الكهربة المسامية

الموسوعة الحرة

أوعية الكهرومسامية في المختبر. وهي مصنوعة من البلاستيك مع أقطاب كهربائية من الألومنيوم وغطاء أزرق. وتتسع لـ 400 ميكرولتر كحد أقصى .

الكهربة المسامية ، أو الكهربة النفاذية ، هي تقنية يتم فيها تطبيق مجال كهربائي على الخلايا من أجل زيادة نفاذية غشاء الخلية . قد يسمح هذا بإدخال المواد الكيميائية أو الأدوية أو مجموعات الأقطاب الكهربائية أو الحمض النووي إلى الخلية (وتسمى أيضًا النقل الكهربائي ). [1] [2] [3] [4]

في علم الأحياء الدقيقة، تُستخدم عملية الكهرومسام غالبًا لتحويل البكتيريا أو الخميرة أو البروتوبلاستات النباتية عن طريق إدخال الحمض النووي المشفر الجديد. إذا تم خلط البكتيريا والبلازميدات معًا ، يمكن نقل البلازميدات إلى البكتيريا بعد الكهرومسام، على الرغم من أنه اعتمادًا على ما يتم نقله، يمكن أيضًا استخدام الببتيدات التي تخترق الخلايا أو ضغط الخلايا . تعمل الكهرومسام عن طريق تمرير آلاف الفولتات (~8 كيلو فولت/سم) عبر الخلايا المعلقة في كوفيت الكهرومسام. [2] بعد ذلك، يجب التعامل مع الخلايا بعناية حتى تتاح لها فرصة الانقسام، مما ينتج خلايا جديدة تحتوي على بلازميدات مُعاد إنتاجها. هذه العملية أكثر فعالية بحوالي عشر مرات في زيادة نفاذية غشاء الخلية من التحويل الكيميائي ، على الرغم من أن العديد من المختبرات تفتقر إلى المعدات المتخصصة اللازمة للكهرومسام. [5] [6] [ التحقق مطلوب ]

كما أن الكهرومسام فعالة للغاية في إدخال الجينات الغريبة إلى خلايا زراعة الأنسجة، وخاصة خلايا الثدييات . على سبيل المثال، يتم استخدامه في عملية إنتاج الفئران الخاضعة للضربة القاضية ، وكذلك في علاج الأورام، والعلاج الجيني، والعلاج القائم على الخلايا. تُعرف عملية إدخال الحمض النووي الغريب إلى الخلايا حقيقية النواة باسم النقل الجيني. الكهرومسام فعالة للغاية في نقل الخلايا المعلقة باستخدام أوعية الكهرومسام. وقد أثبتت الكهرومسام كفاءتها في الاستخدام على الأنسجة في الجسم الحي ، للتطبيقات داخل الرحم وكذلك في نقل البويضات. يمكن أيضًا نقل الخلايا الملتصقة باستخدام الكهرومسام، مما يوفر للباحثين بديلاً عن تربسين خلاياهم قبل النقل الجيني. ومع ذلك، فإن أحد الجوانب السلبية للكهرومسام هو أنه بعد العملية يمكن أن يتأثر التعبير الجيني لأكثر من 7000 جين. [7] يمكن أن يسبب هذا مشاكل في الدراسات حيث يجب التحكم في التعبير الجيني لضمان نتائج دقيقة ومحددة.

على الرغم من أن الكهرومسام السائبة لها العديد من الفوائد مقارنة بطرق التوصيل المادية مثل الحقن المجهري والمسدسات الجينية ، إلا أنها لا تزال تعاني من قيود، بما في ذلك انخفاض قابلية الخلايا للبقاء على قيد الحياة. تمت دراسة تصغير الكهرومسام، مما أدى إلى الكهرومسام الدقيقة ونقل الأنسجة باستخدام تقنيات تعتمد على الكهرومسام عبر القنوات النانوية لتوصيل البضائع إلى الخلايا بأقل تدخل جراحي. [8] [9]

كما تم استخدام الكهرومسام كآلية لتحفيز اندماج الخلايا . يمكن استخدام اندماج الخلايا المحفز صناعيًا للتحقيق في أمراض مختلفة وعلاجها، مثل مرض السكري، [10] [11] [12] وتجديد محاور الجهاز العصبي المركزي، [13] وإنتاج خلايا ذات خصائص مرغوبة، مثل لقاحات الخلايا للعلاج المناعي للسرطان. [14] ومع ذلك، فإن التطبيق الأول والأكثر شهرة لاندماج الخلايا هو إنتاج الأجسام المضادة وحيدة النسيلة في تقنية الورم الهجين ، حيث يتم تكوين خطوط الخلايا الهجينة (الأورام الهجينة) عن طريق دمج الخلايا الليمفاوية البائية المنتجة للأجسام المضادة المحددة مع خط خلايا المايلوما (سرطان الخلايا الليمفاوية البائية). [15]

الممارسة المعملية

يتم إجراء الكهرومسام باستخدام أجهزة الكهرومسام ، وهي أجهزة مصممة خصيصًا لإنشاء مجال كهروستاتيكي في محلول الخلية. يتم وضع معلق الخلية في كوب زجاجي أو بلاستيكي به قطبان من الألومنيوم على جانبيه. بالنسبة للكهرومسام البكتيرية، يتم استخدام معلق يبلغ حجمه حوالي 50 ميكرولترًا . قبل الكهرومسام، يتم خلط معلق البكتيريا هذا مع البلازميد المراد تحويله. يتم وضع الخليط في الكوفيت، ويتم ضبط الجهد والسعة، ويتم إدخال الكوفيت في الكهرومسام. تتطلب العملية اتصالًا مباشرًا بين الأقطاب الكهربائية والمعلق. بعد الكهرومسام مباشرة، يضاف ملليلتر واحد من الوسط السائل إلى البكتيريا (في الكوفيت أو في أنبوب إيبندورف ) ، ويتم تحضين الأنبوب في درجة الحرارة المثلى للبكتيريا لمدة ساعة أو أكثر للسماح باستعادة الخلايا والتعبير عن البلازميد، يليه زراعة البكتيريا على أطباق الأجار .

يعتمد نجاح الكهرومسام بشكل كبير على نقاء محلول البلازميد، وخاصة على محتواه من الملح. قد تتسبب المحاليل ذات التركيزات العالية من الملح في حدوث تفريغ كهربائي (يُعرف بالقوس الكهربائي )، والذي غالبًا ما يقلل من قابلية البكتيريا للبقاء على قيد الحياة. لمزيد من التحقيق التفصيلي في العملية، يجب إيلاء المزيد من الاهتمام لمقاومة خرج جهاز المسام ومقاومة مدخل تعليق الخلايا (على سبيل المثال محتوى الملح ).

