علم الأحياء الجزيئي

الموسوعة الحرة
جزء من سلسلة عن
علم الأحياء
علم الحياة
المكونات الرئيسية
الفروع
Research
Applications
  • icon Biology portal
  •  Category
  • v
  • t
  • e

علم الأحياء الجزيئي / م ə ˈ ل ɛ ك ج ʊ ل ər / هو فرع من علم الأحياء الذي يسعى إلى فهم الأساس الجزيئي للنشاط البيولوجي داخل الخلايا وبينها ، بما في ذلك التخليق الجزيئي الحيوي ، والتعديل، والآليات، والتفاعلات. [1] [2] [3]

على الرغم من ملاحظة الخلايا والهياكل المجهرية الأخرى في الكائنات الحية منذ وقت مبكر من القرن الثامن عشر، إلا أن الفهم التفصيلي للآليات والتفاعلات التي تحكم سلوكها لم يظهر حتى القرن العشرين، عندما تقدمت التقنيات المستخدمة في الفيزياء والكيمياء بشكل كافٍ للسماح بتطبيقها في العلوم البيولوجية. تم استخدام مصطلح "علم الأحياء الجزيئي" لأول مرة في عام 1945 من قبل الفيزيائي الإنجليزي ويليام أستبيري ، الذي وصفه بأنه نهج يركز على تمييز أسس الظواهر البيولوجية - أي الكشف عن الهياكل والخصائص الفيزيائية والكيميائية للجزيئات البيولوجية، بالإضافة إلى تفاعلاتها مع الجزيئات الأخرى وكيف تفسر هذه التفاعلات ملاحظات ما يسمى بالبيولوجيا الكلاسيكية، والتي تدرس بدلاً من ذلك العمليات البيولوجية على نطاقات أكبر ومستويات أعلى من التنظيم. [4] في عام 1953، كان فرانسيس كريك وجيمس واتسون وروزاليند فرانكلين وزملاؤهم في وحدة مجلس البحوث الطبية بمختبر كافنديش أول من وصف نموذج الحلزون المزدوج للبنية الكيميائية للحمض النووي الريبي منقوص الأكسجين (DNA)، والذي غالبًا ما يُعتبر حدثًا بارزًا في هذا المجال الناشئ لأنه قدم أساسًا فيزيائيًا وكيميائيًا لفهم فكرة الأحماض النووية كمادة أساسية للوراثة البيولوجية والتي كانت غامضة سابقًا. اقترحوا هذا الهيكل بناءً على أبحاث سابقة أجراها فرانكلين، والتي نقلها إليهم موريس ويلكنز وماكس بيروتز . [5] أدى عملهم إلى اكتشاف الحمض النووي في الكائنات الحية الدقيقة والنباتات والحيوانات الأخرى. [6]

يشمل مجال علم الأحياء الجزيئي تقنيات تمكن العلماء من التعرف على العمليات الجزيئية. [7] تُستخدم هذه التقنيات لاستهداف الأدوية الجديدة بكفاءة، وتشخيص الأمراض، وفهم فسيولوجيا الخلايا بشكل أفضل. [8] يتم تغطية بعض الأبحاث السريرية والعلاجات الطبية الناشئة عن علم الأحياء الجزيئي تحت العلاج الجيني ، في حين يُشار الآن إلى استخدام علم الأحياء الجزيئي أو علم الأحياء الخلوي الجزيئي في الطب باسم الطب الجزيئي . [ بحاجة لمصدر ]

تاريخ علم الأحياء الجزيئي

وصف الزاوية في بنية الحمض النووي
تمثيل بياني لبنية الحمض النووي لواتسون وكريك

يقع علم الأحياء الجزيئي عند تقاطع الكيمياء الحيوية وعلم الوراثة ؛ ومع ظهور هذه التخصصات العلمية وتطورها في القرن العشرين، أصبح من الواضح أن كليهما سعى إلى تحديد الآليات الجزيئية التي تكمن وراء الوظائف الخلوية الحيوية. [9] [10] ارتبط التقدم في علم الأحياء الجزيئي ارتباطًا وثيقًا بتطوير التقنيات الجديدة وتحسينها. [11] تم توضيح علم الأحياء الجزيئي من خلال عمل العديد من العلماء، وبالتالي فإن تاريخ المجال يعتمد على فهم هؤلاء العلماء وتجاربهم. [ بحاجة لمصدر ]

نشأ مجال علم الوراثة من محاولات فهم مجموعة القواعد التي تقوم عليها عملية التكاثر والوراثة ، وطبيعة وحدات الوراثة الافتراضية المعروفة باسم الجينات . كان جريجور مندل رائدًا في هذا العمل في عام 1866، عندما وصف لأول مرة قوانين الوراثة التي لاحظها في دراساته عن التهجينات في نباتات البازلاء. [12] أحد قوانين الوراثة الجينية هو قانون الفصل ، والذي ينص على أن الأفراد ثنائيي الصبغيات الذين لديهم أليلين لجين معين سينقلون أحد هذين الأليلين إلى ذريتهم. [13] وبسبب عمله النقدي، يشار إلى دراسة الوراثة الجينية عادةً باسم علم الوراثة المندلي . [14]

كان اكتشاف بنية الحمض النووي DNA من أهم الإنجازات في علم الأحياء الجزيئي . بدأ هذا العمل في عام 1869 بواسطة فريدريش ميشر ، وهو عالم كيمياء حيوية سويسري اقترح لأول مرة بنية تسمى النوكلين ، والتي نعرفها الآن باسم (حمض الديوكسي ريبونوكلييك)، أو الحمض النووي. [15] اكتشف هذه المادة الفريدة من خلال دراسة مكونات الضمادات المليئة بالصديد، وملاحظة الخصائص الفريدة لـ "المواد المحتوية على الفوسفور". [16] كان فويبوس ليفين أحد المساهمين البارزين في نموذج الحمض النووي ، حيث اقترح "نموذج البولينيوكليوتيد" للحمض النووي في عام 1919 نتيجة لتجاربه الكيميائية الحيوية على الخميرة. [17] في عام 1950، توسع إروين شارغاف في عمل ليفين وأوضح بعض الخصائص المهمة للأحماض النووية: أولاً، يختلف تسلسل الأحماض النووية عبر الأنواع. [18] ثانيًا، يكون التركيز الكلي للبيورينات (الأدينين والجوانين) دائمًا مساويًا للتركيز الكلي للبيريميدينات (السيستين والثايمين). [15] يُعرف هذا الآن باسم قاعدة شارغاف. في عام 1953، نشر جيمس واتسون وفرانسيس كريك البنية الحلزونية المزدوجة للحمض النووي، [19] استنادًا إلى عمل علم البلورات بالأشعة السينية الذي قامت به روزاليند فرانكلين والذي نقله إليهم موريس ويلكنز وماكس بيروتز . [5] وصف واتسون وكريك بنية الحمض النووي وتكهنوا بالآثار المترتبة على هذه البنية الفريدة للآليات المحتملة لتضاعف الحمض النووي. [19] حصل واتسون وكريك على جائزة نوبل في علم وظائف الأعضاء أو الطب عام 1962، جنبًا إلى جنب مع ويلكنز، لاقتراح نموذج لبنية الحمض النووي. [6]

