode : 1988Sci...241...42H . doi : 10.1126/science.3291115 . PMID 3291115 . 
  22. ↑ هانكس إس كيه (يونيو 1991). "كينازات البروتين حقيقية النواة". الرأي الحالي في البيولوجيا الهيكلية 1 ( 3): 369-383 . doi : 10.1016/0959-440X(91)90035-R .
  23. ↑ هانكس إس كيه، كوين إيه إم (1991). " [ 2 ] قاعدة بيانات تسلسل المجال التحفيزي لكيناز البروتين: تحديد السمات المحفوظة للبنية الأولية وتصنيف أفراد العائلة". قاعدة بيانات تسلسل المجال التحفيزي لكيناز البروتين: تحديد السمات المحفوظة للبنية الأولية وتصنيف أفراد العائلة . طرق في علم الإنزيمات. المجلد 200. الصفحات 38-62 . doi : 10.1016/0076-6879(91)00126-H . ISBN   978-0-12-182101-2PMID 1956325​​ 
  24. ↑ ماسون سي إس، سبرينغر سي جيه، كوبر آر جي، سوبرتي-فورغا جي، مارشال سي جيه، ماريه آر (أبريل 1999). "تتعاون فسفرة السيرين والتيروسين في تنشيط Raf-1، ولكن ليس B-Raf" . مجلة EMBO . 18 (8): 2137-2148 . doi : 10.1093/ emboj /18.8.2137 . PMC 1171298. PMID 10205168 .  
  25. ↑ روبرتس أ، ألانسن ج، جاديكو س ك، كافامورا م إ، نونان ج، أوبيتز ج م، وآخرون . (نوفمبر 2006). " متلازمة القلب والوجه والجلد" . مجلة علم الوراثة الطبية . 43 (11): 833-842 . doi : 10.1136/jmg.2006.042796 . PMC 2563180. PMID 16825433 .   
  26. ↑ فالكمان إل، سوندين أ، سكوجسيد ب، بوتلينج ج، برناردو ي، والين ج، وآخرون . (2024-04-09). " العلاج الموجه جينيًا في سرطان الغدد الصماء العصبية: الاستجابة لمثبطات BRAF وMEK" . مجلة أوبسالا للعلوم الطبية . 129 e10660. doi : 10.48101/ujms.v129.10660 . PMC 11075439. PMID 38716076 .   
  27. ↑ إيوالت م، ناندولا س، فيليبس أ، ألوبيد ب، مورتي ف ف، مانسوخاني م م، وآخرون . (ديسمبر 2012). "تحليل طفرة BRAF V600E في الأورام اللمفاوية منخفضة ومتوسطة الدرجة باستخدام تفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الحقيقي يؤكد حدوثها المتكرر في سرطان الدم ذي الخلايا المشعرة". علم الأورام الدموية . 30 (4): 190-193 . doi : 10.1002/hon.1023 . PMID 22246856. S2CID 204843221 .   
  28. ↑ بالوماكي، جي إي، ماكلين، إم آر، ميللو، إس، هامبل، إتش إل، ثيبودو، إس إن (يناير 2009). "مراجعة الأدلة التكميلية لمشروع EGAPP: استراتيجيات اختبار الحمض النووي التي تهدف إلى الحد من معدلات الإصابة والوفيات بمتلازمة لينش" . علم الوراثة في الطب . 11 (1): 42-65 . doi : 10.1097/GIM.0b013e31818fa2db . PMC 2743613. PMID 19125127 .  
  29. ↑ نامبا هـ، ناكاشيما م، هاياشي ت، هاياشيدا ن، مايدا س، روغونوفيتش ت.إ، وآخرون . (سبتمبر 2003). "الدلالة السريرية لطفرة BRAF الموضعية الساخنة، V599E، في سرطانات الغدة الدرقية الحليمية" . مجلة الغدد الصماء والتمثيل الغذائي السريرية . 88 (9): 4393-4397 . doi : 10.1210/jc.2003-030305 . PMID 12970315 .  