نظرًا لأن غشاء الخلية غير قادر على تمرير التيار (باستثناء القنوات الأيونية)، فإنه يعمل كمكثف كهربائي. يؤدي تعريض الأغشية لحقل كهربائي عالي الجهد إلى انهيارها المؤقت، مما يؤدي إلى ظهور مسام كبيرة بما يكفي للسماح للجزيئات الكبيرة (مثل الحمض النووي) بالدخول إلى الخلية أو الخروج منها. [16]

بالإضافة إلى ذلك، يمكن استخدام الكهرومسام لزيادة نفاذية الخلايا أثناء الحقن والعمليات الجراحية في الرحم. وبشكل خاص، تسمح الكهرومسام بنقل أكثر كفاءة للحمض النووي والحمض النووي الريبي والحمض النووي الريبي القصير وجميع الأحماض النووية إلى خلايا الفئران والجرذان. يعتمد نجاح الكهرومسام في الجسم الحي بشكل كبير على الجهد والتكرار والنبضات والمدة. تكون الأنظمة العصبية المركزية النامية أكثر فعالية للكهرومسام في الجسم الحي بسبب وضوح البطينين لحقن الأحماض النووية، فضلاً عن زيادة نفاذية الخلايا المنقسمة. يتم إجراء الكهرومسام للأجنة المحقونة في الرحم من خلال جدار الرحم، غالبًا باستخدام أقطاب كهربائية من نوع الملقط للحد من تلف الجنين. [17]

في المختبرودراسات الحيوان

تم وصف نقل الجينات الكهربائي في الجسم الحي لأول مرة في عام 1991 [18] واليوم هناك العديد من الدراسات السريرية السابقة لنقل الجينات الكهربائي. تُستخدم هذه الطريقة لتوصيل مجموعة كبيرة ومتنوعة من الجينات العلاجية لعلاج العديد من الأمراض المحتملة، مثل: اضطرابات الجهاز المناعي والأورام والاضطرابات الأيضية والأمراض أحادية الجين وأمراض القلب والأوعية الدموية وتسكين الآلام.... [19] [20] [21]

فيما يتعلق بالكهرباء غير القابلة للعكس، تم الانتهاء من أول علاج ناجح للأورام الجلدية الخبيثة المزروعة في الفئران في عام 2007 من قبل مجموعة من العلماء الذين حققوا استئصال الورم بالكامل في 12 من أصل 13 فأرًا. لقد حققوا ذلك عن طريق إرسال 80 نبضة من 100 ميكروثانية بتردد 0.3 هرتز مع حجم مجال كهربائي يبلغ 2500 فولت / سم لعلاج الأورام الجلدية. [22] حاليًا، تواصل عدد من الشركات، بما في ذلك AngioDynamics، Inc. وVoltMed، Inc.، تطوير ونشر تقنيات تعتمد على الكهرومسام غير القابلة للعكس في البيئات السريرية.

كانت المجموعة الأولى التي نظرت في الكهرومسام للتطبيقات الطبية بقيادة لويس إم مير في معهد جوستاف روسي. في هذه الحالة، نظروا في استخدام الكهرومسام العكسي جنبًا إلى جنب مع الجزيئات الكبيرة غير المنفذة. أجرى باحثون في كلية الطب في شرق فيرجينيا وجامعة أولد دومينيون أول بحث يبحث في كيفية استخدام نبضات النانو ثانية على الخلايا البشرية ، ونُشر في عام 2003. [23]

التطبيقات الطبية

كان أول تطبيق طبي للكهرباء المسامية هو إدخال أدوية مضادة للسرطان ضعيفة النفاذية إلى عقيدات الورم. [24] وسرعان ما أصبح نقل الجينات بالكهرباء محل اهتمام خاص بسبب تكلفته المنخفضة وسهولة تحقيقه وسلامته. أي أن النواقل الفيروسية قد تكون لها قيود خطيرة من حيث المناعة والقدرة على إحداث الأمراض عند استخدامها لنقل الحمض النووي. [25]

يتم استخدام وتقييم الكهربية غير القابلة للعكس كعلاج استئصال قلبي لقتل مناطق صغيرة جدًا من عضلة القلب. يتم ذلك لعلاج عدم انتظام ضربات القلب . تقوم القسطرة القلبية بتوصيل سلاسل من النبضات الكهربائية عالية الجهد فائقة السرعة والتي تشكل مسامًا غير قابلة للعكس في أغشية الخلايا، مما يؤدي إلى موت الخلايا. يُعتقد أنها تسمح بانتقائية أفضل من التقنيات السابقة، التي استخدمت الحرارة أو البرودة لقتل أحجام أكبر من العضلات. [26]

وقد وجد أن الجهد العالي للكهرباء المسامية في الخنازير يدمر الخلايا المستهدفة بشكل لا رجعة فيه ضمن نطاق ضيق مع ترك الخلايا المجاورة دون أن تتأثر، وبالتالي يمثل علاجًا جديدًا واعدًا للسرطان وأمراض القلب وحالات مرضية أخرى تتطلب إزالة الأنسجة. [27] وقد أثبتت الكهرباء المسامية غير القابلة للعكس (IRE) فعاليتها منذ ذلك الحين في علاج سرطان الإنسان، حيث يستخدم الجراحون في جامعة جونز هوبكنز وغيرها من المؤسسات الآن التكنولوجيا لعلاج سرطان البنكرياس الذي كان يُعتقد سابقًا أنه غير قابل للاستئصال. [28]

كما تم الإبلاغ عن المرحلة الأولى من التجارب السريرية لنقل الجينات في المرضى المصابين بسرطان الجلد النقيلي. [29] [30] تم إجراء توصيل بوساطة الكهرومسام لجين ترميز البلازميد للإنترلوكين 12 (pIL-12) وتم مراقبة السلامة والتحمل والتأثير العلاجي. وخلصت الدراسة إلى أن نقل الجينات بالكهرباء مع pIL-12 آمن وجيد التحمل. بالإضافة إلى ذلك، لوحظت استجابة جزئية أو كاملة أيضًا في النقائل البعيدة غير المعالجة، مما يشير إلى تأثير العلاج الجهازي. بناءً على هذه النتائج، يخططون بالفعل للانتقال إلى الدراسة السريرية للمرحلة الثانية. يوجد حاليًا العديد من الدراسات السريرية الجارية لنقل الجينات بالكهرباء [31] حيث تتم مراقبة السلامة والتحمل وفعالية التحصين بلقاح الحمض النووي، والذي يتم إعطاؤه عن طريق النبضات الكهربائية.