في عام 1961، تم إثبات أنه عندما يقوم الجين بتشفير بروتين ، فإن ثلاث قواعد متسلسلة من الحمض النووي للجين تحدد كل حمض أميني متتالي من البروتين. [20] وبالتالي فإن الشفرة الوراثية عبارة عن شفرة ثلاثية، حيث تحدد كل ثلاثية (تسمى كودون ) حمضًا أمينيًا معينًا. وعلاوة على ذلك، فقد تبين أن الكودونات لا تتداخل مع بعضها البعض في تسلسل الحمض النووي الذي يشفر البروتين، وأن كل تسلسل يُقرأ من نقطة بداية ثابتة. خلال الفترة 1962-1964، من خلال استخدام الطفرات القاتلة المشروطة لفيروس بكتيري، [21] تم إحراز تقدم أساسي في فهمنا لوظائف وتفاعلات البروتينات المستخدمة في آلية تكرار الحمض النووي وإصلاح الحمض النووي وإعادة تركيب الحمض النووي وفي تجميع الهياكل الجزيئية. [22]

تجربة جريفيث

تجربة جريفيث

في عام 1928، واجه فريدريك جريفيث خاصية الضراوة في بكتيريا المكورات الرئوية ، والتي كانت تقتل فئران المختبر. وفقًا لمندل، كان من الشائع في ذلك الوقت أن يحدث نقل الجينات فقط من الخلايا الأم إلى الخلايا الابنة. طرح جريفيث نظرية أخرى، حيث ذكر أن نقل الجينات الذي يحدث في عضو من نفس الجيل يُعرف باسم نقل الجينات الأفقي (HGT). يشار إلى هذه الظاهرة الآن باسم التحول الجيني. [23]

تناولت تجربة جريفيث بكتيريا المكورات الرئوية، التي كانت تحتوي على سلالتين مختلفتين، إحداهما خبيثة وناعمة والأخرى غير خبيثة وخشنة. كان للسلالة الناعمة مظهر لامع بسبب وجود نوع معين من السكاريد المتعدد - وهو بوليمر من الجلوكوز وكبسولة حمض الجلوكورونيك. وبسبب طبقة السكاريد المتعددة للبكتيريا، لا يستطيع الجهاز المناعي للمضيف التعرف على البكتيريا وتقتل المضيف. أما السلالة الأخرى غير الخبيثة والخشنة، فتفتقر إلى كبسولة السكاريد المتعددة هذه ولها مظهر باهت وخشن. [ بحاجة لمصدر ]

من المعروف أن وجود أو غياب الكبسولة في السلالة يتم تحديده وراثيًا. تحدث السلالات الملساء والخشنة في عدة أنواع مختلفة مثل SI وS-II وS-III وما إلى ذلك وRI وR-II وR-III وما إلى ذلك على التوالي. تختلف كل هذه الأنواع الفرعية من بكتيريا S وR مع بعضها البعض في نوع المستضد الذي تنتجه. [6]

تجربة أفيري-ماكليود-ماكارتي

كانت تجربة أفيري-ماكليود-ماكارتي دراسة بارزة أجريت عام 1944 وأظهرت أن الحمض النووي، وليس البروتين كما كان يُعتقد سابقًا، هو الذي يحمل المعلومات الوراثية في البكتيريا. استخدم أوزوالد أفيري وكولين مونرو ماكليود وماكلين ماكارتي مستخلصًا من سلالة من المكورات الرئوية يمكن أن تسبب الالتهاب الرئوي في الفئران. أظهروا أنه يمكن تحقيق التحول الجيني في البكتيريا عن طريق حقنها بحمض نووي نقي من المستخلص. اكتشفوا أنه عندما هضموا الحمض النووي في المستخلص باستخدام إنزيم الدناز ، ضاع تحول البكتيريا غير الضارة إلى بكتيريا ضارة. قدم هذا دليلاً قويًا على أن الحمض النووي هو المادة الوراثية، مما تحدى الاعتقاد السائد بأن البروتينات مسؤولة. أرسى الأساس لاكتشاف بنيته لاحقًا من قبل واتسون وكريك.

تجربة هيرشي-تشيس

تجربة هيرشي-تشيس

جاء التأكيد على أن الحمض النووي هو المادة الوراثية التي تسبب العدوى من تجربة هيرشي-تشيس . لقد استخدموا الإشريكية القولونية والبكتيريا العاثية للتجربة. تُعرف هذه التجربة أيضًا باسم تجربة الخلاط، حيث تم استخدام خلاط المطبخ كقطعة رئيسية من الأجهزة. أظهر ألفريد هيرشي ومارثا تشيس أن الحمض النووي الذي تم حقنه بواسطة جسيم فاج في بكتيريا يحتوي على جميع المعلومات المطلوبة لتخليق جسيمات فاج نسل. لقد استخدموا النشاط الإشعاعي لوضع علامة على الغلاف البروتيني للبكتيريا العاثية بالكبريت المشع والحمض النووي بالفوسفور المشع، في أنبوبي اختبار مختلفين على التوالي. بعد خلط البكتيريا العاثية والإشريكية القولونية في أنبوب الاختبار، تبدأ فترة الحضانة التي يحول فيها الفاج المادة الوراثية في خلايا الإشريكية القولونية . ثم يتم مزج الخليط أو تحريكه، مما يفصل البكتيريا العاثية عن خلايا الإشريكية القولونية . تم طرد الخليط بالكامل بواسطة جهاز الطرد المركزي وتم فحص الكريات التي تحتوي على خلايا الإشريكية القولونية وتم التخلص من السائل العلوي. أظهرت خلايا الإشريكية القولونية وجود فسفور مشع، مما يشير إلى أن المادة المحولة كانت عبارة عن DNA وليس غلاف البروتين.