  30. ↑ تان واي إتش، ليو واي، يو كيه دبليو، أنج بي دبليو، لي دبليو كيو، سالتو-تيليز إم، وآخرون . (أبريل 2008). "الكشف عن طفرة BRAF V600E بواسطة التسلسل الناري". علم الأمراض . 40 (3): 295-298 . doi : 10.1080/00313020801911512 . PMID 18428050. S2CID 32051681 .   
  31. ↑ لي و.كيو، كاواكامي ك، روسكويتش أ، بينيت ج، مور ج، إياكوبيتا ب (يناير 2006). " ترتبط طفرات BRAF بخصائص سريرية ومرضية وجزيئية مميزة لسرطان القولون والمستقيم بغض النظر عن حالة عدم استقرار الميكروساتلايت" . السرطان الجزيئي . 5 (1) 2. doi : 10.1186/1476-4598-5-2 . PMC 1360090. PMID 16403224 .  
  32. ↑ بنلوش إس، بايا أ، أليندا سي، بيسا إكس، أندريو إم، جوفر آر، وآخرون . (نوفمبر 2006). "الكشف عن طفرة BRAF V600E في سرطان القولون والمستقيم: مقارنة بين التسلسل الآلي ومنهجية الكيمياء في الوقت الحقيقي" . مجلة التشخيص الجزيئي . 8 (5): 540-543 . doi : 10.2353/jmoldx.2006.060070 . PMC 1876165. PMID 17065421 .   
  33. ↑ دينغ جي، بيل آي، كرولي إس، غوم جيه، تيرديمان جيه بي، ألين بي إيه، وآخرون . (يناير 2004). "طفرة BRAF شائعة في سرطان القولون والمستقيم المتفرق المصحوب بمثيلة hMLH1، ولكنها غير موجودة في سرطان القولون والمستقيم الوراثي غير السلائلي" . مجلة أبحاث السرطان السريرية . 10 (1 الجزء 1): 191-195 . doi : 10.1158/1078-0432.CCR-1118-3 . PMID 14734469 .  
  34. ↑ جير إتش، ويليامز إتش، كيمب إي جي، روبرتس إف (أغسطس 2004). "طفرات BRAF في سرطان الجلد الملتحمي" . طب العيون الاستقصائي وعلوم الرؤية . 45 (8): 2484-2488 . doi : 10.1167/iovs.04-0093 . PMID 15277467 . 
  35. ↑ مالدونادو جيه إل، فريدلياند جيه، باتل إتش، جاين آن، بوسام كيه، كاجيشيتا تي، وآخرون . (ديسمبر 2003). "محددات طفرات BRAF في الأورام الميلانينية الأولية" . مجلة المعهد الوطني للسرطان . 95 (24): 1878–1890 . دوى : 10.1093/jnci/djg123 . بميد 14679157 .  
  36. ↑ بوكسيدو إي، موريتي إس، إليسي آر، رومي سي، باسكوتشي آر، مارتينيلي إم، وآخرون . (مايو 2004). "طفرة BRAF(V599E) هي الحدث الجيني الرئيسي في سرطانات الغدة الدرقية الحليمية المتفرقة لدى البالغين" . مجلة الغدد الصماء والتمثيل الغذائي السريرية . 89 (5): 2414-2420 . doi : 10.1210/jc.2003-031425 . PMID 15126572 .  
  37. ↑ إليسي ر، أوغوليني س، فيولا د، لوبي س، بياجيني أ، جيانيني ر، وآخرون . (أكتوبر 2008). "طفرة BRAF(V600E) ومآل المرضى المصابين بسرطان الغدة الدرقية الحليمي: دراسة متابعة متوسطة لمدة 15 عامًا" . مجلة الغدد الصماء والتمثيل الغذائي السريرية . 93 (10): 3943-3949 . doi : 10.1210/jc.2008-0607 . PMID 18682506 .  
  38. ^ Badalian-Very G، Vergilio JA، Degar BA، Rodriguez-Galindo C، Rollins BJ (يناير 2012). "التطورات الحديثة في فهم كثرة المنسجات لخلايا لانجرهانس" . المجلة البريطانية لأمراض الدم . 156 (2): 163–172 . دوى : 10.1111/j.1365-2141.2011.08915.x . بميد 22017623 . S2CID 34922416 .  