على الرغم من أن هذه الطريقة ليست جهازية، بل محلية بحتة، إلا أنها لا تزال الاستراتيجية غير الفيروسية الأكثر كفاءة لتوصيل الجينات.

إن-تاير

أثبتت تقنية حديثة تسمى بالكهرباء غير الحرارية غير العكسية (N-TIRE) نجاحها في علاج العديد من أنواع الأورام والأنسجة غير المرغوب فيها الأخرى. يتم إجراء هذا الإجراء باستخدام أقطاب كهربائية صغيرة (قطرها حوالي 1 مم)، توضع إما داخل الأنسجة المستهدفة أو حولها لتطبيق دفعات قصيرة ومتكررة من الكهرباء بجهد وتردد محددين مسبقًا. تعمل هذه الدفعات من الكهرباء على زيادة الجهد الغشائي الساكن (TMP)، بحيث تتشكل مسام نانوية في الغشاء البلازمي. عندما تكون الكهرباء المطبقة على الأنسجة أعلى من عتبة المجال الكهربائي للأنسجة المستهدفة، تصبح الخلايا نافذة بشكل دائم من تكوين المسام النانوية. ونتيجة لذلك، تصبح الخلايا غير قادرة على إصلاح الضرر وتموت بسبب فقدان التوازن. [32] تعد تقنية N-TIRE فريدة من نوعها بين تقنيات استئصال الأورام الأخرى حيث أنها لا تسبب ضررًا حراريًا للأنسجة المحيطة بها.

الكهربة القابلة للعكس

على النقيض من ذلك، تحدث عملية الكهرومسامية العكسية عندما تكون الكهرباء المطبقة بالأقطاب الكهربائية أقل من عتبة المجال الكهربائي للأنسجة المستهدفة. ولأن الكهرباء المطبقة أقل من عتبة الخلايا، فإنها تسمح للخلايا بإصلاح الطبقة الثنائية من الفوسفوليبيد ومواصلة وظائفها الخلوية الطبيعية. يتم إجراء عملية الكهرومسامية العكسية عادةً مع العلاجات التي تتضمن إدخال عقار أو جين (أو جزيء آخر غير نافذ عادةً لغشاء الخلية) إلى الخلية. لا تتمتع جميع الأنسجة بنفس عتبة المجال الكهربائي؛ لذلك يجب إجراء حسابات دقيقة قبل العلاج لضمان السلامة والفعالية. [33]

من أهم مزايا استخدام تقنية N-TIRE أنه عند استخدامها بشكل صحيح وفقًا لحسابات دقيقة، فإنها تؤثر فقط على الأنسجة المستهدفة. ولا تتأثر البروتينات والمصفوفة خارج الخلية والهياكل الحيوية مثل الأوعية الدموية والأعصاب بهذا العلاج، وتظل سليمة. وهذا يسمح بالتعافي بشكل أسرع، ويسهل استبدال الخلايا السرطانية الميتة بخلايا صحية بشكل أسرع. [34]

قبل إجراء العملية، يجب على العلماء حساب ما يجب القيام به بدقة وعلاج كل مريض على أساس كل حالة على حدة. للقيام بذلك، تُستخدم عادةً تقنيات التصوير مثل التصوير المقطعي المحوسب والتصوير بالرنين المغناطيسي لإنشاء صورة ثلاثية الأبعاد للورم. من هذه المعلومات، يمكنهم تقريب حجم الورم وتحديد أفضل مسار للعمل بما في ذلك موقع إدخال الأقطاب الكهربائية والزاوية التي يتم إدخالها بها والجهد المطلوب والمزيد، باستخدام تقنية البرمجيات. غالبًا ما يتم استخدام جهاز التصوير المقطعي المحوسب للمساعدة في وضع الأقطاب الكهربائية أثناء الإجراء، خاصةً عندما يتم استخدام الأقطاب الكهربائية لعلاج الأورام في المخ. [35]

الإجراء بأكمله سريع جدًا، ويستغرق عادةً حوالي خمس دقائق. معدل نجاح هذه الإجراءات مرتفع [16] وهو واعد جدًا للعلاج المستقبلي لدى البشر. أحد عيوب استخدام N-TIRE هو أن الكهرباء التي يتم توصيلها من الأقطاب الكهربائية يمكن أن تحفز خلايا العضلات على الانقباض، مما قد يؤدي إلى عواقب مميتة اعتمادًا على الموقف. لذلك، يجب استخدام عامل مشلل عند إجراء الإجراء. العوامل المشللة التي تم استخدامها في مثل هذا البحث ناجحة [ بحاجة لمصدر ] ؛ ومع ذلك، هناك دائمًا بعض المخاطر، وإن كانت طفيفة، عند استخدام التخدير.

ه-فاير

تم تطوير تقنية أحدث تسمى بالكهرباء غير القابلة للعكس عالية التردد (H-FIRE). تستخدم هذه التقنية أقطابًا كهربائية لتطبيق دفعات ثنائية القطب من الكهرباء بتردد عالٍ، على عكس الدفعات أحادية القطب من الكهرباء بتردد منخفض. يتمتع هذا النوع من الإجراءات بنفس نجاح استئصال الورم مثل N-TIRE. ومع ذلك، فإنه يتمتع بميزة مميزة واحدة، لا تسبب H-FIRE تقلص العضلات لدى المريض وبالتالي لا توجد حاجة إلى عامل شل. [36] علاوة على ذلك، فقد ثبت أن H-FIRE تنتج استئصالات أكثر قابلية للتنبؤ بسبب الاختلاف الأقل في الخصائص الكهربائية للأنسجة عند الترددات الأعلى. [37]