يرتبط الحمض النووي المتحول بالحمض النووي لبكتيريا الإشريكية القولونية ولا يُرى النشاط الإشعاعي إلا على الحمض النووي للبكتيريا. يمكن أن ينتقل هذا الحمض النووي المتحور إلى الجيل التالي، ومن هنا ظهرت نظرية النقل الجيني. النقل الجيني هو عملية يحمل فيها الحمض النووي للبكتيريا جزءًا من البكتيريا وينقله إلى الجيل التالي. وهذا أيضًا نوع من أنواع نقل الجينات الأفقي. [6]

تجربة ميسيلسون-ستاهل

تجربة ميسيلسون-ستاهل

كانت تجربة ميسيلسون-ستاهل تجربة بارزة في علم الأحياء الجزيئي قدمت أدلة على التكرار شبه المحافظ للحمض النووي. أجريت التجربة في عام 1958 بواسطة ماثيو ميسيلسون وفرانكلين ستال ، وتضمنت زراعة بكتيريا الإشريكية القولونية في وسط يحتوي على نظير ثقيل من النيتروجين ( 15N ) لعدة أجيال. تسبب هذا في دمج كل الحمض النووي للبكتيريا الذي تم تصنيعه حديثًا مع النظير الثقيل.

بعد السماح للبكتيريا بالتكاثر في وسط يحتوي على نيتروجين طبيعي ( 14N )، تم أخذ عينات في نقاط زمنية مختلفة. ثم خضعت هذه العينات للطرد المركزي في تدرج الكثافة، والذي فصل جزيئات الحمض النووي بناءً على كثافتها.

أظهرت النتائج أنه بعد جيل واحد من التضاعف في وسط 14N ، شكل الحمض النووي شريطًا متوسط ​​الكثافة بين شريط الحمض النووي 15N النقي وشريط الحمض النووي 14N النقي . وقد دعم هذا تكرار الحمض النووي شبه المحافظ الذي اقترحه واتسون وكريك، حيث يعمل كل خيط من جزيء الحمض النووي الأصلي كقالب لتخليق خيط تكميلي جديد، مما ينتج عنه جزيئين من الحمض النووي الابن، يتكون كل منهما من خيط أصلي وخيط جديد تم تخليقهما.

قدمت تجربة ميسيلسون-ستاهل أدلة دامغة على التكرار شبه المحافظ للحمض النووي، وهو أمر أساسي لفهم علم الوراثة وعلم الأحياء الجزيئي.

علم الأحياء الجزيئي الحديث

في أوائل عشرينيات القرن الحادي والعشرين، دخلت البيولوجيا الجزيئية عصرًا ذهبيًا يتميز بالتطور التقني الرأسي والأفقي. عموديًا، تسمح التقنيات الجديدة بمراقبة العمليات البيولوجية في الوقت الفعلي على المستوى الذري. [24] يتمتع علماء الأحياء الجزيئية اليوم بالقدرة على الوصول إلى بيانات التسلسل بأسعار معقولة بشكل متزايد على أعماق أعلى بشكل متزايد، مما يسهل تطوير طرق التلاعب الجيني الجديدة في الكائنات الحية غير النموذجية الجديدة. وبالمثل، سيقود علماء الأحياء الجزيئية الاصطناعية الإنتاج الصناعي للجزيئات الصغيرة والكبيرة من خلال إدخال مسارات التمثيل الغذائي الخارجية في سلالات الخلايا البدائية والحقيقية المختلفة. [25]

أفقيًا، أصبحت بيانات التسلسل أكثر تكلفة واستخدامًا في العديد من المجالات العلمية المختلفة. وهذا من شأنه أن يدفع تنمية الصناعات في الدول النامية ويزيد من إمكانية الوصول إليها للباحثين الأفراد. وعلى نحو مماثل، يمكن الآن تصور تجارب تحرير الجينات باستخدام CRISPR-Cas9 وتنفيذها من قبل الأفراد مقابل أقل من 10000 دولار في الكائنات الحية الجديدة، وهو ما من شأنه أن يدفع تطوير التطبيقات الصناعية والطبية. [26]

العلاقة مع العلوم البيولوجية الأخرى

العلاقة التخطيطية بين الكيمياء الحيوية وعلم الوراثة وعلم الأحياء الجزيئي

تتناول القائمة التالية وجهة نظر حول العلاقات متعددة التخصصات بين علم الأحياء الجزيئي والمجالات الأخرى ذات الصلة. [27]

بينما يمارس الباحثون تقنيات خاصة بعلم الأحياء الجزيئي، فمن الشائع الجمع بين هذه التقنيات والأساليب من علم الوراثة والكيمياء الحيوية . إن الكثير من علم الأحياء الجزيئي كمي، ومؤخرًا تم إنجاز قدر كبير من العمل باستخدام تقنيات علوم الكمبيوتر مثل المعلوماتية الحيوية وعلم الأحياء الحاسوبي . علم الوراثة الجزيئي ، دراسة بنية الجينات ووظيفتها، كان من بين أبرز المجالات الفرعية لعلم الأحياء الجزيئي منذ أوائل العقد الأول من القرن الحادي والعشرين. وتتأثر فروع أخرى من علم الأحياء بعلم الأحياء الجزيئي، إما عن طريق دراسة تفاعلات الجزيئات بشكل مباشر في حد ذاتها كما هو الحال في علم الأحياء الخلوي وعلم الأحياء التنموي ، أو بشكل غير مباشر، حيث تُستخدم التقنيات الجزيئية لاستنتاج السمات التاريخية للسكان أو الأنواع ، كما هو الحال في مجالات علم الأحياء التطوري مثل علم الوراثة السكانية وعلم الوراثة التطورية . هناك أيضًا تقليد طويل لدراسة الجزيئات الحيوية "من الألف إلى الياء"، أو على المستوى الجزيئي، في الفيزياء الحيوية . [30]

تقنيات البيولوجيا الجزيئية

رسوم متحركة للحمض النووي

الاستنساخ الجزيئي

صورة التحويل

يستخدم الاستنساخ الجزيئي لعزل ثم نقل تسلسل الحمض النووي المطلوب إلى ناقل بلازميدي. [31] تم تطوير تقنية الحمض النووي المؤتلف هذه لأول مرة في الستينيات. [32] في هذه التقنية، يتم استنساخ تسلسل الحمض النووي المشفر لبروتين مطلوب باستخدام تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR)، و/أو إنزيمات القيد ، في بلازميد ( ناقل تعبير ). عادةً ما يحتوي ناقل البلازميد على 3 سمات مميزة على الأقل: أصل التضاعف، وموقع استنساخ متعدد (MCS)، وعلامة انتقائية (عادةً مقاومة المضادات الحيوية ). بالإضافة إلى ذلك، توجد مناطق المحفز وموقع بدء النسخ أعلى موقع الاستنساخ المتعدد ، والتي تنظم التعبير عن الجين المستنسخ.

