الحفظ بالتبريد

📅 آخر تحديث: ٢٨ يوليو ٢٠٢٦
✍️ نُشر في: ٢٨ يوليو ٢٠٢٦
📷 يحتوي على 7 صور
الموسوعة الحرة
عينات محفوظة بالتبريد يتم إزالتها من وعاء من النيتروجين السائل

التجميد أو الحفظ بالتبريد هي عملية يتم فيها تجميد المواد البيولوجية - الخلايا أو الأنسجة أو الأعضاء - للحفاظ على المادة لفترة زمنية ممتدة. [1] في درجات حرارة منخفضة (عادةً -80 درجة مئوية (-112 درجة فهرنهايت) أو -196 درجة مئوية (-321 درجة فهرنهايت) باستخدام النيتروجين السائل ) يتم إيقاف أي استقلاب للخلايا قد يتسبب في تلف المادة البيولوجية المعنية بشكل فعال. التجميد هو طريقة فعالة لنقل العينات البيولوجية لمسافات طويلة وتخزين العينات لفترات طويلة من الزمن وإنشاء بنك للعينات للمستخدمين. تتم إضافة الجزيئات، التي يشار إليها باسم عوامل الحماية من التجميد (CPAs)، لتقليل الصدمة التناضحية والضغوط الجسدية التي تتعرض لها الخلايا في عملية التجميد. [2] بعض عوامل الحماية من التجميد المستخدمة في البحث مستوحاة من النباتات والحيوانات في الطبيعة التي تتمتع بتحمل فريد للبرد للبقاء على قيد الحياة في فصول الشتاء القاسية، بما في ذلك: الأشجار، [3] [4] الضفادع الخشبية، [5] وبطيئات الخطو. [6] كانت أول جثة بشرية يتم تجميدها على أمل القيامة في المستقبل هي جثة جيمس بيدفورد ، بعد ساعات قليلة من وفاته بسبب السرطان في عام 1967. [7] جثة بيدفورد هي الجثة الوحيدة التي تم تجميدها بالتبريد قبل عام 1974 ولا تزال مجمدة حتى اليوم.

الحفظ بالتبريد الطبيعي

تستطيع بطيئات الخطو ، وهي كائنات مجهرية متعددة الخلايا، أن تنجو من التجمد عن طريق استبدال معظم مياهها الداخلية بسكر يسمى تريهالوز ، مما يمنعها من التبلور الذي قد يؤدي إلى إتلاف الأغشية الخلوية . ويمكن لمخاليط المواد المذابة أن تحقق تأثيرات مماثلة. بعض المواد المذابة، بما في ذلك الأملاح، لها عيب أنها قد تكون سامة عند تركيزات عالية. بالإضافة إلى الدببة المائية، تستطيع ضفادع الخشب أن تتحمل تجمد دمها وأنسجتها الأخرى. تتراكم اليوريا في الأنسجة استعدادًا لفصل الشتاء، ويتحول جليكوجين الكبد بكميات كبيرة إلى جلوكوز استجابة لتكوين الجليد الداخلي. يعمل كل من اليوريا والجلوكوز كـ " حماية من التجمد " للحد من كمية الجليد المتكون وتقليل الانكماش الأسموزي للخلايا. يمكن للضفادع أن تنجو من العديد من أحداث التجمد / الذوبان خلال فصل الشتاء إذا لم يتجمد أكثر من حوالي 65٪ من إجمالي مياه الجسم. تم إجراء الأبحاث التي استكشفت ظاهرة "تجميد الضفادع" في المقام الأول من قبل الباحث الكندي الدكتور كينيث ب. ستوري . [ بحاجة لمصدر ]

تُعرف قدرة تحمل التجمد ، حيث تنجو الكائنات الحية من الشتاء بالتجمد والتوقف عن وظائف الحياة، في عدد قليل من الفقاريات: خمسة أنواع من الضفادع ( Rana sylvatica و Pseudacris triseriata و Hyla crucifer و Hyla versicolor و Hyla chrysoscelis )، وواحد من السلمندر ( Salamandrella keyserlingii )، وواحد من الثعابين ( Thamnophis sirtalis ) وثلاثة من السلاحف ( Chrysemys picta و Terrapene carolina و Terrapene ornata ). [8] كما تنجو السلاحف العضاضة Chelydra serpentina والسحالي الجدارية Podarcis wall lizars من التجمد الاسمي ولكن لم يثبت أنها تتكيف مع الشتاء. في حالة Rana sylvatica، فإن أحد المواد الحافظة المبردة هو الجلوكوز العادي، الذي يزداد تركيزه بحوالي 19 مليمول / لتر عندما يتم تبريد الضفادع ببطء. [8]

تاريخ

أنابيب العينات البيولوجية الموضوعة في النيتروجين السائل

كان جيمس لوفلوك أحد أوائل المنظرين للحفظ بالتبريد . في عام 1953، اقترح أن الضرر الذي يلحق بخلايا الدم الحمراء أثناء التجميد كان بسبب الإجهاد الأسموزي ، [9] وأن زيادة تركيز الملح في الخلية المجففة قد يؤدي إلى إتلافها. [10] [11] في منتصف الخمسينيات من القرن العشرين، أجرى تجارب على الحفظ بالتبريد للقوارض، وقرر أنه يمكن تجميد الهامستر مع تبلور 60٪ من الماء في الدماغ في الجليد دون أي آثار ضارة؛ وقد ثبت أن الأعضاء الأخرى معرضة للتلف. [12]

تم تطبيق التجميد على المواد البشرية بدءًا من عام 1954 بثلاث حالات حمل ناتجة عن تلقيح الحيوانات المنوية المجمدة مسبقًا. [13] تم حفظ الحيوانات المنوية للطيور بالتجميد في عام 1957 من قبل فريق من العلماء في المملكة المتحدة بقيادة كريستوفر بولج . [14] خلال عام 1963، أظهر بيتر مازور، في مختبر أوك ريدج الوطني في الولايات المتحدة، أنه يمكن تجنب التجميد القاتل داخل الخلايا إذا كان التبريد بطيئًا بدرجة كافية للسماح بكمية كافية من الماء لمغادرة الخلية أثناء التجميد التدريجي للسائل خارج الخلايا. يختلف هذا المعدل بين الخلايا ذات الحجم المختلف ونفاذية الماء: معدل التبريد النموذجي حوالي 1 درجة مئوية / دقيقة مناسب للعديد من خلايا الثدييات بعد العلاج بمواد الحماية من التجميد مثل الجلسرين أو ثنائي ميثيل سلفوكسيد، لكن المعدل ليس مثاليًا عالميًا. [15]

في الثاني والعشرين من إبريل عام 1966، تم تجميد أول جثة بشرية - كانت قد تم تحنيطها لمدة شهرين - عن طريق وضعها في النيتروجين السائل وتخزينها عند درجة حرارة أعلى قليلاً من درجة التجمد. كانت الجثة لامرأة مسنة من لوس أنجلوس، لا يُعرف اسمها، وسرعان ما تم إذابتها ودفنها من قبل الأقارب. كانت أول جثة بشرية يتم تجميدها على أمل القيامة في المستقبل هي جثة جيمس بيدفورد ، بعد ساعات قليلة من وفاته بسبب السرطان في عام 1967. [7] جثة بيدفورد هي الجثة الوحيدة التي تم تجميدها بالتبريد قبل عام 1974 ولا تزال مجمدة حتى اليوم. [16]

المخاطر

تحدث الظواهر التي يمكن أن تسبب تلفًا للخلايا أثناء الحفظ بالتبريد بشكل أساسي أثناء مرحلة التجميد، وتشمل تأثيرات المحلول، وتكوين الجليد خارج الخلايا ، والجفاف، وتكوين الجليد داخل الخلايا . يمكن تقليل العديد من هذه التأثيرات باستخدام المواد الواقية من التجميد. بمجرد تجميد المادة المحفوظة، تصبح آمنة نسبيًا من المزيد من الضرر. [17]