توصيل الأدوية والجينات

يمكن أيضًا استخدام الكهرومسام للمساعدة في توصيل الأدوية أو الجينات إلى الخلية من خلال تطبيق نبضات كهربائية قصيرة ومكثفة تنفذ مؤقتًا غشاء الخلية، مما يسمح بنقل الجزيئات التي لا يتم نقلها عبر غشاء الخلية. يشار إلى هذا الإجراء باسم العلاج الكيميائي الكهربائي عندما تكون الجزيئات المراد نقلها عبارة عن عوامل علاجية كيميائية أو نقل كهربائي للجين عندما يكون الجزيء المراد نقله هو الحمض النووي. يستخدم العلماء من معهد كارولينسكا وجامعة أكسفورد الكهرومسام للإكسوسومات لتوصيل siRNAs، والأليغونوكليوتيدات المضادة للحس، والعوامل العلاجية الكيميائية والبروتينات على وجه التحديد إلى الخلايا العصبية بعد حقنها بشكل جهازي (في الدم). نظرًا لأن هذه الإكسوسومات قادرة على عبور حاجز الدم في الدماغ ، يمكن لهذا البروتوكول حل مشكلة ضعف توصيل الأدوية إلى الجهاز العصبي المركزي، وعلاج مرض الزهايمر ، ومرض باركنسون ، وسرطان الدماغ ، من بين حالات أخرى. [38]

إن تحويل البكتيريا هو عمومًا أسهل طريقة لإنتاج كميات كبيرة من بروتين معين مطلوب لأغراض التكنولوجيا الحيوية أو في الطب. ونظرًا لأن نقل الجينات بالكهرباء هو تقنية بسيطة وسريعة وفعالة للغاية، فقد أصبح في البداية بديلاً مناسبًا جدًا لإجراءات التحويل الأخرى. [39]

أظهرت الأبحاث الحديثة أنه يمكن استخدام الموجات الصادمة لمعالجة غشاء الخلية مسبقًا قبل الكهرومسام. [40] [41] وقد أظهرت هذه الاستراتيجية التآزرية أنها تقلل من متطلبات الجهد الخارجي وتخلق مسامًا أكبر. كما يسمح تطبيق الموجات الصادمة باستهداف موقع الغشاء المطلوب. يسمح هذا الإجراء بالتحكم في حجم المسام.

الآلية الفيزيائية

مقطع عرضي تخطيطي يوضح الترتيب النظري للدهون في مسام كارهة للماء (أعلى) ومسام محبة للماء (أسفل).

تسمح الكهرومسام بإدخال جزيئات كبيرة مشحونة للغاية مثل الحمض النووي إلى الخلايا والتي لن تنتشر بشكل سلبي عبر قلب الطبقة الثنائية الكارهة للماء. [2] تشير هذه الظاهرة إلى أن الآلية هي إنشاء ثقوب مملوءة بالماء على نطاق نانومتر في الغشاء. [42] تم تصوير المسام الكهربائية بصريًا في نماذج ثنائية الطبقة الدهنية مثل طبقات ثنائية واجهة القطرات [43] والحويصلات أحادية الصفائح العملاقة، [44] بينما يبدو أن إضافة البروتينات الهيكلية الخلوية مثل شبكات الأكتين إلى الحويصلات أحادية الصفائح العملاقة تمنع تكوين المسام الكهربائية المرئية. [ 45] ظهرت أيضًا أدلة تجريبية لشبكات الأكتين في تنظيم نفاذية غشاء الخلية. [46] على الرغم من أن الكهرومسام والانهيار العازل ينتجان عن تطبيق مجال كهربائي، إلا أن الآليات المعنية مختلفة تمامًا. في الانهيار العازل، يتم تأين مادة الحاجز، مما يخلق مسارًا موصلًا. وبالتالي فإن تغيير المادة كيميائي بطبيعته. على النقيض من ذلك، أثناء الكهرومسام، لا تتغير جزيئات الدهون كيميائيًا ولكنها ببساطة تغير موضعها، مما يؤدي إلى فتح مسام تعمل كمسار موصل عبر الطبقة الثنائية حيث تمتلئ بالماء.

الكهرومسامية هي ظاهرة ديناميكية تعتمد على الجهد الغشائي المحلي عند كل نقطة على غشاء الخلية. ومن المقبول عمومًا أنه بالنسبة لمدة نبضة وشكل معينين، توجد عتبة جهد غشائي محددة لظهور ظاهرة الكهرومسامية (من 0.5 فولت إلى 1 فولت). وهذا يؤدي إلى تحديد عتبة حجم المجال الكهربائي للكهرومسامية (E th ). أي أن الخلايا الموجودة داخل المناطق حيث E ≧E th فقط هي التي يتم كهرومساميتها. إذا تم الوصول إلى عتبة ثانية (E ir ) أو تجاوزها، فإن الكهرومسامية ستؤثر على قابلية الخلايا للحياة، أي الكهرومسامية غير القابلة للعكس (IRE). [47]

الكهرومسام هي عملية متعددة الخطوات مع عدة مراحل مميزة. [48] [49] أولاً، يجب تطبيق نبضة كهربائية قصيرة. ستكون المعلمات النموذجية 300-400 مللي فولت لأقل من 1 مللي ثانية عبر الغشاء (ملاحظة - تكون الفولتية المستخدمة في تجارب الخلايا أكبر بكثير لأنها تُطبق عبر مسافات كبيرة إلى المحلول السائب، وبالتالي فإن المجال الناتج عبر الغشاء الفعلي لا يمثل سوى جزء صغير من التحيز المطبق). عند تطبيق هذا الجهد، يشحن الغشاء مثل المكثف من خلال هجرة الأيونات من المحلول المحيط. بمجرد تحقيق المجال الحرج، يحدث إعادة ترتيب موضعي سريع في مورفولوجيا الدهون. يُعتقد أن البنية الناتجة هي "مسام أولية" لأنها ليست موصلة للكهرباء ولكنها تؤدي بسرعة إلى إنشاء مسام موصلة. [50] يأتي الدليل على وجود مثل هذه المسام الأولية في الغالب من "وميض" المسام، مما يشير إلى انتقال بين الحالات الموصلة والعازلة. [51] وقد اقترح أن هذه المسام الأولية عبارة عن عيوب كارهة للماء صغيرة (~3 Å). وإذا كانت هذه النظرية صحيحة، فيمكن تفسير الانتقال إلى الحالة الموصلة من خلال إعادة الترتيب عند حافة المسام، حيث تطوى رؤوس الدهون لإنشاء واجهة محبة للماء. وأخيرًا، يمكن لهذه المسام الموصلة إما أن تلتئم، مما يؤدي إلى إعادة إغلاق الطبقة الثنائية أو تتوسع، مما يؤدي في النهاية إلى تمزيقها. ويعتمد المصير الناتج على ما إذا كان حجم العيب الحرج قد تم تجاوزه [52] والذي يعتمد بدوره على المجال المطبق والإجهاد الميكانيكي المحلي وطاقة حافة الطبقة الثنائية.