يمكن إدخال هذا البلازميد في الخلايا البكتيرية أو الحيوانية. يمكن إدخال الحمض النووي إلى الخلايا البكتيرية عن طريق التحويل عن طريق امتصاص الحمض النووي العاري، أو الاقتران عن طريق اتصال الخلية بالخلية أو عن طريق التحويل عن طريق ناقل فيروسي. يُطلق على إدخال الحمض النووي إلى الخلايا حقيقية النواة ، مثل الخلايا الحيوانية، بوسائل فيزيائية أو كيميائية اسم التحويل الجيني . تتوفر العديد من تقنيات التحويل الجيني المختلفة، مثل تحويل فوسفات الكالسيوم، والكهرومسام ، والحقن المجهري ، وتحويل الليبوزوم . يمكن دمج البلازميد في الجينوم ، مما يؤدي إلى تحويل جيني مستقر، أو قد يظل مستقلاً عن الجينوم ويُعبر عنه مؤقتًا، ويُطلق عليه التحويل الجيني العابر. [33] [34]

إن الحمض النووي الذي يشفر بروتينًا معينًا موجود الآن داخل الخلية، ويمكن الآن التعبير عن البروتين . وهناك مجموعة متنوعة من الأنظمة، مثل المحفزات القابلة للتحريض وعوامل الإشارة الخلوية المحددة، متاحة للمساعدة في التعبير عن البروتين المطلوب بمستويات عالية. ومن الممكن بعد ذلك استخراج كميات كبيرة من البروتين من الخلية البكتيرية أو حقيقية النواة. ويمكن اختبار البروتين من حيث النشاط الأنزيمي في ظل مجموعة متنوعة من المواقف، وقد يتم تبلور البروتين بحيث يمكن دراسة بنيته الثانوية ، أو في صناعة الأدوية، يمكن دراسة نشاط الأدوية الجديدة ضد البروتين. [35]

تفاعل البوليميراز المتسلسل

تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) هو تقنية متعددة الاستخدامات للغاية لنسخ الحمض النووي. باختصار، يسمح تفاعل البوليميراز المتسلسل بنسخ أو تعديل تسلسل DNA معين بطرق محددة مسبقًا. التفاعل قوي للغاية وفي ظل ظروف مثالية يمكن أن يضخم جزيء DNA واحد ليصبح 1.07 مليار جزيء في أقل من ساعتين. لتفاعل البوليميراز المتسلسل العديد من التطبيقات، بما في ذلك دراسة التعبير الجيني، واكتشاف الكائنات الحية الدقيقة المسببة للأمراض، واكتشاف الطفرات الجينية، وإدخال الطفرات إلى الحمض النووي. [36] يمكن استخدام تقنية تفاعل البوليميراز المتسلسل لإدخال مواقع إنزيم القيد إلى نهايات جزيئات الحمض النووي، أو لتحوير قواعد معينة من الحمض النووي، والأخيرة هي طريقة يشار إليها باسم الطفرات الموجهة بالموقع . يمكن أيضًا استخدام تفاعل البوليميراز المتسلسل لتحديد ما إذا كان جزء DNA معين موجودًا في مكتبة cDNA . يحتوي تفاعل البوليميراز المتسلسل على العديد من الاختلافات، مثل تفاعل البوليميراز المتسلسل العكسي ( RT-PCR ) لتضخيم الحمض النووي الريبي، ومؤخرًا، تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي الذي يسمح بالقياس الكمي لجزيئات الحمض النووي أو الحمض النووي الريبي. [37] [38]

جل أجاروز بنسبة 2% في محلول بورات مصبوب في صينية جل

الرحلان الكهربائي للهلام

صفحة SDS

الرحلان الكهربائي للهلام هو تقنية تفصل الجزيئات حسب حجمها باستخدام هلام الآجار أو البولي أكريلاميد. [39] هذه التقنية هي واحدة من الأدوات الرئيسية لعلم الأحياء الجزيئي. المبدأ الأساسي هو أنه يمكن فصل شظايا الحمض النووي عن طريق تطبيق تيار كهربائي عبر الهلام - لأن العمود الفقري للحمض النووي يحتوي على مجموعات فوسفاتية مشحونة سلبًا، فإن الحمض النووي سينتقل عبر هلام الآجار نحو الطرف الموجب للتيار. [39] يمكن أيضًا فصل البروتينات على أساس الحجم باستخدام هلام SDS-PAGE ، أو على أساس الحجم وشحنتها الكهربائية باستخدام ما يُعرف بالرحلان الكهربائي للهلام ثنائي الأبعاد . [40]

البروتينات الملطخة على هلام PAGE باستخدام صبغة Coomassie الزرقاء

اختبار بروتين برادفورد

اختبار برادفورد هو تقنية في علم الأحياء الجزيئي تمكن من تحديد كميات جزيئات البروتين بسرعة ودقة باستخدام الخصائص الفريدة لصبغة تسمى Coomassie Brilliant Blue G-250. [41] يخضع Coomassie Blue لتحول مرئي في اللون من البني المحمر إلى الأزرق الساطع عند الارتباط بالبروتين. [41] في حالته الكاتيونية غير المستقرة، يكون لـ Coomassie Blue طول موجي خلفي يبلغ 465 نانومتر ويعطي لونًا بنيًا محمرًا. [42] عندما يرتبط Coomassie Blue بالبروتين في محلول حمضي، يتحول الطول الموجي الخلفي إلى 595 نانومتر ويعطي الصبغ لونًا أزرق ساطعًا. [42] ترتبط البروتينات في الاختبار بـ Coomassie Blue في حوالي دقيقتين، ويكون مركب البروتين والصبغة مستقرًا لمدة ساعة تقريبًا، على الرغم من أنه يوصى بأخذ قراءات الامتصاص في غضون 5 إلى 20 دقيقة من بدء التفاعل. [41] يمكن بعد ذلك قياس تركيز البروتين في اختبار برادفورد باستخدام مطياف الضوء المرئي ، وبالتالي لا يتطلب معدات مكثفة. [42]

تم تطوير هذه الطريقة في عام 1975 بواسطة ماريون م. برادفورد ، وقد مكنت من تحديد كمية البروتين بشكل أسرع وأكثر دقة مقارنة بالطرق السابقة: إجراء لوري واختبار بيوريت. [41] على عكس الطرق السابقة، فإن اختبار برادفورد ليس عرضة للتدخل من قبل العديد من الجزيئات غير البروتينية، بما في ذلك الإيثانول وكلوريد الصوديوم وكلوريد المغنيسيوم. [41] ومع ذلك، فهو عرضة للتأثير من قبل عوامل التخزين القلوية القوية، مثل كبريتات دوديسيل الصوديوم (SDS). [41]