تأثيرات الحل
عندما تنمو بلورات الجليد في الماء المتجمد، يتم استبعاد المواد المذابة ، مما يتسبب في تركيزها في الماء السائل المتبقي. يمكن أن تكون التركيزات العالية لبعض المواد المذابة ضارة للغاية.
تكوين الجليد خارج الخلايا
عندما يتم تبريد الأنسجة ببطء، يهاجر الماء خارج الخلايا ويتكون الجليد في الحيز خارج الخلايا. يمكن أن يؤدي وجود الكثير من الجليد خارج الخلايا إلى تلف ميكانيكي لغشاء الخلية بسبب السحق.
جفاف
يمكن أن يؤدي انتقال الماء، الذي يتسبب في تكوين الجليد خارج الخلية، إلى جفاف الخلية أيضًا. يمكن أن تتسبب الضغوط المصاحبة على الخلية في تلفها بشكل مباشر.
تكوين الجليد داخل الخلايا
في حين أن بعض الكائنات الحية والأنسجة يمكنها تحمل بعض الجليد خارج الخلايا، فإن أي كمية كبيرة من الجليد داخل الخلايا تكون قاتلة للخلايا دائمًا تقريبًا.

الطرق الرئيسية للوقاية من المخاطر

تتمثل التقنيات الرئيسية لمنع أضرار التجميد بالتبريد في مزيج راسخ من المعدل المتحكم فيه والتجميد البطيء وعملية التجميد السريع الأحدث المعروفة باسم التزجيج .

التجميد البطيء القابل للبرمجة

خزان من النيتروجين السائل، يستخدم لتزويد المجمد المبرد (لتخزين عينات المختبر عند درجة حرارة حوالي -150 درجة مئوية أو -238 درجة فهرنهايت)

التجميد بمعدل متحكم فيه وبطيء ، والمعروف أيضًا باسم التجميد البطيء القابل للبرمجة (SPF) ، [18] هي تقنية يتم فيها تبريد الخلايا إلى حوالي -196 درجة مئوية على مدار عدة ساعات.

تم تطوير التجميد البطيء القابل للبرمجة في أوائل سبعينيات القرن العشرين، وأدى في النهاية إلى أول ولادة لجنين بشري مجمد في عام 1984. ومنذ ذلك الحين، تم استخدام الآلات التي تجمد العينات البيولوجية باستخدام تسلسلات قابلة للبرمجة، أو معدلات محكومة، في علم الأحياء البشرية والحيوانية والخلوية - "تجميد" العينة للحفاظ عليها بشكل أفضل لإذابتها في النهاية، قبل تجميدها أو حفظها بالتبريد في النيتروجين السائل. تُستخدم مثل هذه الآلات لتجميد البويضات والجلد ومنتجات الدم والأجنة والحيوانات المنوية والخلايا الجذعية والحفاظ على الأنسجة العامة في المستشفيات والممارسات البيطرية ومختبرات الأبحاث في جميع أنحاء العالم. على سبيل المثال، يُقدر عدد المواليد الأحياء من الأجنة المجمدة "المجمدة ببطء" بحوالي 300000 إلى 400000 أو 20٪ من 3 ملايين ولادة تلقيح صناعي (IVF). [19]

يمكن تجنب التجميد داخل الخلايا المميت إذا كان التبريد بطيئًا بدرجة كافية للسماح بكمية كافية من الماء لمغادرة الخلية أثناء التجميد التدريجي للسائل خارج الخلايا. لتقليل نمو بلورات الجليد خارج الخلايا وإعادة التبلور، [20] يمكن استخدام المواد الحيوية مثل الألجينات أو كحول البولي فينيل أو الكيتوزان لإعاقة نمو بلورات الجليد جنبًا إلى جنب مع المواد الواقية من التجمد التقليدية ذات الجزيئات الصغيرة. [21] يختلف هذا المعدل بين الخلايا ذات الحجم المختلف ونفاذية الماء : معدل تبريد نموذجي يبلغ حوالي 1 درجة مئوية / دقيقة مناسب للعديد من خلايا الثدييات بعد العلاج بمواد واقية من التجمد مثل الجلسرين أو ثنائي ميثيل سلفوكسيد (DMSO)، لكن المعدل ليس مثاليًا عالميًا. يمكن تحقيق معدل 1 درجة مئوية / دقيقة باستخدام أجهزة مثل الفريزر الذي يتم التحكم في معدله أو حاوية التجميد المحمولة على سطح المكتب. [22]

وقد قدمت العديد من الدراسات المستقلة أدلة على أن الأجنة المجمدة المخزنة باستخدام تقنيات التجميد البطيء قد تكون في بعض النواحي "أفضل" من الأجنة الطازجة في التلقيح الصناعي. وتشير الدراسات إلى أن استخدام الأجنة والبويضات المجمدة بدلاً من الأجنة والبويضات الطازجة يقلل من خطر ولادة جنين ميت والولادة المبكرة، رغم أن الأسباب الدقيقة لا تزال قيد الاستكشاف.

التزجيج

التزجيج هو عملية تجميد سريع (تبريد فائق السرعة) تساعد على منع تكوين بلورات الجليد وتساعد على منع أضرار التجميد.

ساعد الباحثان جريج فاهي وويليام ف. رال في تقديم عملية التزجيج إلى الحفظ بالتبريد التناسلي في منتصف الثمانينيات. [23] اعتبارًا من عام 2000، يدعي الباحثون أن عملية التزجيج توفر فوائد الحفظ بالتبريد دون حدوث ضرر بسبب تكوين بلورات الجليد. [24] أصبح الوضع أكثر تعقيدًا مع تطور هندسة الأنسجة حيث تحتاج كل من الخلايا والمواد الحيوية إلى البقاء خالية من الجليد للحفاظ على قابلية الخلايا العالية للحياة ووظائفها وسلامة التراكيب وبنية المواد الحيوية. تم الإبلاغ عن عملية التزجيج للهياكل الهندسية للأنسجة لأول مرة بواسطة ليليا كوليشوفا، [25] والتي كانت أيضًا أول عالمة تحقق عملية التزجيج للبويضات ، مما أدى إلى ولادة حية في عام 1999. [26] بالنسبة للحفظ بالتبريد السريري، يتطلب التزجيج عادةً إضافة عوامل الحماية من التجميد قبل التبريد. المواد الواقية من التجمد هي جزيئات كبيرة تضاف إلى وسط التجميد لحماية الخلايا من التأثيرات الضارة لتكوين بلورات الجليد داخل الخلايا أو من تأثيرات المحلول، أثناء عملية التجميد والذوبان. وهي تسمح بدرجة أعلى من بقاء الخلايا أثناء التجميد، وخفض نقطة التجمد، وحماية غشاء الخلية من الإصابات المرتبطة بالتجميد. تتمتع المواد الواقية من التجمد بذوبان عالي، وسمية منخفضة عند تركيزات عالية، ووزن جزيئي منخفض، والقدرة على التفاعل مع الماء عبر الرابطة الهيدروجينية.

بدلاً من التبلور ، يتحول المحلول الشرابي إلى جليد غير متبلور - يتزجيج . بدلاً من التحول من السائل إلى الصلب عن طريق التبلور، تكون الحالة غير المتبلورة مثل "السائل الصلب"، ويحدث التحول على مدى نطاق درجة حرارة صغير يوصف بدرجة حرارة " التحول الزجاجي ".

يتم تعزيز عملية التزجيج في الماء عن طريق التبريد السريع، ويمكن تحقيق ذلك بدون استخدام مواد حماية من التجمد من خلال انخفاض سريع للغاية في درجة الحرارة (ميجا كلفن في الثانية). كان المعدل المطلوب للوصول إلى الحالة الزجاجية في الماء النقي يعتبر مستحيلاً حتى عام 2005. [27]

هناك شرطان مطلوبان عادة للسماح بالتزجيج وهما زيادة اللزوجة وانخفاض درجة التجمد. العديد من المواد المذابة تفعل كلا الشرطين، ولكن الجزيئات الأكبر حجمًا لها تأثير أكبر بشكل عام، وخاصة على اللزوجة. كما يعمل التبريد السريع على تعزيز التزجيج.