الكهربة الجينية

يؤدي تطبيق نبضات كهربائية بقوة كافية على الخلية إلى زيادة فرق الجهد عبر الغشاء، مما يؤدي إلى زعزعة استقرار الغشاء. تزداد نفاذية غشاء الخلية وإلا تدخل الجزيئات غير النافذة إلى الخلية. [53] [54] على الرغم من أن آليات نقل الجينات الكهربية لم يتم فهمها بالكامل بعد، فقد ثبت أن إدخال الحمض النووي يحدث فقط في جزء الغشاء المواجه للكاثود وأن هناك عدة خطوات مطلوبة للانتقال الناجح: الهجرة الكهربية للحمض النووي نحو الخلية، وإدخال الحمض النووي في الغشاء، والانتقال عبر الغشاء، وهجرة الحمض النووي نحو النواة، ونقل الحمض النووي عبر الغلاف النووي وأخيرًا التعبير الجيني. [55] هناك عدد من العوامل التي يمكن أن تؤثر على كفاءة نقل الجينات الكهربية، مثل: درجة الحرارة، ومعايير النبضات الكهربائية، وتركيز الحمض النووي، ومحلول الكهرومسام المستخدم، وحجم الخلية وقدرة الخلايا على التعبير عن الجينات المنقولة. [56] في نقل الجينات داخل الجسم ، يعد انتشار الحمض النووي عبر المصفوفة خارج الخلية، وخصائص الأنسجة والتوصيل الكلي للأنسجة أمرًا بالغ الأهمية أيضًا. [57]

تاريخ

في ستينيات القرن العشرين، كان من المعروف أنه من خلال تطبيق مجال كهربائي خارجي، يمكن إنشاء جهد غشائي كبير عند القطبين للخلية. وفي سبعينيات القرن العشرين، تم اكتشاف أنه عندما يصل الجهد الغشائي إلى مستوى حرج، فإن الغشاء سوف ينهار ويمكنه التعافي. [58] وبحلول ثمانينيات القرن العشرين، تم استخدام هذه الفتحة لإدخال مواد/جزيئات مختلفة إلى الخلايا. [59]