  39. ↑ تياكي إي، تريفونوف في، شيافوني جي، هولمز إيه، كيرن دبليو، مارتيلي إم بي، وآخرون . (يونيو 2011). "طفرات BRAF في سرطان الدم ذي الخلايا المشعرة" . مجلة نيو إنجلاند الطبية . 364 (24): 2305-2315 . doi : 10.1056/NEJMoa1014209 . PMC 3689585. PMID 21663470 .   * ملخص البحث في: "أبحاث حول سرطان الدم ذي الخلايا المشعرة تُظهر إمكانات واعدة لتقنيات مسح الحمض النووي الجديدة" . أبحاث السرطان في المملكة المتحدة . 11 يونيو 2011.
  40. ↑ كوربا كيلوجول، كاتون جيه، مورجان بي آر، ريستماكي أ، روهين ب، كيلوكوسكي جي، وآخرون . (أبريل 2014). "ارتفاع وتيرة طفرات BRAF V600E في الورم الأرومي النخاعي" . مجلة علم الأمراض . 232 (5): 492-498 . دوى : 10.1002/path.4317 . بمك 4255689 . بميد 24374844 .   
  41. ↑ براستيانوس بي كيه، تايلور وينر أ، مانلي بي إي، جونز آر تي، دياس سانتاغاتا د، ثورنر آر، وآخرون . (فبراير 2014). "تسلسل إكسوم يحدد طفرات BRAF في الأورام القحفية البلعومية الحليمية" . علم الوراثة الطبيعة . 46 (2): 161-165 . دوى : 10.1038 / ng.2868 . بمك 3982316 . بميد 24413733 .   * ملخص مبسط في: ليا أيزنشتات (30 يناير 2014). "اكتشاف طفرة جينية واحدة في ورم دماغي نادر" . معهد برود .
  42. ↑ زيكين د، بوسكارو ف، ميديكو إ، بارو ل، مارتيني م، أرينا س، وآخرون . (ديسمبر 2013). "BRAF V600E عامل محدد للحساسية لمثبطات البروتيازوم" . العلاجات الجزيئية للسرطان . 12 (12): 2950-2961 . doi : 10.1158/1535-7163.MCT-13-0243 . hdl : 2318/140935 . PMID 24107445. S2CID 17012966 .   
  43. ↑ كينغ إيه جيه، باتريك دي آر، باتورسكي آر إس، هو إم إل، دو إتش تي، تشانغ إس واي، وآخرون . (ديسمبر 2006). "إثبات وجود مؤشر علاجي جيني للأورام التي تُظهر جين BRAF المسرطن بواسطة مثبط الكيناز SB-590885" . أبحاث السرطان . 66 (23): 11100-11105 . doi : 10.1158/0008-5472.CAN-06-2554 . PMID 17145850 .  
  44. ↑ تشابمان، بي. بي.، هاوشيلد، أ.، روبرت، سي.، هانين، جيه. بي.، أسيرتو، بي.، لاركين، جيه.، وآخرون . (يونيو 2011). "تحسن معدل البقاء على قيد الحياة مع فيمورافينيب في سرطان الجلد الميلانيني المصحوب بطفرة BRAF V600E" . مجلة نيو إنجلاند الطبية . 364 (26). مجموعة دراسة BRIM-3: 2507-2516 . doi : 10.1056/NEJMoa1103782 . PMC 3549296. PMID 21639808 .   
  45. ↑ «منحت إدارة الغذاء والدواء الأمريكية موافقةً مُعجّلةً لعقار دابرافينيب بالاشتراك مع تراميتينيب لعلاج الأورام الصلبة غير القابلة للاستئصال أو المنتشرة التي تحمل طفرة BRAF V600E» . مركز تقييم الأدوية والأبحاث (CDER) . إدارة الغذاء والدواء الأمريكية (FDA). 9 أغسطس 2024.