بالنسبة للطرق المعمول بها في الحفظ بالتبريد، يجب أن يخترق المذاب غشاء الخلية من أجل تحقيق اللزوجة المتزايدة وتقليل درجة التجمد داخل الخلية. لا تتخلل السكريات بسهولة الغشاء. غالبًا ما تكون المواد المذابة التي تتخلل الغشاء، مثل ثنائي ميثيل سلفوكسيد، وهو مادة واقية شائعة من التجميد، سامة في تركيزات عالية. أحد الحلول الوسطية الصعبة للحفظ بالتبريد الزجاجي يتعلق بالحد من الضرر الناتج عن المادة الواقية من التجميد نفسها بسبب سمية المادة الواقية من التجميد. مكنت مخاليط المواد الواقية من التجميد واستخدام حاصرات الثلج شركة 21st Century Medicine من تجميد كلية أرنب إلى -135 درجة مئوية باستخدام خليط التزجيج الخاص بها. عند إعادة التسخين، تم زرع الكلية بنجاح في أرنب، مع وظائف كاملة وقابلية للحياة، وقادرة على دعم الأرنب إلى أجل غير مسمى باعتبارها الكلية العاملة الوحيدة. [28] في عام 2000، أصبح FM-2030 أول شخص يتم تجميده بنجاح بعد وفاته. [29]

النفخ

يمكن استبدال الدم بغازات خاملة خاملة و/أو غازات حيوية أيضيًا مثل الأكسجين ، بحيث يمكن للأعضاء أن تبرد بسرعة أكبر ولا تحتاج إلى مانع تجمد. نظرًا لأن مناطق الأنسجة مفصولة بالغاز، فإن التوسعات الصغيرة لا تتراكم، وبالتالي تحمي من التحطم. [30] لقد استعادت شركة صغيرة، أريجوس بيوميديكال، "قلوب الخنازير بالفعل من 120 درجة تحت الصفر"، [31] على الرغم من أن تعريف "المستعاد" غير واضح. يمكن أن تساعد ضغوط 60 ضغط جوي في زيادة معدلات تبادل الحرارة. [32] يمكن أن يعزز تروية الأكسجين الغازي / النفخ الحفاظ على الأعضاء مقارنة بالتخزين البارد الثابت أو تروية الآلة منخفضة الحرارة، حيث أن اللزوجة المنخفضة للغازات قد تساعد في الوصول إلى المزيد من مناطق الأعضاء المحفوظة وتوصيل المزيد من الأكسجين لكل جرام من الأنسجة. [33]

الأنسجة القابلة للتجميد

بشكل عام، يكون الحفظ بالتبريد أسهل بالنسبة للعينات الرقيقة والخلايا المعلقة، وذلك لأن هذه الخلايا يمكن تبريدها بسرعة أكبر وبالتالي تتطلب جرعات أقل من المواد الحافظة السامة . وبالتالي، فإن الحفظ بالتبريد للكبد والقلب البشريين للتخزين والزراعة لا يزال غير عملي.

ومع ذلك، فإن التركيبات المناسبة من المواد الواقية من التجمد وأنظمة التبريد والشطف أثناء التسخين غالبًا ما تسمح بالحفظ بالتبريد الناجح للمواد البيولوجية، وخاصة معلقات الخلايا أو عينات الأنسجة الرقيقة. ومن الأمثلة على ذلك:

الأجنة

يتم استخدام التجميد لحفظ الأجنة لتخزينها، على سبيل المثال، عندما تؤدي عملية التلقيح الصناعي إلى إنتاج أجنة أكثر مما هو مطلوب حاليًا.

تم الإبلاغ عن حالة حمل واحدة وولادة صحية نتجت عن جنين تم تخزينه لمدة 27 عامًا، بعد الحمل الناجح لجنين من نفس الدفعة قبل ثلاث سنوات. [39] قامت العديد من الدراسات بتقييم الأطفال المولودين من أجنة مجمدة، أو "مجمدة". كانت النتيجة إيجابية بشكل موحد دون زيادة في العيوب الخلقية أو تشوهات النمو. [40] أظهرت دراسة أجريت على أكثر من 11000 جنين بشري محفوظ بالتبريد عدم وجود تأثير كبير لوقت التخزين على البقاء على قيد الحياة بعد الذوبان لدورات التلقيح الصناعي أو التبرع بالبويضات، أو للأجنة المجمدة في مرحلة ما قبل النواة أو الانقسام. [41] بالإضافة إلى ذلك، لم يكن لمدة التخزين أي تأثير كبير على الحمل السريري أو الإجهاض أو الزرع أو معدل المواليد الأحياء، سواء من دورات التلقيح الصناعي أو التبرع بالبويضات. [41] بدلاً من ذلك، فإن عمر البويضة ونسبة البقاء على قيد الحياة وعدد الأجنة المنقولة هي عوامل تنبئ بنتيجة الحمل. [41]

أنسجة المبيض

يعد التجميد لأنسجة المبيض أمرًا ذا أهمية للنساء اللاتي يرغبن في الحفاظ على وظيفتهن الإنجابية بما يتجاوز الحد الطبيعي، أو اللاتي يتعرضن لتهديد في قدرتهن الإنجابية بسبب العلاج بالسرطان، [42] على سبيل المثال في الأورام الخبيثة الدموية أو سرطان الثدي. [43] ويتلخص الإجراء في أخذ جزء من المبيض وإجراء تجميد بطيء قبل تخزينه في النيتروجين السائل أثناء العلاج. يمكن بعد ذلك إذابة الأنسجة وزرعها بالقرب من قناة فالوب، إما في مكانها الطبيعي أو في مكانها الطبيعي (على جدار البطن)، [43] حيث تبدأ في إنتاج بويضات جديدة، مما يسمح بحدوث الحمل الطبيعي. [44] يمكن أيضًا زرع أنسجة المبيض في الفئران التي تعاني من نقص المناعة ( فئران SCID ) لتجنب رفض الطعم ، ويمكن حصاد الأنسجة لاحقًا عندما تتطور الجريبات الناضجة. [45]

البويضات

حفظ البويضات البشرية بالتجميد هي تقنية جديدة يتم فيها استخراج بويضات المرأة وتجميدها وتخزينها. لاحقًا، عندما تكون جاهزة للحمل، يمكن إذابة البويضات وتخصيبها ونقلها إلى الرحم كأجنة . منذ عام 1999، عندما أبلغ كوليشوفا وزملاؤه في مجلة Human Reproduction عن ولادة أول طفل من جنين مشتق من بويضات امرأة تم تسخينها بالتزجيج، [25] تم الاعتراف بهذا المفهوم وانتشاره على نطاق واسع. حقق هذا الاختراق في تحقيق التزجيج لبويضات المرأة تقدمًا مهمًا في معرفتنا وممارستنا لعملية التلقيح الصناعي، حيث أن معدل الحمل السريري أعلى بأربع مرات بعد تزجيج البويضات منه بعد التجميد البطيء. [46] يعد تزجيج البويضات أمرًا حيويًا للحفاظ على الخصوبة لدى مريضات الأورام الصغيرات والأفراد الذين يخضعون للتلقيح الصناعي والذين يعترضون، لأسباب دينية أو أخلاقية، على ممارسة تجميد الأجنة.

المني

يمكن استخدام السائل المنوي بنجاح إلى أجل غير مسمى تقريبًا بعد التجميد. أطول فترة تخزين ناجحة تم الإبلاغ عنها هي 22 عامًا. [47] يمكن استخدامه للتبرع بالحيوانات المنوية حيث يريد المتلقي العلاج في وقت أو مكان مختلف أو كوسيلة للحفاظ على الخصوبة للرجال الذين يخضعون لقطع القناة الدافقة أو العلاجات التي قد تعرض خصوبتهم للخطر، مثل العلاج الكيميائي أو العلاج الإشعاعي أو الجراحة.