مراجع

  1. ^ Muralidharan A, Boukany PE (ديسمبر 2023). "النقل الكهربائي لتوصيل الأحماض النووية والبروتينات". Trends in Biotechnology . 42 (6): 780–798. doi : 10.1016/j.tibtech.2023.11.009 . PMID  38102019.
  2. ^ abc Neumann E، Schaefer-Ridder M، Wang Y، Hofschneider PH (1982). "نقل الجينات إلى خلايا الورم الليفي في الفئران عن طريق الكهرومسام في المجالات الكهربائية العالية". مجلة EMBO . 1 (7): 841–845. doi :10.1002/j.1460-2075.1982.tb01257.x. PMC 553119. PMID  6329708 . 
  3. ^ Jimbo Y, Sasaki D, Ohya T, Lee S, Lee W, Arab Hassani F, et al. (سبتمبر 2021). "مصفوفة ترانزستور عضوية لتسجيل جهد الفعل داخل الخلايا متعدد النقاط". وقائع الأكاديمية الوطنية للعلوم في الولايات المتحدة الأمريكية . 118 (39): e2022300118. رمز Bibcode : 2021PNAS..11822300J. doi : 10.1073 /pnas.2022300118 . PMC 8488610. PMID  34544852. S2CID  237584521. 
  4. ^ Chang DC (2006-09-15). "Electroporation and Electrofusion". في Meyers RA (محرر). موسوعة علم الأحياء الخلوي الجزيئي والطب الجزيئي . Wiley-VCH Verlag GmbH & Co. KGaA. doi :10.1002/3527600906.mcb.200300026. ISBN 9783527600908.
  5. ^ Liu J, Chang W, Pan L, Liu X, Su L, Zhang W, et al. (ديسمبر 2018). "طريقة محسنة لإعداد تحويل عالي الكفاءة لبكتيريا الإشريكية القولونية مع كل من البلازميدات وشظايا الحمض النووي الأكبر". المجلة الهندية لعلم الأحياء الدقيقة . 58 (4): 448-456. doi :10.1007/s12088-018-0743-z. PMC 6141401. PMID 30262955  . 
  6. ^ Sugar IP, Neumann E (مايو 1984). "نموذج عشوائي لمسام الغشاء المستحثة بالمجال الكهربائي. الكهرومسامية". الكيمياء الحيوية الفيزيائية . 19 (3): 211–225. doi :10.1016/0301-4622(84)87003-9. PMID  6722274.
  7. ^ آن ترافتون (2 فبراير 2016). "الضغط على الخلايا يعزز تصوير البروتين". مكتب أخبار معهد ماساتشوستس للتكنولوجيا.
  8. ^ جاليجو-بيريز د، بال د، غاتاك إس، مالكوك الخامس، هيجيتا-كاسترو إن، جينياوالي إس، وآخرون. (أكتوبر 2017). “ترنسفكأيشن النانو الموضعي للأنسجة يتوسط إعادة برمجة وإنقاذ السدى غير الفيروسي”. تكنولوجيا النانو الطبيعة . 12 (10): 974-979. بيب كود :2017NatNa..12..974G. دوى :10.1038/nnano.2017.134. بمك 5814120 . بميد  28785092. 
  9. ^ Muralidharan A, Pesch GR, Hubbe H, Rems L, Nouri-Goushki M, Boukany PE (أكتوبر 2022). "مجموعة مصيدة ميكروية على شريحة للكهرباء الموضعية ونقل الجينات الكهربية". الكيمياء الحيوية الكهربائية . 147 : 108197. doi : 10.1016/j.bioelechem.2022.108197 . PMID  35810498.
  10. ^ McClenaghan NH (مايو 2007). "التنظيم الفسيولوجي لخلايا البنكرياس {بيتا}: رؤى وظيفية لفهم وعلاج مرض السكري". علم وظائف الأعضاء التجريبي . 92 (3): 481-96. doi : 10.1113/expphysiol.2006.034835 . PMID  17272356. S2CID  22548866.
  11. ^ Yanai G، Hayashi T، Zhi Q، Yang KC، Shirouzu Y، Shimabukuro T، وآخرون (2013). "الدمج الكهربائي للخلايا الجذعية المتوسطة وخلايا الجزر لعلاج مرض السكري: نموذج الفئران". PLOS ONE . 8 (5): e64499. Bibcode :2013PLoSO...864499Y. doi : 10.1371/journal.pone.0064499 . PMC 3665804. PMID  23724055 . 
  12. ^ McCluskey JT, Hamid M, Guo-Parke H, McClenaghan NH, Gomis R, Flatt PR (يونيو 2011). "تطوير وتوصيف وظيفي لخطوط خلايا بيتا البنكرياسية البشرية التي تطلق الأنسولين والتي تم إنتاجها عن طريق الاندماج الكهربائي". مجلة الكيمياء الحيوية . 286 (25): 21982-92. doi : 10.1074/jbc.M111.226795 . PMC 3121343. PMID  21515691 . 
  13. ^ Sretavan DW, Chang W, Hawkes E, Keller C, Kliot M (أكتوبر 2005). "الجراحة المجهرية على محاور عصبية مفردة". جراحة الأعصاب . 57 (4): 635–46، المناقشة 635–46. doi :10.1227/01.NEU.0000175545.57795.ac. PMID  16239875. S2CID  196411777.
  14. ^ تاكاكورا كيه، كاجيهارا إم، إيتو زد، أوكوسا تي، جونج جيه، كويدو إس (مارس 2015). "خلايا الاندماج بين الورم الشجري والورم في العلاج المناعي للسرطان". ديسكفري ميديسين . 19 (104): 169-74. PMID  25828520.
  15. ^ Trontelj K, Rebersek M, Kanduser M, Serbec VC, Sprohar M, Miklavcic D (نوفمبر 2008). "تحسين عملية دمج الخلايا الكهروكيميائية السائبة في المختبر لإنتاج خلايا الورم الهجين البشري-الفأري". الكيمياء الحيوية الكهربائية . 74 (1): 124–9. doi :10.1016/j.bioelechem.2008.06.003. PMID  18667367.
  16. ^ ab Potter H (مايو 2003). "الفصل 9: التحويل الجيني عن طريق الكهرومسامية". البروتوكولات الحالية في علم الأحياء الجزيئي . المجلد. الفصل 9. ص. الوحدة 9.3. doi :10.1002/0471142727.mb0903s62. ISBN 978-0471142720. PMC  2975437 . PMID  18265334.
  17. ^ Saito T (2010). "Embryonic In Vivo Electroporation in the Mouse". دليل التقنيات في تطوير الفئران، الجزء ب: علم الوراثة الجزيئي للفئران . طرق في علم الإنزيمات. المجلد 477 (الطبعة الثانية). Elsevier. ص 37-50. doi :10.1016/s0076-6879(10)77003-8. ISBN 978-0-12-384880-2. PMID  20699135 . تم الاسترجاع في 2022-09-19 .
  18. ^ Titomirov AV, Sukharev S, Kistanova E (يناير 1991). "الكهرباء الحيوية والتحول المستقر لخلايا الجلد لدى الفئران حديثي الولادة بواسطة الحمض النووي البلازميدي". Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - بنية الجينات والتعبير عنها . 1088 (1): 131–4. doi :10.1016/0167-4781(91)90162-F. PMID  1703441.
  19. ^ Heller LC, Coppola D (أكتوبر 2002). "التوصيل الكهربائي للحمض النووي البلازميدي الناقل يثير تأثيرًا مضادًا للأورام". العلاج الجيني . 9 (19): 1321–5. doi : 10.1038/sj.gt.3301802 . PMID  12224015.
  20. ^ Chuang IC, Jhao CM, Yang CH, Chang HC, Wang CW, Lu CY, et al. (2004). "Intramuscular electroporation with the pro-opiomelanocortin gene in rat adjuvant arthritis". Arthritis Research & Therapy . 6 (1): R7–R14. doi : 10.1186/ar1014 . PMC 400409. PMID  14979933 . 