  46. 1 2 داس ثاكور م، سالانجسانغ ف، لاندمان أ.س، سيلرز و.ر، براير ن.ك، ليفيسك م.ب، وآخرون . (فبراير 2013). "نمذجة مقاومة الفيمورافينيب في سرطان الجلد تكشف عن استراتيجية لمنع مقاومة الدواء" . نيتشر . 494 (7436): 251-255 . Bibcode : 2013Natur.494..251D . doi : 10.1038/ nature11814 . PMC 3930354. PMID 23302800 .   
  47. ↑ نازاريان ر، شي هـ، وانغ كيو، كونغ إكس، كويا آر سي، لي هـ، وآخرون . (ديسمبر 2010). " تكتسب الأورام الميلانينية مقاومة لتثبيط B-RAF(V600E) عن طريق زيادة تنظيم RTK أو N-RAS" . نيتشر . 468 (7326): 973-977 . Bibcode : 2010Natur.468..973N . doi : 10.1038/nature09626 . PMC 3143360. PMID 21107323 .   
  48. ↑ ديغيرمينسي يو، ياب جيه، سيم واي آر، تشين إس، هو جيه (2021). "مقاومة الأدوية في العلاجات الموجهة للسرطان باستخدام مثبطات RAF" . مقاومة أدوية السرطان . 4 (3): 665-683 . doi : 10.20517/cdr.2021.36 . PMC 9094075. PMID 35582307 .  
  49. ↑ غوان كيه إل، فيغيروا سي، برتفّا تي آر، تشو تي، تايلور جيه، باربر تي دي، وآخرون (سبتمبر 2000). "التنظيم السلبي لكيناز سيرين/ثريونين B-Raf بواسطة Akt". مجلة الكيمياء البيولوجية . 275 (35): 27354-27359 . doi : 10.1074/jbc.M004371200 (غير نشط في 8 أغسطس 2025). PMID 10869359 .  {{cite journal}}: صيانة CS1: تم تعطيل DOI اعتبارًا من أغسطس 2025 ( رابط )
  50. ↑ ويبر سي كيه، سلوبسكي جيه آر، كالميس إتش إيه، راب يو آر (مايو 2001). "يحفز راس النشط تكوين ثنائي غير متجانس من سي راف وبرايف". أبحاث السرطان . 61 (9): 3595-3598 . PMID 11325826 . 
  51. ↑ ستانغ إس، بوتورف دي، ستون جيه سي (يونيو 1997). "قد يكون تفاعل راس المنشط مع راف-1 وحده كافيًا لتحويل خلايا رات2" . علم الأحياء الجزيئي والخلوي . 17 (6): 3047-3055 . doi : 10.1128/MCB.17.6.3047 . PMC 232157. PMID 9154803 .  
  52. ↑ رويتر سي دبليو، كاتلينج إيه دي، جيلينك تي، ويبر إم جيه (مارس 1995). "التحليل الكيميائي الحيوي لتنشيط MEK في خلايا NIH3T3 الليفية. تحديد B-Raf ومنشطات أخرى" . مجلة الكيمياء البيولوجية . 270 (13): 7644-7655 . doi : 10.1074/jbc.270.13.7644 . PMID 7706312 . 
  53. ↑ إيوينغ آر إم، تشو بي، إليسما إف، لي إتش، تايلور بي، كليمي إس، وآخرون (2007). " رسم خرائط واسعة النطاق لتفاعلات البروتين-بروتين البشري باستخدام مطياف الكتلة" . بيولوجيا الأنظمة الجزيئية . 3 (1) 89. doi : 10.1038/msb4100134 . PMC 1847948. PMID 17353931 .   
  54. ↑ كيو و، تشوانغ س، فون لينتج إف سي، بوس جي آر، بيلز آر بي (أكتوبر 2000). "التنظيم النوعي لنوع الخلية لكيناز B-Raf بواسطة cAMP وبروتينات 14-3-3" . مجلة الكيمياء البيولوجية . 275 (41): 31921-31929 . doi : 10.1074/jbc.M003327200 . PMID 10931830 . 

للمزيد من القراءة

المجال العام This article incorporates public domain material from Dictionary of Cancer Terms. U.S. National Cancer Institute.This article incorporates text from the United States National Library of Medicine, which is in the public domain.