أنسجة الخصية

إن الحفظ بالتبريد لأنسجة الخصية غير الناضجة هو طريقة متطورة لإتاحة التكاثر للذكور الصغار الذين يحتاجون إلى علاج سام للغدد التناسلية. إن البيانات الحيوانية واعدة حيث تم الحصول على ذرية سليمة بعد زرع معلقات خلايا الخصية المجمدة أو قطع الأنسجة. ومع ذلك، لم يثبت أي من خيارات استعادة الخصوبة من الأنسجة المجمدة، أي زرع معلقات الخلايا، وترقيع الأنسجة ، والنضج في المختبر، كفاءتها وأمانها لدى البشر حتى الآن. [48]

طحلب

أربعة أنواع بيئية مختلفة من Physcomitrella patens مخزنة في مركز مخزون الطحالب الدولي

تم تطوير الحفظ بالتبريد لنباتات الطحالب الكاملة ، وخاصة Physcomitrella patens ، بواسطة رالف ريسكي وزملائه [49] ويتم إجراؤه في مركز مخزون الطحالب الدولي . يجمع هذا البنك الحيوي ويحافظ على ويوزع الطفرات الطحلبية وأنماط الطحالب البيئية . [50]

الخلايا الجذعية المتوسطة (MSCs)

قد تظهر الخلايا الجذعية الوسيطة، عند نقلها فورًا في غضون ساعات قليلة بعد الذوبان، انخفاضًا في الوظيفة أو انخفاضًا في الفعالية في علاج الأمراض مقارنة بتلك الخلايا الجذعية الوسيطة التي تكون في مرحلة اللوغاريتم من نمو الخلايا (الطازجة). ونتيجة لذلك، يجب إعادة الخلايا الجذعية الوسيطة المحفوظة بالتبريد إلى مرحلة اللوغاريتم من نمو الخلايا في المزرعة المختبرية قبل إعطائها للتجارب السريرية أو العلاجات التجريبية. ستساعد إعادة زراعة الخلايا الجذعية الوسيطة في التعافي من الصدمة التي تتعرض لها الخلايا أثناء التجميد والذوبان. فشلت العديد من التجارب السريرية على الخلايا الجذعية الوسيطة التي استخدمت منتجات محفوظة بالتبريد فورًا بعد الذوبان مقارنة بتلك التجارب السريرية التي استخدمت الخلايا الجذعية الوسيطة الطازجة. [51]

بذرة

إن الحفظ بالتبريد للنباتات أصبح أمرًا حيويًا لقيمتها في التنوع البيولوجي. غالبًا ما تُعتبر البذور نظامًا مهمًا لتوصيل المعلومات الوراثية. يعد الحفظ بالتبريد للبذور المقاومة أصعب شيء بسبب عدم تحمل درجات الحرارة المنخفضة ومحتوى الماء المنخفض. [52] ومع ذلك، يمكن لمحلول التزجيج للنباتات حل المشكلة ومساعدة البذور المقاومة (Nymphaea caerulea) على الحفظ بالتبريد. [53] [54]

حفظ الثقافات الميكروبيولوجية

يمكن الاحتفاظ بالبكتيريا والفطريات لفترة قصيرة (أشهر إلى عام تقريبًا، حسب الحالة) في الثلاجة، ومع ذلك، لا يتم إيقاف انقسام الخلايا والتمثيل الغذائي تمامًا وبالتالي لا يعد الخيار الأمثل للتخزين طويل الأمد (سنوات) أو للحفاظ على الثقافات وراثيًا أو ظاهريًا، حيث يمكن أن تؤدي انقسامات الخلايا إلى حدوث طفرات أو يمكن أن تتسبب الزراعة الفرعية في حدوث تغييرات ظاهرية. الخيار المفضل، والذي يعتمد على الأنواع، هو الحفظ بالتبريد. الديدان الخيطية هي الكائنات حقيقية النواة متعددة الخلايا الوحيدة التي ثبت أنها تنجو من الحفظ بالتبريد. [55] [56]

الفطريات

يمكن تخزين الفطريات، وخاصة الزيجومايسيتس، والفطريات الزقية، والفطريات البازيدية الأعلى، بغض النظر عن التبويض، في النيتروجين السائل أو التجميد العميق. يعد الحفظ بالتبريد طريقة مميزة للفطريات التي لا تتبويض (وإلا يمكن استخدام طرق أخرى لحفظ الجراثيم بتكلفة أقل وسهولة)، أو تتبويض ولكنها تحتوي على جراثيم دقيقة (كبيرة أو حساسة للتجميد والتجفيف)، أو مسببة للأمراض (من الخطر الاحتفاظ بالفطريات النشطة أيضيًا) أو التي سيتم استخدامها للمخزونات الوراثية (من الأفضل أن يكون لها نفس التركيب مثل الوديعة الأصلية). كما هو الحال مع العديد من الكائنات الحية الأخرى، يتم استخدام المواد الواقية بالتبريد مثل ثنائي ميثيل سلفوكسيد أو الجلسرين (على سبيل المثال الفطريات الخيطية 10٪ جلسرين أو الخميرة 20٪ جلسرين). تعتمد الاختلافات بين اختيار المواد الواقية من التجمد على النوع (أو الفئة)، ولكن بشكل عام بالنسبة للفطريات، تكون المواد الواقية من التجمد مثل ثنائي ميثيل سلفوكسيد أو الجلسرين أو البولي إيثيلين جليكول هي الأكثر فعالية (وتشمل المواد الأخرى غير النافذة السكريات المانيتول والسوربيتول والديكستران وما إلى ذلك). لا يُنصح بتكرار التجميد والذوبان لأنه يمكن أن يقلل من قابلية البقاء. يوصى بمجمدات عميقة احتياطية أو مواقع تخزين النيتروجين السائل. يتم تلخيص بروتوكولات متعددة للتجميد أدناه (يستخدم كل منها أنابيب تجميد من البولي بروبيلين ذات غطاء لولبي): [57]

البكتيريا

يتم تجميد العديد من سلالات المختبرات الشائعة القابلة للزراعة للحفاظ على مخزونات مستقرة وراثيًا وظاهريًا وطويلة الأجل. [58] قد تؤدي إعادة الزراعة والعينات المبردة لفترات طويلة إلى فقدان البلازميد أو الطفرات. النسب المئوية النهائية الشائعة للجلسرين هي 15 و 20 و 25. من طبق زراعة طازج، يتم اختيار مستعمرة واحدة ذات أهمية ويتم عمل ثقافة سائلة. من الثقافة السائلة، يتم خلط الوسط مباشرة بكمية متساوية من الجلسرين؛ يجب فحص المستعمرة بحثًا عن أي عيوب مثل الطفرات. يجب غسل جميع المضادات الحيوية من الثقافة قبل التخزين طويل الأمد. تختلف الطرق، ولكن يمكن إجراء الخلط برفق عن طريق الانعكاس أو بسرعة عن طريق الدوامة ويمكن أن يختلف التبريد إما عن طريق وضع أنبوب التبريد مباشرة عند -50 إلى -95 درجة مئوية، أو التجميد بالصدمة في النيتروجين السائل أو التبريد التدريجي ثم التخزين عند -80 درجة مئوية أو أكثر برودة (النيتروجين السائل أو بخار النيتروجين السائل). يمكن أن يختلف استرداد البكتيريا أيضًا، على سبيل المثال، إذا تم تخزين الخرز داخل الأنبوب، فيمكن استخدام الخرز القليل للطلاء أو يمكن كشط المخزون المجمد بحلقة ثم طلائه، ومع ذلك، نظرًا لأن هناك حاجة إلى القليل من المخزون، فلا ينبغي إذابة الأنبوب بالكامل ويجب تجنب التجميد والذوبان المتكرر. لا يمكن تحقيق استرداد بنسبة 100% بغض النظر عن المنهجية. [59] [60] [61]

تحمل التجمد عند الحيوانات

الديدان

الديدان الخيطية المجهرية التي تعيش في التربة Panagrolaimus detritophagus و Plectus parvus هي الكائنات الحية الوحيدة التي ثبت أنها قابلة للحياة بعد الحفظ بالتبريد لسنوات عديدة (30000 إلى 40000 سنة). في هذه الحالة، كان الحفظ طبيعيًا وليس اصطناعيًا، بسبب التربة الصقيعية . لقد أصبحت حية عند تسخينها.