  21. ^ Vilquin JT, Kennel PF, Paturneau-Jouas M, Chapdelaine P, Boissel N, Delaère P, et al. (يوليو 2001). "النقل الكهربائي للحمض النووي العاري في العضلات الهيكلية للنماذج الحيوانية لضمور العضلات". العلاج الجيني . 8 (14): 1097-107. doi :10.1038/sj.gt.3301484. PMID  11526457. S2CID  1081582.
  22. ^ الساكير ب، أندريه إف، بيرنات سي، كونولت إي، أوبولون بي، دافالوس آر في، وآخرون. (نوفمبر 2007). “استئصال الورم مع الكهربي الذي لا رجعة فيه”. بلوس واحد . 2 (11): هـ1135. بيب كود :2007PLoSO...2.1135A. دوى : 10.1371/journal.pone.0001135 . بمك 2065844 . بميد  17989772. 
  23. ^ Beebe SJ، Fox PM، Rec LJ، Willis EL، Schoenbach KH (أغسطس 2003). "الحقول الكهربائية النبضية عالية الكثافة التي تبلغ مدتها نانوثانية تحفز موت الخلايا البشرية". مجلة FASEB . 17 (11): 1493–5. doi : 10.1096/fj.02-0859fje . PMID  12824299. S2CID  13189517.
  24. ^ مير إل إم، بيليهراديك إم، دومينج سي، أورلوسكي إس، بودديفين بي، بيليهراديك جيه، وآخرون. (1991). “[العلاج الكيميائي الكهربائي، علاج جديد مضاد للأورام: أول تجربة سريرية]”. Comptes Rendus de l'Académie des Sciences، Série III (بالفرنسية). 313 (13): 613–8. بميد  1723647.
  25. ^ مارشال إي (ديسمبر 1999). "وفاة العلاج الجيني تدفع إلى مراجعة ناقل الفيروس الغدي". مجلة العلوم . 286 (5448): 2244–5. doi :10.1126/science.286.5448.2244. PMID  10636774. S2CID  46362535.
  26. ^ Tabaja C، Younis A، Hassan AA، Taigen TL، Nakagawa H، Saliba WI، وآخرون (سبتمبر 2023). "الكهرباء القائمة على القسطرة: تقنية جديدة لاستئصال القسطرة لاضطرابات نظم القلب". JACC. علم وظائف الأعضاء الكهربائية السريرية . 9 (9): 2008-2023. doi :10.1016/j.jacep.2023.03.014. PMID  37354168.
  27. ^ سارة يانج (2007-02-12). "تقنية طبية جديدة تثقب الخلايا، وقد تعالج الأورام" . تم الاسترجاع في 2007-12-13 .
  28. ^ "نعمة محتملة لمرضى سرطان البنكرياس". جراحة جونز هوبكنز: أخبار من قسم جراحة جونز هوبكنز . 2014-06-23. مؤرشف من الأصل في 2019-03-23 . تم الاسترجاع في 2014-07-09 .
  29. ^ Daud AI, DeConti RC, Andrews S, Urbas P, Riker AI, Sondak VK, et al. (ديسمبر 2008). "التجربة الأولى لفحص بلازميد الإنترلوكين-12 في المرضى المصابين بالورم الميلانيني النقيلي". مجلة علم الأورام السريري . 26 (36): 5896–903. doi :10.1200/JCO.2007.15.6794. PMC 2645111. PMID  19029422 . 
  30. ^ Cha E, Daud A (نوفمبر 2012). "الكهرباء الممتصة للبلازميد IL-12 في الورم الميلانيني". اللقاحات البشرية والعلاجات المناعية . 8 (11): 1734–8. doi :10.4161/hv.22573. PMC 3601150. PMID  23151447 . 
  31. ^ "2 دراسة تم العثور عليها عن: نقل الكهرباء الجيني". ClinicalTrials.gov . المكتبة الوطنية للطب . تم الاسترجاع في 19 سبتمبر 2022 .
  32. ^ Garcia PA, Rossmeisl JH, Davalos RV (2011). "تغيرات التوصيل الكهربائي أثناء العلاج غير القابل للعكس بالكهرباء لسرطان الدماغ". المؤتمر الدولي السنوي لعام 2011 لجمعية الهندسة في الطب والأحياء التابعة لمعهد مهندسي الكهرباء والإلكترونيات . المجلد 2011. ص 739-42. doi :10.1109/IEMBS.2011.6090168. ISBN 978-1-4577-1589-1. PMID  22254416. S2CID  4953213.
  33. ^ Garcia PA, Neal RE, Rossmeisl JH, Davalos RV (2010). "الكهرباء غير الحرارية غير القابلة للعكس للاضطرابات داخل الجمجمة العميقة". المؤتمر الدولي السنوي لعام 2010 لمعهد مهندسي الكهرباء والإلكترونيات للهندسة في الطب والأحياء . المجلد. 2010. ص. 2743-6. doi :10.1109/IEMBS.2010.5626371. ISBN 978-1-4244-4123-5. PMID  21095962. S2CID  9589956.
  34. ^ Garcia PA, Rossmeisl JH, Neal RE, Ellis TL, Olson JD, Henao-Guerrero N, et al. (يوليو 2010). "Intracranial nonthermal irreversible electroporation: in vivo analysis". مجلة علم الأحياء الغشائي . 236 (1): 127–36. CiteSeerX 10.1.1.679.527 . doi :10.1007/s00232-010-9284-z. PMID  20668843. S2CID  10958480. 
  35. ^ نيل ري، جارسيا بي إيه، روسمايسل جيه إتش، دافالوس آر في (2010). "دراسة باستخدام الكهرومسامية غير القابلة للعكس لعلاج الأورام الكبيرة غير المنتظمة لدى مريض من الكلاب". المؤتمر الدولي السنوي لعام 2010 لمعهد مهندسي الكهرباء والإلكترونيات للهندسة في الطب والأحياء . المجلد 2010. ص 2747-2750. doi :10.1109/IEMBS.2010.5626372. ISBN 978-1-4244-4123-5. PMID  21095963. S2CID  24348785.
  36. ^ Arena CB, Sano MB, Rossmeisl JH, Caldwell JL, Garcia PA, Rylander MN, et al. (نوفمبر 2011). "الكهرباء المسامية عالية التردد غير العكسية (H-FIRE) للاستئصال غير الحراري بدون تقلص العضلات". BioMedical Engineering OnLine . 10 : 102. doi : 10.1186/1475-925X-10-102 . PMC 3258292. PMID  22104372 . 
  37. ^ Bhonsle SP, Arena CB, Sweeney DC, Davalos RV (27 أغسطس 2015). "تخفيف تغيرات المعاوقة الناتجة عن العلاج بالكهرباء باستخدام دفعات من النبضات ثنائية القطب عالية التردد". BioMedical Engineering OnLine . 13 (Suppl 3): S3. doi : 10.1186/1475-925X-14-S3-S3 . PMC 4565149. PMID  26355870 . 
  38. ^ El-Andaloussi S, Lee Y, Lakhal-Littleton S, Li J, Seow Y, Gardiner C, et al. (ديسمبر 2012). "توصيل الرنا المتداخل صغير الحجم بوساطة الإكسوسوم في المختبر وفي الجسم الحي". بروتوكولات الطبيعة . 7 (12): 2112–26. doi :10.1038/nprot.2012.131. PMID  23154783. S2CID  34413410.
  39. ^ كالفين إن إم، هاناوالت بي سي (يونيو 1988). "التحويل عالي الكفاءة لخلايا البكتيريا عن طريق الكهرومسام". مجلة علم البكتيريا . 170 (6): 2796-801. doi :10.1128/jb.170.6.2796-2801.1988. PMC 211205. PMID  3286620 . 
  40. ^ Hu Q, Hossain S, Joshi RP (2018-06-25). "تحليل استراتيجية الموجة الصادمة المزدوجة والنبضات الكهربائية فائقة القصر للتلاعب الكهربائي بمسامات الغشاء النانوية". مجلة الفيزياء د: الفيزياء التطبيقية . 51 (28): 285403. رمز Bibcode : 2018JPhD...51B5403H. doi : 10.1088/1361-6463/aaca7a. ISSN  0022-3727. S2CID  125134522.