ترسيب الجزيئات الكبيرة وفحصها

اشتُقت مصطلحات النقل الشمالي والغربي والشرقي من ما كان في البداية مزحة في علم الأحياء الجزيئي لعبت على مصطلح النقل الجنوبي ، بعد التقنية التي وصفها إدوين ساوثرن لتهجين الحمض النووي المنقوع. في الواقع، لم تستخدم باتريشيا توماس، مطورة النقل الحمض النووي الريبي الذي أصبح يُعرف فيما بعد باسم النقل الشمالي ، هذا المصطلح. [43]

التهجين الجنوبي

سُميت هذه الطريقة باسم مخترعها، عالم الأحياء إدوين ساوثرن ، وهي طريقة لفحص وجود تسلسل DNA محدد داخل عينة DNA. يتم فصل عينات DNA قبل أو بعد هضم إنزيم القيد (إنزيم القيد) عن طريق الرحلان الكهربائي للهلام ثم يتم نقلها إلى غشاء عن طريق الترسيب عن طريق الخاصية الشعرية . ثم يتعرض الغشاء لمسبار DNA مُسمّى يحتوي على تسلسل قاعدة مكملة للتسلسل الموجود على DNA المطلوب. [44] تُستخدم طريقة الترسيب الجنوبي بشكل أقل شيوعًا في العلوم المعملية نظرًا لقدرة التقنيات الأخرى، مثل تفاعل البوليميراز المتسلسل ، على اكتشاف تسلسلات DNA محددة من عينات DNA. ومع ذلك، لا تزال هذه الترسيبات تُستخدم في بعض التطبيقات، مثل قياس عدد نسخ الجينات المتحولة في الفئران المتحولة وراثيًا أو في هندسة خطوط الخلايا الجذعية الجنينية التي تم حذف جين منها . [30]

التهجين الشمالي

مخطط البقعة الشمالية

تُستخدم البقعة الشمالية لدراسة وجود جزيئات RNA محددة كمقارنة نسبية بين مجموعة من عينات RNA المختلفة. إنها في الأساس عبارة عن مزيج من الرحلان الكهربائي للهلام RNA المغير للطبيعة ، والبقعة . في هذه العملية ، يتم فصل RNA بناءً على الحجم ثم يتم نقله إلى غشاء يتم فحصه بعد ذلك بمكمل مُسمى لتسلسل موضع الاهتمام. يمكن تصور النتائج من خلال مجموعة متنوعة من الطرق اعتمادًا على الملصق المستخدم؛ ومع ذلك، فإن معظمها يؤدي إلى الكشف عن نطاقات تمثل أحجام RNA المكتشفة في العينة. ترتبط شدة هذه النطاقات بكمية RNA المستهدفة في العينات التي تم تحليلها. تُستخدم هذه الطريقة عادةً لدراسة متى وكمية التعبير الجيني الذي يحدث عن طريق قياس مقدار RNA الموجود في عينات مختلفة، على افتراض عدم حدوث أي تنظيم ما بعد النسخ وأن مستويات mRNA تعكس مستويات متناسبة من البروتين المقابل الذي يتم إنتاجه. إنها واحدة من أكثر الأدوات الأساسية لتحديد متى وفي أي ظروف يتم التعبير عن جينات معينة في الأنسجة الحية. [45] [46]

النقل الغربي

تُعَد تقنية ويسترن بلوت إحدى التقنيات التي يمكن من خلالها الكشف عن بروتينات محددة من خليط من البروتينات. [47] ويمكن استخدام تقنية ويسترن بلوت لتحديد حجم البروتينات المعزولة، وكذلك لقياس تعبيرها. [48] وفي تقنية ويسترن بلوت ، يتم فصل البروتينات أولاً حسب الحجم، في هلام رقيق محصور بين لوحين زجاجيين بتقنية تُعرف باسم SDS-PAGE . ثم يتم نقل البروتينات الموجودة في الهلام إلى فلوريد البولي فينيلدين (PVDF) أو نتروسليلوز أو نايلون أو غشاء داعم آخر. ويمكن بعد ذلك فحص هذا الغشاء بمحاليل الأجسام المضادة . ويمكن بعد ذلك تصور الأجسام المضادة التي ترتبط بشكل خاص بالبروتين المطلوب من خلال مجموعة متنوعة من التقنيات، بما في ذلك المنتجات الملونة أو الكيمياء الضوئية أو التصوير الشعاعي التلقائي . وغالبًا ما يتم تمييز الأجسام المضادة بالإنزيمات. وعندما يتعرض ركيزة كيميائية ضوئية للإنزيم ، فإنه يسمح بالكشف. ولا يسمح استخدام تقنيات ويسترن بلوت بالكشف فحسب، بل يسمح أيضًا بالتحليل الكمي. يمكن استخدام طرق مماثلة للترسيب الغربي لصبغ بروتينات محددة مباشرة في الخلايا الحية أو أقسام الأنسجة . [47] [49]

الصبغة الشرقية

تُستخدم تقنية النقل الشرقي للكشف عن التعديلات التي تطرأ على البروتينات بعد الترجمة . يتم فحص البروتينات التي يتم نقلها على غشاء PVDF أو غشاء نتروسليلوز بحثًا عن تعديلات باستخدام ركائز محددة. [50]

المصفوفات الدقيقة

طباعة مجموعة من الحمض النووي
تهجين الهدف بالمسبار

مجموعة مصفوفات الحمض النووي عبارة عن مجموعة من البقع الملتصقة بدعامة صلبة مثل شريحة المجهر حيث تحتوي كل بقعة على قطعة واحدة أو أكثر من شظايا الحمض النووي أحادي السلسلة . تتيح المصفوفات وضع كميات كبيرة من البقع الصغيرة جدًا (قطرها 100 ميكرومتر) على شريحة واحدة. تحتوي كل بقعة على جزيء شظية من الحمض النووي مكمل لتسلسل واحد من الحمض النووي . يسمح أحد أشكال هذه التقنية بتأهيل التعبير الجيني لكائن حي في مرحلة معينة من التطور ( ملف تعريف التعبير ). في هذه التقنية، يتم عزل الحمض النووي الريبي في الأنسجة وتحويله إلى الحمض النووي التكميلي المسمى (cDNA). ثم يتم تهجين هذا الحمض النووي التكميلي مع الشظايا الموجودة على المصفوفة ويمكن إجراء تصور للتهجين. نظرًا لأنه يمكن عمل مجموعات متعددة بنفس موضع الشظايا تمامًا، فهي مفيدة بشكل خاص لمقارنة التعبير الجيني لنسيجين مختلفين، مثل الأنسجة السليمة والسرطانية. أيضًا، يمكن للمرء قياس الجينات التي يتم التعبير عنها وكيف يتغير هذا التعبير بمرور الوقت أو مع عوامل أخرى. هناك العديد من الطرق المختلفة لتصنيع المصفوفات الدقيقة؛ الأكثر شيوعًا هي رقائق السيليكون، وشرائح المجهر ذات البقع التي يبلغ قطرها حوالي 100 ميكرومتر، والمصفوفات المخصصة، والمصفوفات ذات البقع الأكبر على الأغشية المسامية (المصفوفات الكبيرة). يمكن أن يكون هناك أي مكان من 100 بقعة إلى أكثر من 10000 على مصفوفة معينة. يمكن أيضًا صنع المصفوفات بجزيئات أخرى غير الحمض النووي. [51] [52] [53] [54]