الفقاريات

لقد ثبت أن العديد من أنواع الحيوانات، بما في ذلك الأسماك والبرمائيات والزواحف، تتحمل التجمد. على الأقل أربعة أنواع من الضفادع ( Pseudacris crucifer و Hyla versicolor و Pseudacris triseriata و Lithobates sylvaticus ) والعديد من أنواع السلاحف ( Terrapene carolina وChrysemys picta ) والسحالي والثعابين تتحمل التجمد وقد طورت تكيفات للبقاء على قيد الحياة في التجمد. بينما تدخل بعض الضفادع في سبات تحت الأرض أو في الماء، فإن درجات حرارة الجسم تنخفض إلى -5 إلى -7 درجة مئوية، مما يتسبب في تجمدها. يمكن لضفدع الخشب ( Lithobates sylvaticus ) أن يتحمل التجمد المتكرر، حيث يتحول حوالي 65٪ من سائله خارج الخلايا إلى جليد. [58]

المنظور الأنثروبولوجي للحفظ بالتبريد

استنادًا إلى علم مضاربي، فإن التجميد بالتبريد مثير للجدل في المناقشة العلمية ويمكن فهمه بشكل أفضل على أنه طقوس موت ناشئة على طول التطور الاجتماعي للثقافة والتكنولوجيا البشرية. [ بحاجة لمصدر ] إن الإيمان بالحياة الآخرة ، أو الحياة الثانية، حيث يتحمل الجسم الظاهراتي انتقالًا أو قيامة، أمر متكرر في التقاليد القديمة والدين والخيال العلمي. ومع ذلك، فإن اللغة الاجتماعية المتزايدة لتكنولوجيا التجميد في علاجات الصحة والعافية، تعيد سياق إيقاظ الموتى/الأحياء في المجال البيولوجي الاجتماعي، وتؤطر الموتى على أنه شيء يشبه المرض الذي يمكن السيطرة عليه أو علاجه. يثير التجميد بالتبريد تساؤلات حول حدود الذات السيادية [62] والجسد الفردي، مما يتحدى التعريفات القانونية للشخصية. [63] ومع ذلك، فإن هذه الحدود ليست عالمية والأفكار التي تحد من الذات داخل ثنائية الثنائية الديكارتية يتم تعريفها من خلال الفلسفة والقانون الغربيين.

لفهم بصمة التجميد على الجسم السياسي. [64] من المفيد تطبيق تعريف فوكو للقوة الحيوية . إن القدرة على الوصول إلى أشكال التجميد وتسخيرها (من تخزين الطعام أو الدم أو الحيوانات المنوية بالتبريد) مرتبطة تاريخيًا بالطبقة والثروة والسلطة. إنها أساسية للخصوبة والصحة والموت وبهذا المعنى، فإن التجميد هو آلية في بنية السلطة " سلسلة التبريد " [62] مع إمكانية إنتاج الحياة والحفاظ عليها و/أو تقييدها.

اختلال التوازن في القوة

إن الحفظ بالتبريد يتطلب موارد مالية وطبية كبيرة من أجل نجاحه المحتمل. لذلك، فإن اقتراح أن أولئك القادرين على الوصول إلى الحفظ بالتبريد يجب أن ينحدروا من ثروة كبيرة أو سلطة. تم دمج هذا الشكل الحديث من السلطة البيولوجية في المجتمع كطريقة جديدة لإملاء السلطة على الفرد أو الجسم الظاهراتي عند تحديد نتائج الحياة أو الموت. بالنظر إلى الطبيعة الدورية للثروة والسلطة في المجتمع بالفعل (التي تقوضها بشكل منهجي العرق والجنس والطبقة والدين)، فمن المرجح أن يكون لاستخدام الحفظ بالتبريد في المستقبل تأثير ذاتي الاستمرار على هذه الهياكل. وبالتالي، هناك إمكانية أخرى لتضخيم اختلالات التوازن القائمة بالفعل حيث ستساهم الآثار المترتبة من منظور قانوني ومالي واجتماعي ثقافي في دعم ممارسة الحفظ بالتبريد، واستبعاد معظم أفراد المجتمع من أجل الاستفادة من مجموعة مهيمنة بالفعل. في نهاية المطاف، يعزز الحفظ بالتبريد التفاوتات المهيمنة الموجودة بالفعل في المجتمع اليوم والتي لن يستفيد منها سوى القليل ويثير تساؤلات حول الغموض الأخلاقي للاستقلال الجسدي الفردي في السعي إلى الحفاظ على الذات أو البقاء. [65] [66] [67] [68]

القضايا المتعلقة بالجسم السياسي

لطالما كان التجميد قضية جسد الفرد ضد الجسد السياسي . أولئك الذين يسعون إلى إطالة عمرهم على الرغم من الموت من خلال الحفظ يعانون من حالات مزمنة وغير قابلة للشفاء و / أو تنكسية، حيث يتعين عليهم التغلب على العديد من القضايا القانونية المتعلقة بالتخلص من الجثث وتخزين الأنسجة البشرية وحقوق القاصرين وفي بعض الحالات الانتحار بمساعدة طبية . [69] [70] في عام 1993، طلب توماس دونالدسون ، الذي كان يعاني من ورم في المخ، الموت بمساعدة طبية. [71] بسبب الورم، تم رفضه وتم حفظ جثته بالتجميد بعد أن دمر الورم أنسجة المخ المحيطة لدرجة أن دونالدسون توفي. [71] لم يكن حتى بعد 25 عامًا في عام 2018 أن تم حفظ أول شخص، نورمان هاردي، بنجاح بالتجميد بعد السماح له بالموت بمساعدة طبية. [71] [72] في عام 2016، فازت فتاة تبلغ من العمر أربعة عشر عامًا بالحق القانوني في تجميد جثتها بالتبريد، لتصبح قضية بارزة في المملكة المتحدة. [73] في نفس العام، أكدت شركة Cryonics UK أن أصغر عضو فيها كان يبلغ من العمر 7 سنوات فقط. [74]