  41. ^ حسين س، عبد الجواد أ (2020-01-02). "تحليل نفاذية الغشاء بسبب التأثير التآزري لتطبيق موجة الصدمة المتحكم فيها والحقل الكهربائي". علم الأحياء الكهرومغناطيسي والطب . 39 (1): 20-29. doi :10.1080/15368378.2019.1706553. PMID  31868023. S2CID  209446699.
  42. ^ Chang DC, Reese TS (يوليو 1990). "التغيرات في بنية الغشاء الناتجة عن الكهرومسام كما كشفت عنها المجهر الإلكتروني السريع التجميد". مجلة الفيزياء الحيوية . 58 (1): 1-12. رمز Bibcode :1990BpJ....58....1C. doi :10.1016/S0006-3495(90)82348-1. PMC 1280935. PMID  2383626 . 
  43. ^ Sengel JT, Wallace MI (مايو 2016). "تصوير ديناميكيات المسام الكهربائية الفردية". وقائع الأكاديمية الوطنية للعلوم في الولايات المتحدة الأمريكية . 113 (19): 5281-5286. Bibcode :2016PNAS..113.5281S. doi : 10.1073/pnas.1517437113 . PMC 4868429. PMID  27114528 . 
  44. ^ ساشديف إس، موراليداران أ، تشودري دي كيه، بيرييه دي إل، ريمس إل، كروتزر إم تي، وآخرون. (ديسمبر 2019). “انتقال الحمض النووي إلى حويصلات عملاقة أحادية الصفيحة أثناء عملية التثقيب الكهربائي مستقل عن حجم الحمض النووي”. المادة الناعمة . 15 (45): 9187-9194. بيب كود :2019SMat...15.9187S. دوى : 10.1039/C9SM01274E . اتش دي ال : 1887/85963 . بميد  31595286.
  45. ^ Perrier DL, Vahid A, Kathavi V, Stam L, Rems L, Mulla Y, et al. (مايو 2019). "استجابة شبكة الأكتين في الحويصلات تحت النبضات الكهربائية". التقارير العلمية . 9 (1): 8151. Bibcode :2019NatSR...9.8151P. doi :10.1038/s41598-019-44613-5. PMC 6544639. PMID  31148577 . 
  46. ^ Muralidharan A، Rems L، Kreutzer MT، Boukany PE (يناير 2021). “شبكات الأكتين تنظم نفاذية غشاء الخلية أثناء الكهربة”. Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - الأغشية الحيوية . 1863 (1): 183468. دوى : 10.1016/j.bbamem.2020.183468 . بميد  32882211.
  47. ^ Ivorra A, Rubinsky B. "Gels with predetermined Conductivity used in electroporation of tissue USPTO Application #: 20080214986 — Class: 604 21 (USPTO)". مؤرشف من الأصل في 2014-10-22 . تم الاسترجاع في 2008-11-21 .
  48. ^ Ho SY, Mittal GS (1996). "الكهرباء المسامية لأغشية الخلايا: مراجعة". المراجعات النقدية في التكنولوجيا الحيوية . 16 (4): 349–62. doi :10.3109/07388559609147426. PMID  8989868.
  49. ^ Scuderi M، Dermol-Cerne J، Amaral C، Muralidharan A، Boukany PE، Rems L (2022). "يجب إعادة النظر في نماذج الكهرومسام والنقل الجزيئي عبر الغشاء المرتبط بها". الكيمياء الحيوية الكهربائية . 147 : 108216. doi : 10.1016/j.bioelechem.2022.108216 . PMID  35932533.
  50. ^ Becker SM, Kuznetsov AV (أكتوبر 2007). "ارتفاع درجة الحرارة المحلية يؤثر على تطور مسام الكهرومسامية في الجسم الحي: نموذج رقمي لانتقال الطور الدهني للطبقة القرنية". مجلة الهندسة الميكانيكية الحيوية . 129 (5): 712-21. doi :10.1115/1.2768380. PMID  17887897.
  51. ^ Melikov KC, Frolov VA, Shcherbakov A, Samsonov AV, Chizmadzhev YA, Chernomordik LV (أبريل 2001). "المسام الأولية غير الموصلة الناتجة عن الجهد والمسام المفردة غير المستقرة في الطبقة الدهنية ثنائية الطبقة غير المعدلة". مجلة البيوفيزياء . 80 (4): 1829–36. رمز Bibcode :2001BpJ....80.1829M. doi :10.1016/S0006-3495(01)76153-X. PMC 1301372. PMID  11259296 . 
  52. ^ Joshi RP, Schoenbach KH (يوليو 2000). "ديناميكيات الكهرومسامية في الخلايا البيولوجية المعرضة لنبضات كهربائية فائقة السرعة: دراسة محاكاة عددية". Physical Review E. 62 ( 1 Pt B): 1025–33. Bibcode :2000PhRvE..62.1025J. doi :10.1103/PhysRevE.62.1025. PMID  11088559.
  53. ^ Kotnik T, Miklavcic D (أغسطس 2000). "الوصف التحليلي للجهد عبر الغشاء الناتج عن المجالات الكهربائية على الخلايا الكروية". مجلة الفيزياء الحيوية . 79 (2): 670-679. رمز Bibcode :2000BpJ....79..670K. doi :10.1016/S0006-3495(00)76325-9. PMC 1300967. PMID  10920001 . 
  54. ^ Sweeney DC, Weaver JC, Davalos RV (يناير 2018). "توصيف نفاذية غشاء الخلية في المختبر الجزء الأول: سلوك النقل الناتج عن المجالات الكهربائية ذات النبضة الواحدة". التكنولوجيا في أبحاث وعلاج السرطان . 17 : 1533033818792491. doi :10.1177/1533033818792491. PMC 6154305. PMID  30236040 . 
  55. ^ ساتكوسكاس إس، مكتب إم إف، بوك إم، محفوظي أ، شيرمان د، ميكلافسيك د، وآخرون. (فبراير 2002). “آليات النقل الكهربائي للحمض النووي في الجسم الحي: مساهمات كل من النفاذية الكهربائية للخلية والرحلان الكهربائي للحمض النووي”. العلاج الجزيئي . 5 (2): 133-40. دوى : 10.1006/mthe.2002.0526 . بميد  11829520.
  56. ^ Gehl J (أبريل 2003). "الكهرباء المسامية: النظرية والأساليب، وجهات نظر لتوصيل الأدوية، والعلاج الجيني والبحث". Acta Physiologica Scandinavica . 177 (4): 437–47. doi :10.1046/j.1365-201X.2003.01093.x. PMID  12648161. S2CID  16742681.
  57. ^ Miklavcic D, Beravs K, Semrov D, Cemazar M, Demsar F, Sersa G (مايو 1998). "أهمية توزيع المجال الكهربائي لعملية الكهربة الفعالة في الأنسجة داخل الجسم الحي". مجلة البيوفيزياء . 74 (5): 2152–8. رمز Bibcode :1998BpJ....74.2152M. doi :10.1016/S0006-3495(98)77924-X. PMC 1299558. PMID  9591642 . 
  58. ^ تشانج دي سي (1992). دليل الكهرومسام والانصهار الكهربائي. سان دييغو: أكاديميك بريس. ISBN 978-0-12-168041-1. OCLC  817706277.
  59. ^ Neumann E، Schaefer-Ridder M، Wang Y، Hofschneider PH (1982). "نقل الجينات إلى خلايا الورم الليفي في الفئران عن طريق الكهرومسام في المجالات الكهربائية العالية". مجلة EMBO . 1 (7): 841–5. doi :10.1002/j.1460-2075.1982.tb01257.x. PMC 553119. PMID  6329708 . 
تم الاسترجاع من "https://en.wikipedia.org/w/index.php?title=الكهرباء&oldid=1251987827"
Original text
Rate this translation
Your feedback will be used to help improve Google Translate