أوليجونوكليوتيدات محددة للأليل

إن تقنية النيوكليوتيدات الخاصة بالأليل (ASO) هي تقنية تسمح باكتشاف الطفرات ذات القاعدة الفردية دون الحاجة إلى تفاعل البوليميراز المتسلسل أو الرحلان الكهربائي الهلامي. يتم تعريض مجسات قصيرة (بطول 20-25 نوكليوتيدًا) ومُسمَّاة للحمض النووي المستهدف غير المجزأ، ويحدث التهجين بخصوصية عالية بسبب الطول القصير للمجسات وحتى تغيير القاعدة الواحدة سيعيق التهجين. ثم يتم غسل الحمض النووي المستهدف وإزالة المجسات غير المهجنة. ثم يتم تحليل الحمض النووي المستهدف بحثًا عن وجود المجس عبر النشاط الإشعاعي أو الفلورسنت. في هذه التجربة، كما هو الحال في معظم تقنيات علم الأحياء الجزيئي، يجب استخدام عنصر تحكم لضمان نجاح التجربة. [55] [56]

في علم الأحياء الجزيئي، يتم تطوير الإجراءات والتقنيات باستمرار ويتم التخلي عن التقنيات القديمة. على سبيل المثال، قبل ظهور الرحلان الكهربائي للهلام الحمض النووي ( الأجار أو بولي أكريلاميد )، كان حجم جزيئات الحمض النووي يتم تحديده عادةً من خلال معدل الترسيب في تدرجات السكروز ، وهي تقنية بطيئة وتتطلب الكثير من العمالة وتتطلب أجهزة باهظة الثمن؛ قبل تدرجات السكروز، تم استخدام قياس اللزوجة . بصرف النظر عن أهميتها التاريخية، غالبًا ما يكون من المفيد معرفة التقنيات القديمة، حيث من المفيد أحيانًا حل مشكلة جديدة أخرى لا تكون التقنية الأحدث مناسبة لها. [57]