انظر أيضا

مراجع

  1. ^ هانت، تشارلز جيه. (2017). "الحفظ بالتبريد: التزجيج والتبريد بمعدلات محددة". بنوك الخلايا الجذعية. طرق في علم الأحياء الجزيئي. المجلد 1590. ص  41-77 . doi :10.1007/978-1-4939-6921-0_5. ISBN 978-1-4939-6919-7. PMID  28353262.
  2. ^ Gurruchaga, H; Saenz del Burgo, L; Hernandez, RM; Orive, G; Selden, C; Fuller, B; Ciriza, J; Pedraz, JL (يوليو 2018). "التقدم المحرز في التجميد البطيء لحفظ الخلايا المغلفة بالكبسولات الدقيقة". مجلة الإطلاق المتحكم فيه . 281 : 119– 138. doi :10.1016/j.jconrel.2018.05.016. PMID  29782945.
  3. ^ "كيف تنجو الأشجار من الشتاء؟". www.nationalforests.org . تم الاسترجاع في 2023-01-08 .
  4. ^ كافندر-باريس، جانين (2005). "تأثيرات التجميد على النقل لمسافات طويلة في النباتات الخشبية". النقل الوعائي في النباتات . ص  401-424 . doi :10.1016/B978-012088457-5/50021-6. ISBN 978-0-12-088457-5.
  5. ^ "دم يشبه مادة مضادة للتجمد يسمح للضفادع بالتجمد والذوبان مع نزوات الشتاء". ناشيونال جيوغرافيك . 2007-02-20. مؤرشف من الأصل في 2 مارس 2021. تم الاسترجاع 2023-01-08 .
  6. ^ ماير-جرنو، ريا؛ شتوتغارت، جامعة. "كيف تنجو بطيئات الخطو من درجات الحرارة المتجمدة". phys.org . تم الاسترجاع في 2023-01-08 .
  7. ^ "عزيزي الدكتور بيدفورد (وأولئك الذين سيهتمون بك بعد أن أفعل ذلك)". Cryonics. يوليو 1991. تم الاسترجاع في 2009-08-23 .
  8. ^ ab Costanzo JP, Lee RE, Wright MF (ديسمبر 1991). "تحميل الجلوكوز يمنع الإصابة بالتجمد في الضفادع الخشبية المبردة بسرعة" (PDF) . المجلة الأمريكية لعلم وظائف الأعضاء . 261 (6 Pt 2): R1549–53. doi :10.1152/ajpregu.1991.261.6.R1549. PMID  1750578.
  9. ^ Lovelock JE (مارس 1953). "تحلل خلايا الدم الحمراء البشرية بالتجميد والذوبان". Biochimica et Biophysica Acta . 10 (3): 414– 26. doi :10.1016/0006-3002(53)90273-X. PMID  13058999.
  10. ^ فولر بي جيه، لين إن، بينسون إي إي، محررون (2004). الحياة في الحالة المتجمدة. دار نشر سي آر سي ، ص 7. رقم ISBN 978-0203647073.
  11. ^ Mazur P (مايو 1970). "علم الأحياء بالتبريد: تجميد الأنظمة البيولوجية". مجلة العلوم . 168 (3934): 939– 49. Bibcode :1970Sci...168..939M. doi :10.1126/science.168.3934.939. PMID  5462399.
  12. ^ "الحالة البيولوجية للتبريد" (PDF) . Cryonics . المجلد 9، العدد 3. مؤسسة ألكور لتمديد الحياة . مارس 1988. ص 27. العدد 92. مؤرشف من الأصل (PDF) في 2020-04-17 . تم الاسترجاع 2018-10-03 .
  13. ^ "الأبوة بعد الموت أصبحت الآن ممكنة". Cedar Rapids Gazette . 9 أبريل 1954.
  14. ^ بولج سي (ديسمبر 1957). "تخزين الحيوانات المنوية للثدييات في درجات حرارة منخفضة". وقائع الجمعية الملكية بلندن. السلسلة ب، العلوم البيولوجية . 147 (929): 498– 508. رمز Bibcode :1957RSPSB.147..498P. doi :10.1098/rspb.1957.0068. PMID  13494462.
  15. ^ Mazur P (يوليو 1963). "دراسات على المعلقات المجمدة بسرعة لخلايا الخميرة عن طريق التحليل الحراري التفاضلي وقياس التوصيل". مجلة البيوفيزياء . 3 (4): 323– 53. رمز Bibcode :1963BpJ.....3..323M. doi :10.1016/S0006-3495(63)86824-1. PMC 1366450. PMID  13934216 . 
  16. ^ بيري آر إم (أكتوبر 2014). "فشل التعليق - دروس من الأيام الأولى". ALCOR: مؤسسة تمديد الحياة . تم الاسترجاع في 29 أغسطس 2018 .
  17. ^ Mazur, P. (1984). "تجميد الخلايا الحية: الآليات والآثار المترتبة عليها". المجلة الأمريكية لعلم وظائف الأعضاء. علم وظائف الخلايا . 247 (3): C125 – C142 . doi :10.1152/ajpcell.1984.247.3.C125. PMID  6383068.
  18. ^ Vutyavanich T, Piromlertamorn W, Nunta S (أبريل 2010). "التجميد السريع مقابل التجميد المبرمج البطيء للحيوانات المنوية البشرية". الخصوبة والعقم . 93 (6): 1921– 8. doi : 10.1016/j.fertnstert.2008.04.076 . PMID  19243759.
  19. ^ "رابط معطل" . تم الاسترجاع في 2020-07-26 .[ رابط معطل ‍ ]
  20. ^ Deller RC, Vatish M, Mitchell DA, Gibson MI (3 فبراير 2014). "البوليمرات الاصطناعية تمكن من حفظ الخلايا غير الزجاجية بالتبريد عن طريق تقليل نمو بلورات الجليد أثناء الذوبان". Nature Communications . 5 : 3244. Bibcode :2014NatCo...5.3244D. doi : 10.1038/ncomms4244 . PMID  24488146.
  21. ^ Sambu S (25 يونيو 2015). "نهج بايز لتحسين بروتوكولات الحفظ بالتبريد". PeerJ . 3 : e1039. doi : 10.7717/peerj.1039 . PMC 4485240. PMID  26131379 . 
  22. ^ تومسون م، نيميتس م، إيرهاردت ر (مايو 2011). "الحفظ بالتبريد والذوبان المتحكم في المعدل لخلايا الثدييات". بروتوكول التبادل . doi :10.1038/protex.2011.224.
  23. ^ Rall WF, Fahy GM (14–20 فبراير 1985). "الحفظ بالتبريد الخالي من الجليد لأجنة الفئران عند درجة حرارة -196 درجة مئوية عن طريق التزجيج". مجلة نيتشر . 313 (6003): 573– 5. رمز Bibcode :1985Natur.313..573R. doi :10.1038/313573a0. PMID  3969158.
  24. ^ "Alcor: أصل اسمنا" (PDF) . مؤسسة Alcor لتمديد الحياة. شتاء 2000. تم الاسترجاع في 25 أغسطس 2009 .
  25. ^ ab Kuleshova LL, Wang XW, Wu YN, Zhou Y, Yu H (2004). "تزجيج الخلايا الكبدية المغلفة مع انخفاض معدلات التبريد والتدفئة". Cryo Letters . 25 (4): 241– 54. PMID  15375435.
  26. ^ Kuleshova L, Gianaroli L, Magli C, Ferraretti A, Trounson A (ديسمبر 1999). "الولادة بعد تجميد عدد صغير من البويضات البشرية: تقرير حالة". Human Reproduction . 14 (12): 3077– 9. doi : 10.1093/humrep/14.12.3077 . PMID  10601099.
  27. ^ Bhat SN, Sharma A, Bhat SV (ديسمبر 2005). "التزجيج وانتقال الزجاج للماء: رؤى من مسبار الدوران ESR". Physical Review Letters . 95 (23): 235702. arXiv : cond-mat/0409440 . Bibcode :2005PhRvL..95w5702B. doi :10.1103/PhysRevLett.95.235702. PMID  16384318.
  28. ^ Fahy GM, Wowk B, Pagotan R, Chang A, Phan J, Thomson B, Phan L (يوليو 2009). "الجوانب الفيزيائية والبيولوجية للتزجيج الكلوي". Organogenesis . 5 (3): 167– 75. doi :10.4161/org.5.3.9974. PMC 2781097. PMID  20046680 . 
  29. ^ تشامبرلين، فريد (شتاء 2000). "تحية إلى FM-2030" (PDF) . Cryonics . 21 (4): 11. مؤرشف من الأصل (PDF) في 19 نوفمبر 2010. تم الاسترجاع في 2009-08-25 .
  30. ^ جيديس، ليندا (11 سبتمبر 2013). "قلب من زجاج قد يكون مفتاحًا لأعضاء البنوك". مجلة نيو ساينتست .
  31. ^ فلين م (10 أكتوبر 2018). "قلب الجليد". مجلة BOSS .
  32. ^ US 9314015، فان سيكل، ستيفن وجونز، تانيا، "طريقة وجهاز للوقاية من التكسير الحراري الميكانيكي في الأنسجة الزجاجية باستخدام التبريد السريع والتدفئة عن طريق النفخ"، نُشر في 2016-04-19، وتم تخصيصه لشركة أريجوس بيوميديكال المحدودة. 
  33. ^ Suszynski TM، Rizzari MD، Scott WE، Tempelman LA، Taylor MJ، Papas KK (يونيو 2012). "النفخ (أو ضخ الأكسجين الغازي) كطريقة لحفظ الأعضاء". Cryobiology . 64 (3): 125– 43. doi :10.1016/j.cryobiol.2012.01.007. PMC 3519283. PMID  22301419 . 
  34. ^ Lee JY, Lee JE, Kim DK, Yoon TK, Chung HM, Lee DR (فبراير 2010). "التركيز العالي للمصل الاصطناعي والتوازن التدريجي والتبريد البطيء كتقنية فعالة لحفظ الخلايا الجذعية الجنينية البشرية بالتبريد على نطاق واسع". الخصوبة والعقم . 93 (3): 976– 85. doi : 10.1016/j.fertnstert.2008.10.017 . PMID  19022437.
  35. ^ فيشر، باربرا. "الحفظ بالتبريد: ما تحتاج إلى معرفته عن التجميد بالتبريد العميق". www.susupport.com . تم الاسترجاع في 3 أغسطس 2022 .
  36. ^ بانيس ب، ناجيل م، فان دن هووي آي (نوفمبر 2020). "التحديات والآفاق المتعلقة بحفظ الموارد الوراثية للمحاصيل في بنوك الجينات الحقلية، وفي مجموعات المختبر و/أو في النيتروجين السائل". النباتات . 9 (12): 1634. رمز Bibcode :2020Plnts...9.1634P. doi : 10.3390/plants9121634 . PMC 7761154. PMID  33255385 . 
  37. ^ مالك زاده س (2009). "الحفظ بالتبريد للنسيج المحوري لنبات الزعفران". علم الأحياء بالتبريد . 59 (3): 412. doi :10.1016/j.cryobiol.2009.10.163.
  38. ^ ميكولا، آنا؛ شميلارز، باوي؛ هاسوبسكا-برزيبيل، تيريزا؛ كولوس، داريوش. ماسلانكا، مالغورزاتا؛ بافلوفسكا، بوزينا؛ زيمنوك جوزوفسكا، إيوا (14 ديسمبر 2022). “الحفظ بالتبريد للأنسجة النباتية في بولندا: المساهمات البحثية والوضع الحالي والتطبيقات”. Acta Societatis Botanicorum Poloniae . 91 . دوى : 10.5586/asbp.9132 .
  39. ^ كريمر، ماريا (3 ديسمبر 2020). "ولادة فتاة في تينيسي من جنين مجمد لمدة 27 عامًا". نيويورك تايمز .
  40. ^ "Genetics & IVF Institute". Givf.com. مؤرشف من الأصل في 6 ديسمبر 2012. تم الاسترجاع في 27 يوليو 2009 .
  41. ^ abc Riggs R, Mayer J, Dowling-Lacey D, Chi TF, Jones E, Oehninger S (يناير 2010). "هل يؤثر وقت التخزين على البقاء على قيد الحياة بعد ذوبان الجليد ونتيجة الحمل؟ تحليل 11768 جنينًا بشريًا محفوظًا بالتبريد". الخصوبة والعقم . 93 (1): 109–15 . doi : 10.1016/j.fertnstert.2008.09.084 . PMID  19027110.
  42. ^ Isachenko V, Lapidus I, Isachenko E, Krivokharchenko A, Kreienberg R, Woriedh M, et al. (أغسطس 2009). "التزجيج في أنسجة المبيض البشرية مقابل التجميد التقليدي: التقييم المورفولوجي والغدد الصماء والبيولوجيا الجزيئية". التكاثر . 138 (2): 319–27 . doi : 10.1530/REP-09-0039 . PMID  19439559.
  43. ^ ab Oktay K, Oktem O (فبراير 2010). "الحفظ بالتبريد وزرع المبيض للحفاظ على الخصوبة للأغراض الطبية: تقرير عن تجربة مستمرة". الخصوبة والعقم . 93 (3): 762– 8. doi : 10.1016/j.fertnstert.2008.10.006 . PMID  19013568.
  44. ^ Donnez, J; Dolmans, Mm; Demylle, D; Jadoul, P; Pirard, C; Squifflet, J; Martinez-Madrid, B; Van Langendonckt, A (أكتوبر 2004). "الولادة الحية بعد زراعة أنسجة المبيض المحفوظة بالتبريد". The Lancet . 364 (9443): 1405– 1410. doi :10.1016/S0140-6736(04)17222-X. PMID  15488215.
  45. ^ Lan C, Xiao W, Xiao-Hui D, Chun-Yan H, Hong-Ling Y (فبراير 2010). "زراعة الأنسجة قبل زرع أنسجة مبيض الجنين البشري المجمدة والمذابة في الفئران المصابة بنقص المناعة". الخصوبة والعقم . 93 (3): 913–9 . doi : 10.1016/j.fertnstert.2008.10.020 . PMID  19108826.
  46. ^ Glujovsky D, Riestra B, Sueldo C, Fiszbajn G, Repping S, Nodar F, Papier S, Ciapponi A (2014). "التزجيج مقابل التجميد البطيء للنساء الخاضعات لحفظ البويضات بالتبريد". قاعدة بيانات كوكرين للمراجعات المنهجية (9): CD010047. doi :10.1002/14651858.CD010047.pub2. PMC 11246547 . PMID  25192224. 
  47. ^ أخبار وبيانات صحفية من Planer > ولادة طفل بعد تخزين السائل المنوي لمدة 22 عامًا باستخدام مجمد Planer ذي المعدل المتحكم به محفوظ في 2012-09-08 في archive.today 14/10/2004
  48. ^ Wyns C, Curaba M, Vanabelle B, Van Langendonckt A, Donnez J (2010). "خيارات الحفاظ على الخصوبة لدى الأولاد قبل سن البلوغ". Human Reproduction Update . 16 (3): 312– 28. doi : 10.1093/humupd/dmp054 . PMID  20047952.
  49. ^ Schulte J, Reski R (2004). "الحفظ بالتبريد عالي الإنتاجية لـ 140,000 طفرة من Physcomitrella patens". علم الأحياء النباتية . 6 (2). التكنولوجيا الحيوية النباتية، جامعة فرايبورغ، فرايبورغ، ألمانيا: 119– 27. رمز Bibcode :2004PlBio...6..119S. doi :10.1055/s-2004-817796. PMID  15045662.
  50. ^ “الطحالب المجمدة”. ساينس ديلي (خبر صحفى). جامعة ألبرت لودفيغ فرايبورغ. 6 مارس 2010.
  51. ^ فرانسوا م، كوبلاند آي بي، يوان س، روميو موريز ر، والر إي كيه، جاليبو ج (فبراير 2012). "خلايا الأنسجة المتوسطة المحفوظة بالتبريد تظهر خصائص مثبطة للمناعة ضعيفة نتيجة لاستجابة الصدمة الحرارية وضعف ترخيص الإنترفيرون جاما". العلاج الخلوي . 14 (2): 147-52 . doi :10.3109/14653249.2011.623691. PMC 3279133. PMID  22029655 . 
  52. ^ روكي بوردا، سيزار أوغوستو؛ كولوس، داريوش؛ فاكارو دي سوزا، أنجيلا؛ كافياني، بهزاد؛ فيسينتي، إدواردو فيستوزو (7 يونيو 2021). "الحفظ بالتبريد للبلازما الوراثية النباتية الزراعية باستخدام طرق تعتمد على التزجيج: نظرة عامة على دراسات حالة مختارة". المجلة الدولية للعلوم الجزيئية . 22 (11): 6157. doi : 10.3390/ijms22116157 . PMC 8201202. PMID  34200414 . 
  53. ^ لي، تشونغ هاو (مارس 2022). "الحفظ بالتبريد لبذور زنبق الماء الأزرق (Nymphaea caerulea) باستخدام محلول التزجيج النباتي المضاف إليه الجلوتاثيون، PVS+". arXiv : 2203.14201 [q-bio.OT].(تم سحبه . إذا كان هذا اقتباسًا مقصودًا لورقة مسحوبة، فيرجى استبداله بـ .{{retracted|...}}{{retracted|...|intentional=yes}} )
  54. ^ 李崇豪( 2016 ) (Nymphaea caerulea) باستخدام الجلوتاثيون بإضافة محلول تزجيج النبات، PVS+ ] (الأطروحة) (باللغة الصينية). اتش دي ال :11296/477356. أو سي إل سي  1009363362.[ الصفحة المطلوبة ]
  55. ^ ويزبرجر، ميندي (27 يوليو 2018). "ديدان متجمدة منذ 42000 عام في التربة الصقيعية السيبيرية تتلوى من أجل الحياة". لايف ساينس .
  56. ^ Shatilovich AV، Tchesunov AV، Neretina TV، Grabarnik IP، Gubin SV، Vishnivetskaya TA، Onstott TC، Rivkina EM (مايو 2018). “الديدان الخيطية القابلة للحياة من أواخر العصر الجليدي الجليدي في الأراضي المنخفضة لنهر كوليما”. دوكلادي للعلوم البيولوجية . 480 (1): 100– 102. دوى :10.1134 / S0012496618030079. بميد  30009350.
  57. ^ ناكاسوني، كارين ك.؛ بيترسون، ستيفن دبليو؛ جونج، شونج تشانج (2004). "الحفاظ على الثقافات الفطرية وتوزيعها". التنوع البيولوجي للفطريات . ص  37-47 . doi :10.1016/B978-012509551-8/50006-4. ISBN 978-0-12-509551-8.
  58. ^ أب فيت، لوري ج.؛ كالدويل، جانالي ب. (2014). علم الزواحف والزواحف . دوى :10.1016/C2010-0-67152-5. رقم ISBN 978-0-12-386919-7.[ الصفحة المطلوبة ]
  59. ^ التجفيف بالتجميد والحفظ بالتبريد للبكتيريا
  60. ^ "Addgene: Protocol - How to Create a Bacterial Glycerol Stock". Addgene.org . تم الاسترجاع في 9 سبتمبر 2015 .
  61. ^ "نمو الثقافات البكتيرية". مؤرشف من الأصل في 2013-09-07 . تم الاسترجاع 2014-05-15 .
  62. ^ ab Friedrich, Alexander (2017). "صعود قوة التبريد: السياسة الحيوية في عصر الحياة المبردة". Cryopolitics . The MIT Press. ص  59-70 . doi :10.7551/mitpress/10456.003.0006. ISBN 978-0-262-33869-1. JSTOR  j.ctt1n2ttqh.6.
  63. ^ فالكونر، كيت (أكتوبر 2024). "الحفظ بالتبريد وموت الشخصية القانونية". الوفيات . 29 (4): 762- 777. doi : 10.1080/13576275.2023.2230906 .
  64. ^ شيبر هيوز، نانسي؛ لوك، مارجريت م. (مارس 1987). "الجسد الواعي: مقدمة للعمل المستقبلي في الأنثروبولوجيا الطبية". مجلة الأنثروبولوجيا الطبية الفصلية . 1 (1): 6- 41. doi :10.1525/maq.1987.1.1.02a00020.
  65. ^ فوكو، ميشيل (1991). "الحق في الموت والسلطة على الحياة". في رابينو، بول (محرر). قارئ فوكو: مقدمة لفكر فوكو . بنغوين. ص  258- 272. ISBN 978-0-14-012486-6.
  66. ^ بيري، ر. مايكل (أكتوبر 2014). "فشل التعليق: دروس من السنوات الأولى". أرشيف التجميد .
  67. ^ شيبر هيوز، نانسي؛ لوك، مارجريت م. (مارس 1987). "الجسد الواعي: مقدمة للعمل المستقبلي في الأنثروبولوجيا الطبية". مجلة الأنثروبولوجيا الطبية الفصلية . 1 (1): 6- 41. doi :10.1525/maq.1987.1.1.02a00020.
  68. ^ أومه ، جورج فرانكلين. أومه ، آن سي. (22 مارس 2024). “Cryonics وكرامة الحياة البشرية: نهج أخلاقي”. مجلة Nnadiebube للغات والآداب . 2 (1).
  69. ^ Dein, Simon (أغسطس 2022). "التبريد: العلم أم الدين". مجلة الدين والصحة . 61 (4): 3164– 3176. doi :10.1007/s10943-020-01166-6. PMID  33523374.
  70. ^ ستان، أوانا مارا (2016). "تعليق التجميد - مناقشة محدودية الحياة، وتمديد رأس المال الزمني وإلغاء الموت". مجلة البحوث المقارنة في الأنثروبولوجيا وعلم الاجتماع . 7 (2): 71- 91.
  71. ^ abc Cohen, Jeremy (5 نوفمبر 2020). "الأجساد المجمدة والتخيلات المستقبلية: الموت بمساعدة الغير، والتبريد، والموت الجيد". Religions . 11 (11): 584. doi : 10.3390/rel11110584 .
  72. ^ رومان، تيفاني (18 مايو 2010). "إطالة العمر إلى أقصى حد: الاستثمار في التجميد العميق على المدى البعيد". الأنثروبولوجيا الطبية . 29 (2): 194– 215. doi :10.1080/01459741003715391. PMID  20455144.
  73. ^ كونواي، هيذر (يناير 2018). "الجثث المجمدة والوالدان المتخاصمان: إعادة النظر في قانون جوهانسبرج (التخلص من الجثة)". مجلة القانون الحديث . 81 (1): 132-141 . doi :10.1111/1468-2230.12319.
  74. ^ ليك، جون أونجوود توماس وجوناثان (20 نوفمبر 2016). "طفل يبلغ من العمر 7 سنوات يوقع على تجميد الجسم". صحيفة صنداي تايمز .