انظر أيضا

مراجع

  1. ^ ألبرتس ب، جونسون أ، لويس ج، مورجان د، راف م، روبرتس ك، والتر ب (2014). علم الأحياء الجزيئي للخلية، الطبعة السادسة. جارلاند ساينس. ص. 1-10. ISBN 978-1-317-56375-4.
  2. ^ Gannon F (فبراير 2002). "علم الأحياء الجزيئي - ما معنى الاسم؟". تقارير EMBO . 3 (2): 101. doi :10.1093/embo-reports/kvf039. PMC 1083977. PMID  11839687 . 
  3. ^ "علم الأحياء الجزيئي – أحدث الأبحاث والأخبار | Nature". nature.com . تم الاسترجاع في 2021-11-07 .
  4. ^ Astbury, WT (يونيو 1961). "علم الأحياء الجزيئي أم علم الأحياء فوق البنيوي؟". Nature . 190 (4781): 1124. Bibcode :1961Natur.190.1124A. doi : 10.1038/1901124a0 . ISSN  1476-4687. PMID  13684868. S2CID  4172248.
  5. ^ من "روزاليند فرانكلين: مساهمة حاسمة". nature.com .
  6. ^ abcd Verma, PS (2004). علم الأحياء الخلوي، علم الوراثة، علم الأحياء الجزيئي، التطور والبيئة . S Chand and Company. ISBN 81-219-2442-1. OCLC  1045495545.[ الصفحة المطلوبة ]
  7. ^ مورانج، ميشيل (2016). "تاريخ علم الأحياء الجزيئي". موسوعة علوم الحياة . ص. 1-8. doi :10.1002/9780470015902.a0003079.pub3. ISBN 978-0-470-01617-6.
  8. ^ بيلو، إليزابيث أ.؛ شفين، ديبرا أ. (1996-12-01). "علم الأحياء الجزيئي والطب: مقدمة للطبيب السريري". التخدير . 85 (6): 1462–1478. doi : 10.1097/00000542-199612000-00029 . ISSN  0003-3022. PMID  8968195. S2CID  29581630.
  9. ^ باينوم، ويليام (فبراير 1999). "تاريخ علم الأحياء الجزيئي". مجلة نيتشر ميديسين . 5 (2): 140-140. doi :10.1038/5498. ISSN  1546-170X.
  10. ^ مورانج، ميشيل (يونيو 2021). تاريخ علم الأحياء . مطبعة جامعة برينستون. ISBN 978-0-691-18878-2. OCLC  1184123419.[ الصفحة المطلوبة ]
  11. ^ فيلدز، ستانلي (2001-08-28). "التفاعل بين البيولوجيا والتكنولوجيا". وقائع الأكاديمية الوطنية للعلوم . 98 (18): 10051-10054. doi : 10.1073/pnas.191380098 . ISSN  0027-8424. PMC 56913. PMID 11517346  . 
  12. ^ Ellis, TH Noel; Hofer, Julie MI; Timmerman-Vaughan, Gail M.; Coyne, Clarice J.; Hellens, Roger P. (نوفمبر 2011). "Mendel, 150 years on". Trends in Plant Science . 16 (11): 590–596. Bibcode :2011TPS....16..590E. doi :10.1016/j.tplants.2011.06.006. PMID  21775188.
  13. ^ "12.3C: قانون مندل للفصل". Biology LibreTexts . 2018-07-12 . تم الاسترجاع في 2021-11-18 .
  14. ^ "الوراثة المندلية". Genome.gov . تم الاسترجاع في 2021-11-18 .
  15. ^ ab Pray, L (2008). "اكتشاف بنية ووظيفة الحمض النووي: واتسون وكريك". Nature Education . 1 (1): 100. تم الاسترجاع في 2024-06-21 .
  16. ^ جورج، وولف (2003). فريدريش ميشر: الرجل الذي اكتشف الحمض النووي . OCLC  907773747.[ الصفحة المطلوبة ]
  17. ^ Levene, PA (1919). "بنية حمض الخميرة النووي". مجلة الكيمياء الحيوية . 43 (2): 379–382. doi : 10.1016/s0021-9258(18)86289-5 . ISSN  0021-9258.
  18. ^ شارغاف، إروين (يونيو 1950). "الخصوصية الكيميائية للأحماض النووية وآلية تحللها الأنزيمي". Experientia . 6 (6): 201–209. doi :10.1007/bf02173653. PMID  15421335. S2CID  2522535.
  19. ^ ab Watson, JD ; Crick, FHC (أبريل 1953). "البنية الجزيئية للأحماض النووية: بنية للحمض النووي منقوص الأكسجين الريبوز". Nature . 171 (4356): 737–738. Bibcode :1953Natur.171..737W. doi :10.1038/171737a0. ISSN  1476-4687. PMID  13054692. S2CID  4253007.
  20. ^ Crick, FHC; Barnett, Leslie; Brenner, S.; Watts-Tobin, RJ (1961). "General Nature of the Genetic Code for Proteins". Nature . 192 (4809). Springer Science and Business Media LLC: 1227–1232. Bibcode :1961Natur.192.1227C. doi :10.1038/1921227a0. ISSN  0028-0836. PMID  13882203. S2CID  4276146.
  21. ^ Epstein, RH; Bolle, A.; Steinberg, CM; Kellenberger, E.; Boy de la Tour, E.; et al. (1963-01-01). "دراسات فسيولوجية للطفرات القاتلة الشرطية لبكتيريا T4D". ندوات كولد سبرينج هاربور حول علم الأحياء الكمي . 28. مختبر كولد سبرينج هاربور: 375–394. doi :10.1101/sqb.1963.028.01.053. ISSN  0091-7451.
  22. ^ إدغار، بوب (2004-10-01). "جينوم البكتيريا العاثية T4". علم الوراثة . 168 (2): 575-582. doi :10.1093/genetics/168.2.575. ISSN  1943-2631. PMC 1448817. PMID 15514035  . 
  23. ^ Ravenhall, Matt; Škunca, Nives; Lassalle, Florent; Dessimoz, Christophe (مايو 2015). "استنتاج النقل الجيني الأفقي". PLOS Computational Biology . 11 (5): e1004095. Bibcode :2015PLSCB..11E4095R. doi : 10.1371/journal.pcbi.1004095 . PMC 4462595. PMID  26020646 . 
  24. ^ Mojiri, Soheil; Isbaner, Sebastian; Mühle, Steffen; Jang, Hongje; Bae, Albert Johann; Gregor, Ingo; Gholami, Azam; Gholami, Azam; Enderlein, Jörg (2021-06-01). "المجهر السريع متعدد المستويات للتباين الطوري يكشف عن ديناميكيات الالتواء في حركة السوط". Biomedical Optics Express . 12 (6): 3169–3180. doi :10.1364/BOE.419099. ISSN  2156-7085. PMC 8221972. PMID  34221652 . 
  25. ^ فان وارمردام، ت. "مورد مختبر البيولوجيا الجزيئية". Yourbiohelper.com .
  26. ^ فان وارمردام، ت. "مورد مختبر البيولوجيا الجزيئية". Yourbiohelper.com .
  27. ^ Lodish H, Berk A, Zipursky SL, Matsudaira P, Baltimore D, Darnell J (2000). علم الأحياء الخلوي الجزيئي (الطبعة الرابعة). نيويورك: كتب ساينتفك أمريكان. رقم ISBN 978-0-7167-3136-8.
  28. ^ بيرج، جيريمي (2002). الكيمياء الحيوية . تيموكزكو، جون إل.؛ ستراير، لوبيرت (الطبعة الخامسة). نيويورك: دبليو إتش فريمان. رقم ISBN 0-7167-3051-0. OCLC  48055706.
  29. ^ مرجع، الصفحة الرئيسية لعلم الوراثة. "ساعدني على فهم علم الوراثة". مرجع الصفحة الرئيسية لعلم الوراثة . تم الاسترجاع في 31 ديسمبر 2016 .
  30. ^ ab Tian J, ed. (2013). التصوير الجزيئي: الأساسيات والتطبيقات. Springer-Verlag Berlin & Heidelberg GmbH & Co. K. p. 542. ISBN 9783642343032. تم الاسترجاع بتاريخ 2019-07-08 .
  31. ^ "أساسيات الاستنساخ الجزيئي - الماضي والحاضر والمستقبل | NEB". www.neb.com . تم الاسترجاع في 2021-11-25 .
  32. ^ "أساسيات الاستنساخ الجزيئي - الماضي والحاضر والمستقبل | NEB". www.neb.com . تم الاسترجاع في 2021-11-04 .
  33. ^ ألبرتس ب، جونسون أ، لويس ج، راف م، روبرتس ك، والتر ب. عزل واستنساخ وتسلسل الحمض النووي . تم الاسترجاع في 31 ديسمبر 2016 .
  34. ^ Lessard, Juliane C. (1 January 2013). "Molecular cloning". Laboratory Methods in Enzymology: DNA . المجلد 529. ص 85-98. doi :10.1016/B978-0-12-418687-3.00007-0. ISBN 978-0-12-418687-3. ISSN  1557-7988. PMID  24011038.
  35. ^ Kokate C, Jalalpure SS, Hurakadle PJ (2016). Textbook of Pharmaceutical Biotechnology. Expression Cloning. Elsevier. ص. 125. ISBN 9788131239872. تم الاسترجاع بتاريخ 2019-07-08 .
  36. ^ لينسترا، جيه إيه (يوليو 1995). "تطبيقات تفاعل البوليميراز المتسلسل في علوم الحياة". علم الأحياء الخلوي والجزيئي (نويزي لو جراند، فرنسا) . 41 (5): 603-614. ISSN  0145-5680. PMID  7580841.
  37. ^ "تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR)". المركز الوطني لمعلومات التكنولوجيا الحيوية . المكتبة الوطنية الأمريكية للطب . تم الاسترجاع في 31 ديسمبر 2016 .
  38. ^ "ورقة حقائق حول تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR)". المعهد الوطني لبحوث الجينوم البشري (NHGRI) . تم الاسترجاع في 31 ديسمبر 2016 .
  39. ^ ab Lee, Pei Yun; Costumbrado, John; Hsu, Chih-Yuan; Kim, Yong Hoon (2012-04-20). "الرحلان الكهربائي للهلام الأجاروزي لفصل شظايا الحمض النووي". مجلة التجارب المرئية (62): 3923. doi :10.3791/3923. ISSN  1940-087X. PMC 4846332. PMID 22546956  . 
  40. ^ Lee PY, Costumbrado J, Hsu CY, Kim YH (أبريل 2012). "الرحلان الكهربائي للهلام الأجاروزي لفصل شظايا الحمض النووي". مجلة التجارب المرئية (62). doi :10.3791/3923. PMC 4846332 . PMID  22546956. 
  41. ^ abcdef Bradford, Marion M. (مايو 1976). "طريقة سريعة وحساسة لتحديد كميات الميكروجرام من البروتين باستخدام مبدأ ربط البروتين بالصبغة". الكيمياء الحيوية التحليلية . 72 (1-2): 248-254. doi :10.1016/0003-2697(76)90527-3. PMID  942051. S2CID  4359292.
  42. ^ abc "تحديد البروتين بطريقة برادفورد". www.ruf.rice.edu . تم الاسترجاع في 2021-11-08 .
  43. ^ توماس بي إس (سبتمبر 1980). "تهجين الحمض النووي الريبي المتحلل وشظايا الحمض النووي الصغيرة المنقولة إلى نتروسليلوز". وقائع الأكاديمية الوطنية للعلوم في الولايات المتحدة الأمريكية . 77 (9): 5201-5. رمز Bibcode : 1980PNAS...77.5201T. doi : 10.1073/pnas.77.9.5201 . PMC 350025. PMID  6159641 . 
  44. ^ براون، تيري (1993). "Southern Blotting". البروتوكولات الحالية في علم المناعة . 6 : الوحدة 10.6A. doi :10.1002/0471142735.im1006as06. PMID  18432697.
  45. ^ جوزيفسن، كنود؛ نيلسن، هنريك (2011). "تحليل النقل الشمالي". RNA . طرق في علم الأحياء الجزيئي. المجلد 703. ص 87-105. doi :10.1007/978-1-59745-248-9_7. ISBN 978-1-58829-913-0. PMID  21125485.
  46. ^ He SL, Green R (1 يناير 2013). "Northern blotting". Laboratory Methods in Enzymology: RNA . المجلد 530. ص 75-87. doi :10.1016/B978-0-12-420037-1.00003-8. ISBN 978-0-12-420037-1. PMC  4287216 . PMID  24034315.
  47. ^ ab Mahmood T, Yang PC (سبتمبر 2012). "Western blot: technique, theory, and troubleshooting". مجلة العلوم الطبية لأمريكا الشمالية . 4 (9): 429–34. doi : 10.4103/1947-2714.100998 . PMC 3456489. PMID  23050259 . 
  48. ^ "Western blot | Learn Science at Scitable". www.nature.com . تم الاسترجاع في 2021-11-25 .
  49. ^ Kurien BT, Scofield RH (أبريل 2006). "Western blotting". Methods . 38 (4): 283–93. doi :10.1016/j.ymeth.2005.11.007. PMID  16483794.
  50. ^ توماس س، ثيرومالابورا ن، كروسلي إي سي، إسماعيل ن، ووكر دي إتش (يونيو 2009). "التعديلات البروتينية المستضدية في إيرليخيا". علم المناعة الطفيلية . 31 (6): 296-303. doi :10.1111/j.1365-3024.2009.01099.x. PMC 2731653. PMID  19493209 . 
  51. ^ "Microarrays". المركز الوطني لمعلومات التكنولوجيا الحيوية . المكتبة الوطنية الأمريكية للطب . تم الاسترجاع في 31 ديسمبر 2016 .
  52. ^ بومغارنر، روجر (2013). "نظرة عامة على مصفوفات الحمض النووي الدقيقة : الأنواع والتطبيقات ومستقبلها". البروتوكولات الحالية في علم الأحياء الجزيئي . 101 : الوحدة 22.1. doi :10.1002/0471142727.mb2201s101. PMC 4011503. PMID  23288464. 
  53. ^ Govindarajan R, Duraiyan J, Kaliyappan K, Palanisamy M (أغسطس 2012). "Microarray and its applications". مجلة الصيدلة والعلوم الحيوية المتحالفة . 4 (ملحق 2): S310-2. doi : 10.4103/0975-7406.100283 . PMC 3467903. PMID  23066278 . 
  54. ^ Tarca AL, Romero R, Draghici S (أغسطس 2006). "تحليل تجارب المصفوفات الدقيقة لملف تعريف التعبير الجيني". المجلة الأمريكية لأمراض النساء والولادة . 195 (2): 373–88. doi :10.1016/j.ajog.2006.07.001. PMC 2435252. PMID  16890548 . 
  55. ^ Cheng L, Zhang DY, eds. (2008). علم الأمراض الجيني الجزيئي. Totowa, NJ: Humana. ص. 96. ISBN 978-1-59745-405-6تم الاسترجاع بتاريخ 31 ديسمبر 2016 .
  56. ^ ليونارد دي جي (2016). علم الأمراض الجزيئي في الممارسة السريرية. سبرينغر. ص 31. ISBN 978-3-319-19674-9تم الاسترجاع بتاريخ 31 ديسمبر 2016 .
  57. ^ Tian J, ed. (2013). التصوير الجزيئي: الأساسيات والتطبيقات. Springer-Verlag Berlin & Heidelberg GmbH & Co.K. ص 550، 552. ISBN 9783642343032. تم الاسترجاع بتاريخ 2019-07-08 .