قراءة إضافية

  • Engelmann F, Dulloo ME, Astorga C, Dussert S, Anthony F, eds. (2007). Conserving coffee genetic resources. Bioversity International, CATIE, IRD. p. 61. مؤرشف من الأصل في 2007-12-04 . تم الاسترجاع في 2007-12-12 .
  • بانيس ب (2009). الحفظ بالتبريد للبلازما الجرثومية لموزا: الطبعة الثانية (PDF) . مونبلييه، فرنسا: منظمة التنوع البيولوجي الدولية. ص 51. ISBN 978-2-910810-86-3.
  • ReproTech Limited (2012). "الحفاظ على الخصوبة". ReproTech Limited. مؤرشف من الأصل في 2012-09-04.
  • Nakasone KK, Peterson SW, Jong SC (2004). "الحفاظ على الثقافات الفطرية وتوزيعها". التنوع البيولوجي للفطريات: أساليب الحصر والمراقبة . أمستردام: Elsevier Academic Press. ص 37-47. ISBN 9780125095518.
  • بيري إس إف (1995). "التجفيف بالتجميد والحفظ بالتبريد للبكتيريا". بروتوكولات الحفظ بالتبريد والتجفيف بالتبريد . طرق في علم الأحياء الجزيئي. المجلد 38. كليفتون، نيوجيرسي، ص  21-30 . doi :10.1385/0-89603-296-5:21. ISBN 0-89603-296-5. PMID  7647859.{{cite book}}:CS1 maint: موقع الناشر المفقود ( الرابط )
تم الاسترجاع من "https://en.wikipedia.org/w/index.php?title=الحفظ بالتبريد&oldid=1269108756"
Original text
Rate this translation
Your feedback will be used to help improve Google Translate