قراءة إضافية

  • Cohen SN, Chang AC, Boyer HW, Helling RB (نوفمبر 1973). "إنشاء البلازميدات البكتيرية الوظيفية بيولوجيًا في المختبر". وقائع الأكاديمية الوطنية للعلوم في الولايات المتحدة الأمريكية . 70 (11): 3240-4. Bibcode :1973PNAS...70.3240C. doi : 10.1073 /pnas.70.11.3240 . PMC  427208. PMID  4594039.
  • رودجرز م (يونيو 1975). "مؤتمر صندوق باندورا". مجلة رولينج ستون . المجلد 189. ص 37-77.
  • روبرتس ك، راف م، ألبرتس ب، والتر ب، لويس ج، جونسون أ (2002). علم الأحياء الجزيئي للخلية. جارلاند ساينس. رقم ISBN 978-0-8153-3218-3.
مصادر المكتبة حول
علم الأحياء الجزيئي
  • الموارد الموجودة في مكتبتك
  • الموارد في المكتبات الأخرى
  • الوسائط المتعلقة بعلم الأحياء الجزيئي في ويكيميديا ​​كومنز
Retrieved from "https://en.wikipedia.org/w/index.php?title=Molecular_biology&oldid=1246706007"
Original text
Rate this translation
Your feedback will be used to help improve Google Translate